慢性乙型肝炎T淋巴細胞表達與病毒載量相關性的討論

施長友

慢性乙型肝炎(CHB)嚴重威脅著人類的生命健康。全球慢性HBV感染者約(3.5～4.0)億人，我國屬于乙型肝炎高發區域。HBV感染機體后出現急性自限性感染、遷延不愈形成慢性感染、以及發展為肝硬化、肝癌而奪取人的生命。現階段抗病毒治療慢性乙型肝炎是最常用也是最有效的治療手段之一，然而抗病毒治療療效存在明顯的個體差異，其中基線的HBV-DNA載量與抗病毒應答有直接關系，病毒載量越低抗病毒應答率越高［1］。CHB的發病與治療時機選擇均與患者免疫相關，本文就患者的T淋巴細胞與血清HBV-DNA載量相關性進行討論，報告如下。

對象與方法

1.對象:選取2009年3月～2010年5月間在杭州市第六人民醫院住院的乙型肝炎患者153例臨床診斷均符合2010年我國新制定的《慢性乙型肝炎防治指南》診斷標準［2］排除其他型肝炎的感染以及引起肝損傷的疾病，其中男性80例，女性73例，年齡15～60歲，平均年齡42.5歲。

2.方法:血清HBV-DNA載量檢測采用實時熒光定量PCR法，采用試劑為上海之江生物科技有限公司生產，檢測儀器為美國應用生物系統公司生產AB7900-384熒光定量核酸檢測儀。T淋巴細胞亞群檢測采用流式細胞技術，所用試劑購自英國Proimmune公司，檢測儀器為EpicsXL-MCL型流式細胞儀(美國Beckman Coulter公司)。所有檢測項目均嚴格按照試劑盒說明書進行。

3.統計學方法:采用SPSS 13.0統計分析軟件，兩組間均數的比較采用t檢驗，多組間均數采用單因素方差分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

結 果

153例CHB患者根據血清HBV-DNA載量分為HBV-DNA陰性組(病毒載量＜1×103IU/ml)75例，HBV-DNA陽性組(病毒載量≥1×103IU/ml)78例，陰性組非特異性T淋巴細胞平均值為45.27%±8.25%，非特異性T淋巴細胞平均值為20.25% ±5.18%。陽性組特異性T淋巴細胞平均值為25.58%±7.36%，非特異性T淋巴細胞平均值為33.17% ±6.42%，兩組比較差別有統計學意義P＜0.05，數據統計見表1。

表1 不同HBV-DNA載量患者T淋巴細胞表達

討 論

慢性乙型肝炎嚴重威脅人類的生命健康，已知當乙肝病毒HBV進入體內時其本身并不破壞被感染的肝細胞，其肝臟損傷機制主要由機體免疫系統介導，主要依靠細胞毒效應與非細胞毒效應兩種免疫機制清除病毒，但在誘導機體免疫反應清除病毒同時也間接的損傷了肝細胞［3］。T淋巴細胞主要分為特異性T淋巴細胞和非特異性T淋巴細胞，特異性T淋巴細胞只清除靶細胞內的病毒，而對靶細胞本身并無損傷，清除方式為非溶細胞模式，而非特異性T淋巴細胞則表現的不同，在清除病毒的同時常損傷肝細胞。

筆者的研究發現，CHB患者血清HBV-DNA病毒載量的水平與外周血T淋巴細胞相關，在HBVDNA載量＜1×103IU/ml時，特異性T淋巴細胞水平較HBV-DNA≥1×103IU/ml時要高，這恰恰證實了高病毒載量患者特異性T淋巴細胞減少無法及時清除病毒，而特異性T淋巴細胞主要表達的是CD3+、CD4+等，Chang等［4］報道高病毒復制的乙肝患者其體內CD4+T淋巴細胞表現為下降的，這與筆者的高病毒載量患者特異性T淋巴細胞下降一致，邱潔等［5］實驗證明乙型肝炎肝衰竭患者CD3+細胞數量明顯減少，此時肝衰竭的主要原應為病毒持續復制。相反在兩組患者外周血中非特異性T淋巴細胞則表現的不同，當病毒載量較高時非特異性T淋巴細胞表現的較為活躍，而非特異性T淋巴細胞在清除病毒時不具有選擇性會連同肝細胞一同損壞，這也就是臨床上常看到高病毒載量肝功能持續異常存在的可能原因。顧錫炳等［6］也認為慢性乙型肝炎病毒載量的高低與特異性T淋巴細胞呈負相關，與非特異性T淋巴細胞呈正相關，胡學玲［7］的實驗也表明當病毒在105～107拷貝/毫升時T淋巴細胞CD3+、CD4+顯著下降，當病毒＞108拷貝/毫升時CD8+T淋巴細胞顯著升高。

通過筆者的實驗研究可以看出，CHB患者血清HBV-DNA載量與患者外周血T淋巴細胞相關，在對CHB治療的同時如能對T淋巴細胞進行檢測這對了解CHB患者機體免疫狀態以及選擇抗病毒治療均具有重要意義。

1 謝冬英，林炳亮，徐啟恒，等.阿德福韋酯治療e抗原陽性慢性乙型肝炎的療效預測指標探討［J］.中華肝臟病雜志，2008，16:341-344

2 中華醫學會肝病學分會、感染病學分會.慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)［J］. 中華臨床感染病雜志，2011，4(1):1-13

3 Rushbrook SM，Hoare M，Alexaader GJ.T—regulatory lymphoeytes and chronic vival hepatitis［J］.Exper orlin Biol Vrher，2007，7(11):1689-1703

4 Chang JJ，Thompson AJ，Visvanathan K，et al.The phenotyre of hepatitis B viruv—specific T cells diffef in the liver and blood in Chronic hepatitis virvs infection［J］.Hepatolgy，2007，46(5):1332-1340

5 邱潔，龍啟強，馮艷紅，等.慢性乙型肝炎患者外周血NK細胞和T淋巴細胞計數變化及其臨床意義［J］.實用肝臟病雜志，2010，13(3):178-179

6 顧錫炳，楊小娟，王棟，等.慢性乙型肝炎患者HBV DNA水平與細胞毒性T淋巴細胞及肝功能的關系［J］.中華傳染病雜志，2010，25(8):497-499

7 胡學玲，陳天寶，范公忍，等.慢性乙型肝炎外周血T淋巴細胞亞群變化及其臨床意義［J］.細胞與分子免疫學雜志，2010，26(9):912-913