單側(cè)輸尿管部分梗阻對大鼠腎盂平滑肌功能的影響

張雪峰 王東文 茹 峰 尹 楠 孫飛達(dá)

山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院泌尿外科，山西太原 030001

尿路梗阻性疾病在泌尿系統(tǒng)疾病中占有重要的地位。臨床上常見的輸尿管梗阻多為部分梗阻，基本改變?yōu)楣Ｗ枰陨喜课粔毫ι撸瑪U(kuò)張、積水，最終引起腎臟功能損害。目前對這類疾病的研究多集中在輸尿管和腎臟，對腎盂部位的研究較少。本實(shí)驗(yàn)筆者通過大鼠輸尿管部分梗阻 （partial unilateral ureter obstruction，PUUO）動物模型，利用離體肌條實(shí)驗(yàn)對腎盂平滑肌自主收縮頻率和收縮力的功能學(xué)改變進(jìn)行研究，以期進(jìn)一步認(rèn)識單側(cè)輸尿管部分梗阻的病理生理，為更好地開展上尿路尿動力學(xué)研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物及分組

成年健康雄性 Wistar大鼠 80 只，體重（200±20）g，由山西醫(yī)科大學(xué)生理實(shí)驗(yàn)室動物中心提供，隨機(jī)分為四組：8周實(shí)驗(yàn)組（n=20），8 周對照組（n=20），16 周實(shí)驗(yàn)組（n=20），16 周對照組（n=20）。

1.2 動物模型的建立

以10%水合氯醛（3 mL/kg）腹腔注射麻醉實(shí)驗(yàn)大鼠，仰臥位固定，剃除腹部鼠毛，絡(luò)合碘消毒，取大鼠左側(cè)腹部腎區(qū)切口，逐層切開入腹腔，顯露左側(cè)輸尿管上端，將輸尿管自腎下極水平仔細(xì)游離至髂腰血管之間，在大鼠腰大肌腹側(cè)分離出一條深約0.5 cm的縱形裂隙，將輸尿管上1/2段置于縱形裂隙底部，并用3-0絲線間斷縫合2～3針，關(guān)閉裂隙。生理鹽水沖洗腹腔后，逐層關(guān)閉腹腔。對照組除不包埋輸尿管外，其余操作同實(shí)驗(yàn)組。

1.3 模型的檢驗(yàn)

參照文獻(xiàn)[1-2]的方法通過腎盂壓力測定進(jìn)行模型檢驗(yàn)。

1.4 離體肌條實(shí)驗(yàn)

以10%水合氯醛（3 mL/kg）腹腔注射麻醉實(shí)驗(yàn)大鼠，仰臥位固定，剃除腹部鼠毛，絡(luò)合碘消毒，取大鼠左側(cè)腹部腎區(qū)切口，逐層切開入腹腔，顯露左側(cè)腎臟及輸尿管上段并切除，放入欲冷的0℃Krebs液中備用。在解剖鏡下剔除腎盂黏膜，切成約1 cm的肌條，進(jìn)行離體腎盂平滑肌肌條實(shí)驗(yàn)[3-4]，記錄腎盂平滑肌的收縮頻率和收縮力。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 16.0對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)總體情況

40只PUUO大鼠模型中，8周實(shí)驗(yàn)組和16周實(shí)驗(yàn)組因感染等原因?qū)е滤劳龊徒?jīng)壓力測定篩選后分別有15只和14只完成了實(shí)驗(yàn)。8周對照組和16周對照組分別有17只和18只完成了實(shí)驗(yàn)。

2.2 離體肌條實(shí)驗(yàn)

8周實(shí)驗(yàn)組腎盂平滑肌收縮頻率和收縮力分別為（9.68±3.24）次/30 s，（0.45±0.13）g；8 周對照組腎盂平滑肌收縮頻率和收縮力分別為（8.47±2.19）次/30 s，（0.24±0.10）g。16 周實(shí)驗(yàn)組腎盂平滑肌收縮頻率和收縮力分別為（7.32±1.56）次/30 s，（0.13±0.05）g；16周對照組腎盂平滑肌收縮頻率和收縮力分別為次（8.29±2.26）次/30 s，（0.22±0.09）g。 8 周實(shí)驗(yàn)組腎盂平滑肌收縮頻率和收縮力均高于同期對照組（P＜0.05）。16周實(shí)驗(yàn)組均低于同期對照組（P＜0.05）。8周對照組和16周對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。8周實(shí)驗(yàn)組高于16周實(shí)驗(yàn)組（P＜0.05）。 見表 1。

表1 8周和16周時(shí)腎盂平滑肌收縮頻率和收縮力（x±s）

3 討論

腎盂和輸尿管的功能是將腎臟收集系統(tǒng)的尿液排入膀胱。正常情況下，腎收集系統(tǒng)近端區(qū)域內(nèi)的起搏細(xì)胞的電活動向遠(yuǎn)端傳導(dǎo)，并使輸尿管壁平滑肌規(guī)律的收縮蠕動，推動尿團(tuán)向遠(yuǎn)端行進(jìn)，并經(jīng)過輸尿管和膀胱連接部，尿液單方向進(jìn)入膀胱，而不反流。因此，腎盂和輸尿管任何部位的病變都可能出現(xiàn)尿液輸送異常，最終不同程度地影響腎臟功能。

臨床工作中有時(shí)發(fā)現(xiàn)輸尿管梗阻或下尿路梗阻引起腎積水的患者，由于梗阻沒有及時(shí)發(fā)現(xiàn)，病情進(jìn)一步加重，最后雖然采用手術(shù)方法解除了梗阻，術(shù)后經(jīng)靜脈腎盂造影（IVP）和逆行造影證實(shí)上尿路的確通暢，但是患者腎積水的問題仍然存在。基于尿液輸出的原理，原因可能為長期梗阻導(dǎo)致了輸尿管平滑肌或腎盂平滑肌收縮功能出現(xiàn)異常。

本實(shí)驗(yàn)小組前期以輸尿管為研究對象，對單側(cè)輸尿管部分梗阻后輸尿管平滑肌的功能進(jìn)行了測定[4]，對單側(cè)輸尿管部分梗阻后輸尿管平滑肌中α1-腎上腺素能受體改變的進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究[5]，對單側(cè)輸尿管部分梗阻后輸尿管平滑肌細(xì)胞中游離Ca2+濃度變化進(jìn)行了測定[6]。現(xiàn)在研究認(rèn)為：腎盂、腎盞、輸尿管的平滑肌都有自發(fā)性收縮功能，腎盂、腎盞位置的細(xì)胞自律頻率最高，它控制輸尿管的自發(fā)性收縮[7]。本實(shí)驗(yàn)以腎盂平滑肌為研究對象，對單側(cè)輸尿管部分梗阻后腎盂平滑肌的功能進(jìn)行測定。通過本實(shí)驗(yàn)觀察到，在單側(cè)輸尿管部分梗阻前期，腎盂平滑肌收縮頻率和收縮力均增高，隨著病程進(jìn)展，腎盂平滑肌收縮頻率和收縮力均降低。結(jié)合已有研究推測：輸尿管梗阻前期，尿流受阻使梗阻部位以上輸尿管、腎盂擴(kuò)張，出現(xiàn)反應(yīng)性平滑肌組織肥大和增生，并通過提高腎盂平滑肌收縮頻率和收縮力發(fā)揮一定的代償作用。隨著病程進(jìn)展，梗阻部位以上輸尿管、腎盂進(jìn)一步擴(kuò)張，管壁變薄，平滑肌細(xì)胞間膠原和彈性纖維組織沉淀，導(dǎo)致腎盂平滑肌收縮頻率和收縮力均降低，失去了代償作用。另外，隨著梗阻的時(shí)間延長，可能損害了肌性電脈沖傳導(dǎo)和蠕動，平滑肌收縮頻率和收縮力不可逆下降，致腎盂內(nèi)壓力小于膀胱內(nèi)壓力。所以臨床工作中有時(shí)發(fā)現(xiàn)腎積水的患者，最后雖然采用手術(shù)方法解除了梗阻，但是患者腎積水的問題仍然存在。是否可以通過藥物[8]或電生理刺激使失去代償作用的輸尿管、腎盂平滑肌恢復(fù)收縮功能，解決臨床工作中發(fā)現(xiàn)的問題，有待于從分子學(xué)角度做進(jìn)一步研究。

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[4]茹峰，王東文，雙衛(wèi)兵.大鼠輸尿管部分梗阻后平滑肌形態(tài)及功能的改變[J].中華泌尿外科雜志，2009，30（11）：745-748.

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[6]尹楠，茹峰，王東文.輸尿管部分梗阻后平滑肌細(xì)胞中游離Ca2+濃度改變[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2011，8（8）：6-8.

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