FQ-PCR檢測(cè)不孕不育和泌尿患者解脲支原體結(jié)果分析

梁勇彪，謝 明，許成良，邱卓毅，屈雅川

(廣西南寧市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，南寧 530031)

FQ-PCR檢測(cè)不孕不育和泌尿患者解脲支原體結(jié)果分析

梁勇彪※，謝 明，許成良，邱卓毅，屈雅川

(廣西南寧市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，南寧 530031)

目的了解不孕不育患者和泌尿生殖道患者的解脲支原體(UU)的感染情況。方法選擇2009年至2011年9月不孕癥患者共5555對(duì)，泌尿患者4418例。取患者精液、前列腺液、宮頸黏液，采用PCR法進(jìn)行UU檢測(cè)。結(jié)果不孕不育患者和泌尿患者UU-PCR陽(yáng)性檢出率分別為19.80%和8.06%，兩組患者陽(yáng)性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=317，P＜0.05)。結(jié)論UU感染的非淋菌性尿道炎與不孕不育癥密切相關(guān)，同時(shí)也是引發(fā)不孕不育的因素之一。

解脲支原體;不孕不育;非淋菌性尿道炎

不孕不育癥近年來(lái)呈上升趨勢(shì)。其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，是生活方式的改變，環(huán)境污染，藥物影響，生殖器官感染以及人們生育觀念及性病的傳播等諸多因素共同作用的結(jié)果，不孕不育癥的患者激增已引起醫(yī)學(xué)界和政府衛(wèi)生部門(mén)的高度關(guān)注。據(jù)資料顯示，解脲支原體(Ureaplasma urealyticum，UU)成為當(dāng)前性傳播疾病的主要病原體之一，與不孕不育癥有著密切的關(guān)系［1］。本研究通過(guò)對(duì)不孕不育和泌尿患者這兩類(lèi)UU的高感染率患者進(jìn)行分析對(duì)比，提示不孕不育患者檢測(cè)UU的重要性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2009至2011年9月來(lái)本院生殖中心就診的5555對(duì)不育夫妻(即11 110例)，其中男23～50歲，平均35歲;女22～44歲，平均30歲。5555對(duì)夫妻都是3年以上未避孕而不能生育者，符合不孕不育標(biāo)準(zhǔn)。另外，選取泌尿科門(mén)診就診的泌尿生殖道感染患者4418例，其中男2512例，年齡23～60歲，平均35歲;女1906例，年齡22～53歲，平均30歲。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 生殖中心男性取精液送檢，泌尿患者男性采取人工取前列腺液。女性標(biāo)本采集用窺陰器擴(kuò)展陰道，然后用無(wú)菌棉簽擦凈分泌物，最后用無(wú)菌干棉簽插入宮頸內(nèi)旋轉(zhuǎn)180°，停留30 s后取出標(biāo)本，植入1 mL無(wú)菌0.9%氯化鈉溶液離心管內(nèi)洗滌擠干，棄拭子、送檢。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)方法 儀器選用美國(guó)生產(chǎn)的ABI 7300型實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)。試劑盒由廣州中山醫(yī)科大學(xué)達(dá)安基因診斷中心提供聚合酶鏈反應(yīng)UU試劑盒。

標(biāo)本處理：把標(biāo)本放在振蕩器上充分振蕩，使分泌物游離出來(lái)，1500 r/min離心5 min，棄上清液，沉淀物中加入50 μL DNA提取液懸浮沉淀物。100℃溫度下裂解 10 min，1000 r/min 離心5 min，取 2 μL 模板上清液加入各自動(dòng)反應(yīng)管供聚合酶鏈反應(yīng)用。按試劑說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組患者2009年、2010年、2011年UU陽(yáng)性檢出率比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)(表1)。3年11 110例不育患者中，檢出UU陽(yáng)性2200例;4418例泌尿患者中，檢出UU陽(yáng)性356例，陽(yáng)性檢出率分別為19.80%和8.06%，不孕不育患者感染UU的比例遠(yuǎn)高于普通泌尿生殖道感染患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=317，P＜0.05)。

表1 兩組患者PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較

3 討論

UU是一類(lèi)原核細(xì)胞微生物，介于細(xì)菌與病毒之間，是人類(lèi)泌尿生殖道的常見(jiàn)病原體，是性傳播疾病的病原體之一。UU可引起泌尿生殖道感染，經(jīng)過(guò)胎盤(pán)垂直傳播或孕婦下生殖道感染上行擴(kuò)散，引起宮內(nèi)感染，兩者均可導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)、胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩，甚至造成胎死宮內(nèi)等一系列不良后果［1-2］。本研究采取實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)兩組患者UU陽(yáng)性率的結(jié)果顯示，不孕不育組感染UU(19.80%)的比例遠(yuǎn)高于泌尿組患者(8.06%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=317，P＜0.05)。

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，男性感染UU后可使精子的形態(tài)發(fā)生改變，干擾了精子的活力和運(yùn)動(dòng)能力，使精子數(shù)量減少，活動(dòng)力下降，影響精子與卵子的接觸和受精，從而引起不育［3］。女性宮頸部的支原體極易吸附在精子的表面，隨精子到達(dá)宮腔和輸卵管，引起宮腔炎和輸管炎，導(dǎo)致輸卵管阻塞和受精卵著床不良。無(wú)論生殖道哪個(gè)部位被UU感染，均會(huì)引起相當(dāng)數(shù)量的輸卵管通液障礙，是原發(fā)性或繼發(fā)性不孕癥的病因之一［4］。國(guó)內(nèi)學(xué)者還發(fā)現(xiàn)，羊水極有利于UU的生長(zhǎng)，而UU分解尿素產(chǎn)生的氨和H2O2對(duì)胎兒有較大的毒害作用［5］，上述因素均可導(dǎo)致胎兒流產(chǎn)。由于UU是通過(guò)性生活傳播，不僅要對(duì)患者進(jìn)行積極治療，同時(shí)對(duì)其配偶也應(yīng)治療，以改變不孕不育的狀況。綜上所述，UU感染的非淋菌性尿道炎不僅與不孕不育癥存在著密切相關(guān)性，同時(shí)也是引發(fā)不孕不育的眾多因素之一。

［1］樂(lè)杰.婦產(chǎn)科學(xué)［M］.6版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2004：185.

［2］岑福柱，楊秀群.解脲支原體與女性生殖道疾病關(guān)系［J］.醫(yī)學(xué)綜述，2008，6(12)：1829-1830.

［3］萬(wàn)長(zhǎng)春，汪弘，商學(xué)軍，等.UU感染對(duì)精子運(yùn)動(dòng)軌跡影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.男科學(xué)報(bào)，1999，5(1)：29-31.

［4］陸靜，梁占光，韓字研.輸卵管性不孕與沙眼衣原體淋病雙球菌及解脲支原體感染的關(guān)系［J］.中華婦產(chǎn)科雜志，1998，33(6)：371-373.

［5］潭巨蓮，李進(jìn)，孫輝臣，等.石家地區(qū)73例羊水解脲脲原體分離培養(yǎng)結(jié)果與臨床分析［J］.中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志，1999，7(1)：76-77.

Analysis on the Results of UU of Infertility and Urological Patients with FQ-PCR Method

LIANG Yong-biao，XIE Ming，XU Cheng-liang，QIU Zhuo-yi，QU Ya-chuan.(Department of Clinical Laboratory，the Second People's Hospital of Guangxi Nanning，Nanning530031，China)

ObjectiveTo understand ureaplasma urealyticum(UU)infection situation of infertility patients and urogenital patients.MethodsUU of semen，prostatic fluid，cervical mucus of 5555 pairs of infertility and 4418 urinary patients from 2009 to September，2011 were tested by PCR.ResultsUU-PCR positive rates of patients with infertility and urological patients were 19.80%and 8.06%respectively，the positive rates of the two groups were statistically significantly different(χ2=317，P＜0.05).ConclusionUU infected non-gonococcal urethritis is not only closely related to infertility，but also an important factor causing infertility.

Ureaplasma urealyticum;Infertility;Non-gonococcal urethritis

R711

A

1006-2084(2012)13-2151-02

2011-11-18

2012-02-18 編輯：伊姍