腦梗死急性期局部血流量變化及電針干預效應研究*

石 磊，杜元灝

腦梗死在中風病中所占比例最大，從目前針灸病譜研究結果看，其在神經系統針灸病譜中占第一位[1]。腦梗死發生后，治療的關鍵在于迅速清除代謝產物、改善腦組織缺血缺氧的狀態，兩者均依賴梗死區周圍微血管網的機能狀態。“微血管樞紐學說”認為[2]：腦梗死急性發生后，腦表面側枝血管系統猶如一個“閘門”，“閘門”的機能狀態決定著缺血細胞的命運。基于此，本研究著重強調針刺對腦表面側枝血管系統的調節作用，前期研究發現針刺并非像擴張血管藥物那樣只是簡單地擴張血管[3-5]，而是能有效地改善微血管的舒縮協調運動，協調流質、流場的動態耦合運動。研究結果提示針刺人中改善腦血管的機能狀態，促進腦表面側支循環是治療腦梗死的重要途徑和環節。

本研究通過動態監測腦梗死后大腦皮質血流的變化，探討以下兩個問題：1）腦梗死急性期大腦皮質血流變化規律。2）電針的干預效應。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組 健康雄性Wistar大鼠（北京大學醫學部實驗動物科學部提供），體質量180~200g，按隨機數字表法隨機分為模型對照組和電針干預組14只。

1.2 主要儀器及試劑 激光多普勒血流儀（Moor Instruments，DRT-4）；小動物腦立體定位儀；LH202H型韓氏電針儀（中國北京）；10%水合氯醛溶液。

2 實驗步驟

2.1 模型復制 采用Longa的腔內線栓法阻滯大鼠左側大腦中動脈，復制大腦中動脈梗死（MCAO）模型，尼龍線直徑為0.205 mm。大鼠經10%水合氯醛（3 mL/kg）腹腔內注射麻醉，仰臥于手術臺上，頸正中偏左側切口，分離左側頸總動脈、頸外動脈、頸內動脈，結扎頸外動脈，頸總動脈近心端和分叉處放置動脈夾，在兩動脈夾中間扎孔，插入尼龍線拴，長度18~22 mm，線栓進入頸內動脈稍遇阻力即停止進線，結扎線拴和頸總動脈，放開頸總動脈近心端動脈夾，縫和皮膚。

2.2 處理方法

2.2.1 激光多普勒探頭定位 大鼠經水合氯醛麻醉，俯臥位固定，手術常規操作，沿頭皮正中縱向2 cm切口，分離皮下組織，剝離骨膜，暴露冠狀縫及矢狀縫，多普勒激光探頭固定部位為：以冠狀縫與矢狀縫結合點為原點，冠狀縫向后4 mm，矢狀縫旁開3 mm，定位后用牙科鉆將顱骨磨薄，固定激光多普勒探頭，同時動態記錄雙側局部腦血流量（rCBF）。整個監測過程中大鼠保持麻醉狀態，連續記錄6 h，保持溫度恒定37℃。

2.2.2 模型對照組處理因素 大鼠麻醉45 min后，首先進行局部血流量基值的測定，再進行MCAO模型的復制，造模后即刻再次測量局部血流量，并連續記錄6 h，不施加其他處理因素。

2.2.3 電針干預組處理因素 大鼠麻醉45 min后，首先測定局部血流量基值，再進行MCAO模型的復制，造模后即刻再次測量局部血流量，然后進行電針刺激，針刺人中穴，人中穴定位根據華興邦的動物穴位圖譜，用毫針（10×40 mm，華佗牌GB2024-1994）在大鼠鼻中隔下方向上斜刺2 mm，并在該部位下約2 mm處刺入1針作為參考電極，人中穴接電針儀的正極，參考電極接負極，用15 Hz，1 mA的連續波刺激，持續20 min。電針刺激結束，繼續測定局部血流量，連續記錄6 h，不施加其他處理因素。

2.3 納入排除標準 以大鼠MCAO后即刻局部腦血流量下降至同側梗死前測定值的35%以下為成功模型；以下3種情況為造模不成功，一律剔除。1）MCAO后即刻同側腦皮質血流量下降，但高于梗死前測定值的35%。2）MCAO后即刻對側腦血流量出現急劇下降，提示蛛網膜下腔出血。3）實驗結束后取腦時見有頸內動脈分叉部出血的。

2.4 統計處理 采用SPSS18.0軟件對各組數據進行統計分析，計量資料用均數±標準差（s）表示，采用重復測量的方差分析，P<0.05為差異有統計學意義。

3 實驗結果

實驗結果，見表1，表2。

實驗結果顯示，實驗大鼠在MCAO前，雙側腦半球局部血流量處于平穩狀態。MCAO即刻，模型對照組梗死半球局部腦血流量急劇下降至MCAO前的（25.18±1.87）%，伴隨著腦梗死的發作，梗死灶對側半球局部腦血流量下降至MCAO前血流量值的（86.55±1.46）%，在 MCAO 后 30 min~6 h，隨時間延續，模型對照組大鼠雙側腦半球局部血流量均有上升趨勢，但上升幅度較小，各時相前后對比無統計學差異。電針干預組梗死半球局部腦血流量在MCAO即刻急劇下降至（23.46±1.24）%，梗死灶對側半球局部腦血流量下降至（86.70±2.21）%，電針干預后，雙側腦半球局部血流量上升明顯，梗死半球局部腦血流量上升至（46.96±1.61）%并維持在這一水平，在 MCAO 后 30 min 和 1、2、3、4、5、6 h，與模型對照組各時相比較均有統計學差異，電針干預使局部腦血流平均升高了20%；梗死灶對側半球局部腦血流量在電針刺激后上升至（97.46±3.28）%并維持這一水平，在MCAO后30 min和1 h，與模型對照組比較有統計學差異，其余各時相對比沒有統計學差異，但電針干預組血流量比值平均升高了12%，高于模型對照組。

表1 MCAO同側半球局部腦血流量變化(s)%

表1 MCAO同側半球局部腦血流量變化(s)%

注：與模型對照組比較，*P<0.001。

組別

表2 MCAO對側半球局部腦血流量變化(s)%

表2 MCAO對側半球局部腦血流量變化(s)%

注：與模型對照組比較，*P<0.05。

刻 梗死30 min 梗死1 h 梗死2 h 梗死3 h 梗死4 h 梗死5 h 梗死6 h梗死前 梗死即模型對照組 100 86.55±1.46 85.29±2.12* 85.12±2.37* 88.46±2.90 87.13±4.20 88.06±3.11 86.89±1.98 87.42±3.99電針干預組 100 86.70±2.21 97.46±3.28* 101.01±4.31* 96.32±3.55 100.62±5.39 95.54±4.79 97.56±5.69 94.48±3.71組別

4 結論

電針干預可顯著提高MCAO模型大鼠局部腦血流量，并且，電針干預可同步提高梗死灶對側半球局部腦血流量，由此可增加梗死區周圍腦血流灌注。

5 討論

在筆者的前期研究中[3-6]，取大鼠腦組織表面的軟腦膜血管網為樣本，從腦血管平滑肌細胞信號轉導途徑，探討電針干預對腦血管舒縮運動相關信使分子的影響。研究結果表明，電針人中穴干預能夠通過肌醇磷脂信號轉導途徑調節腦血管收縮運動；并通過環核苷酸信號途徑調節腦血管的舒張運動，通過對痙攣、舒張兩方面的調節、平衡，使腦表面動脈血管機能狀態趨向于正常化，與本研究結果一致，而相關的臨床研究同樣證實了這一干預作用的后效應[7]。

本研究的目的在于探討電針干預對腦梗死側支循環的作用，實驗結果表明，MCAO后即刻，梗死灶同側半球局部腦血流顯著下降，與梗死前血流量值相比，腦血流平均下降至24.32%（最小值16.01%，最大值33.79%）。電針治療后，腦血流顯著升高至梗死前血流量的46.96%，平均升高幅度20%（最小11.90%，最高32.95%）。實驗結果顯示，通過激光多普勒檢測MCAO之后，梗死半球局部腦血流量顯著下降，而對側腦半球（非梗死側）局部腦血流量也出現不同程度下降，相關的研究也證實了這一現象[8-9]，同樣值得進一步深入研究。

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[2]杜元灝.缺血性中風治療焦點的思考[C].天津：中國針灸學會腦病科學專業委員會成立暨第一屆學術會議論文集，2007：42－46.

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