四種梅毒抗體血清學(xué)檢驗方法的比較

李雷花

梅毒是一種由梅毒螺旋體(TP)引起的全身各器官病變的性傳播疾病，其傳染力強(qiáng)、危害性大。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WTO)報告，成年人每年新發(fā)梅毒1200萬，已成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題［1］。梅毒的診斷需依據(jù)病史，臨床表現(xiàn)及血清學(xué)診斷，由于梅毒早期的臨床表現(xiàn)并不典型，有些患者對病史陳述缺乏真實性，故血清學(xué)檢測是診斷梅毒的主要手段之一。目前，臨床實驗室常用的血清學(xué)診斷TP的有甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(TRUST)，膠體金法，ELISA法、TPPA法等等不同的檢測方法都有其特殊的臨床應(yīng)用價值，選擇有效的方法對梅毒早期診斷、預(yù)防和控制梅毒的傳播，避免因錯誤的檢測結(jié)果引起不必要的醫(yī)療糾紛有著重要意義。

本文對255例患者的血清就我院檢驗科常用的TRUST法膠體金法ELISA法以下方法學(xué)評價。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011年1月至12月皮膚科患者255例，年齡19-70歲。男性125例，女性:89例。

1.2 試劑與儀器 TRUST試劑、膠體試劑均為英科新創(chuàng)公司產(chǎn)品，ELISA試劑為上海科華生物工程股份有限公司產(chǎn)品，TPPA試劑由日本富士株式會社產(chǎn)品:

全自動酶免分析系統(tǒng)(RMP200)振漏器、離心機(jī)等。

1.3 檢測方法 所有受試者均空腹抽血5ml，4000r/min離心5min后分離血清，血清標(biāo)本不能及時檢測則置于4℃冰箱，避免反復(fù)凍融，均采用TRUST法，ELISA法，膠體金法與TPPA對所選擇標(biāo)本按各種方法試劑盒說明進(jìn)行檢測。前三種方法所檢測結(jié)果均與TPRA進(jìn)行比較。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 每種方法與TPPA法檢測結(jié)果之間采用χ2檢驗，均以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

對255例皮膚科門診患者用四種梅毒抗體血清學(xué)檢測，以TPPA試驗為金標(biāo)準(zhǔn)，對TRUST法，膠體金法，ELISA法進(jìn)行評價，其結(jié)果表明，TRUST、膠體金、ELISA的敏感度分別73.56%、95.4%、98.8%，特異度分別為 97.0%、98.9%、100%，ELISA法，膠體金法與TPPA法比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，而TRUST與TPPA法比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，見表1。

表1 三種血清學(xué)方法檢測結(jié)果的評價

3 討論

人感染梅毒螺旋體后，可存于患者的血液及腦脊液中，3～6周可產(chǎn)生非特異性抗類脂抗體和特異性抗螺旋體抗體IgM和IgG、IgG終身存在于人體內(nèi)，可終身檢出陽性［2］。臨床梅毒檢測常用血清學(xué)試驗分為非梅毒螺旋體抗原試驗(如TRUST、RPR)和梅毒螺旋體抗原試驗(TPPA，ELISA等)。

TRUST是采用牛心中提取的心脂肪，同固醇、孵磷脂組成性病研究室VDRL抗原重地含有特制的甲苯胺紅溶液制成，檢測血漿或血清中的反應(yīng)素，在梅毒感染初期，由于反應(yīng)素不足，無法用TRUST檢測到，一般為陰性。4周后陽性率10%～30%，6～8周后大多100%，經(jīng)治愈由25%自然轉(zhuǎn)陰［3］。很多時候易受到某些傳染病或自身免疫性疾病的影響，常出現(xiàn)生物學(xué)假陽性，主要見于懷孕、SLE、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。由于TRUST試驗在梅毒診斷上出現(xiàn)較高的假陽性和假陰性結(jié)果，許多學(xué)者以為TRUST已不適合作為梅毒篩選試驗，但是TRUST試驗滴度與病程有關(guān)，由于非特異性性抗體是TP破壞患者組織，后釋放的物質(zhì)刺激機(jī)體產(chǎn)生的，TP在人體的活動程度基本上與此抗體的滴度成正比，所以TRUST是梅毒經(jīng)診斷后，觀察療效和判斷復(fù)發(fā)的指標(biāo)［4］。

臨床上常用的檢測特異性抗的試驗有膠體金，ELISA，TPPA試驗，膠體金法是一種應(yīng)用現(xiàn)代生物工程技術(shù)制備的高度純化的單克隆TP的基因工程抗原，具有快速操作簡便，準(zhǔn)確的特點，而且不需要特殊設(shè)備，結(jié)果易判讀，但其法也存在一定的假陽性。在TP潛伏期時易漏診，所以只能作為急診或術(shù)前的一般篩查。TPPA是將梅毒的精制菌體成分包被在人工載體明膠粒上，對梅毒特異性抗體檢測具有高度特異性和敏感性，是目前公認(rèn)的確認(rèn)實驗，但TPPA法操作復(fù)雜，結(jié)果判定需人工而不能用于自動化，限制了其用于大批量標(biāo)本的篩查。ELISA法是用雙抗原夾心法測血清中的特異性抗體，對各期梅毒的檢出率較高，其特異性和敏感性與TPPA非常接近，并且具有操作簡便，可自動化，標(biāo)準(zhǔn)化的優(yōu)點，能大批量同時檢測，但ELISA結(jié)果陽性只能說明正在或曾經(jīng)感染過梅毒，而不能判斷梅毒的活動情況，故不能用于療效觀察，梅毒復(fù)發(fā)或再感染的診斷。

綜上所述，根據(jù)梅毒螺旋體的生物學(xué)及免疫學(xué)特性，結(jié)合臨床上不同的檢測目的，采用ELISA法對臨床標(biāo)本進(jìn)行大批量標(biāo)本的篩查，膠體金法用急診或術(shù)前篩選，用TPPA法進(jìn)行確診，以TRUST法進(jìn)行療效判斷是較理想的實驗室梅毒血清學(xué)檢驗組合。

［1］薛大奇.關(guān)于當(dāng)前梅毒診治中的幾個問題的探討.中國性科學(xué)，2008，8(17):23-25.

［2］阮豪驥.兩種梅毒檢驗方法比較的初步研究.檢驗醫(yī)學(xué)，2005，17(2):180.

［3］楊林.楊健等早期梅毒治療前位血清學(xué)分析.臨床皮膚科雜史，2002，27(5):314-315.

［4］吳薇.試析TPHA與TRUST在梅毒血清學(xué)診斷中的應(yīng)用.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2003，13(2):235.