高效液相色譜法測定小兒咳喘口服液中綠原酸的含量

鄧云天 時東海

（1 江蘇省蘇州君安藥業有限公司，蘇州215129；2 江蘇省蘇州雷奧生物科技有限公司，蘇州215104）

高效液相色譜法測定小兒咳喘口服液中綠原酸的含量

鄧云天1時東海2

（1 江蘇省蘇州君安藥業有限公司，蘇州215129；2 江蘇省蘇州雷奧生物科技有限公司，蘇州215104）

目的 建立高效液相色譜法測定小兒咳喘口服液中綠原酸的含量。方法 Agela Promosil C18（250mm×4mm，5μm)分析柱，流動相為乙腈∶1%冰醋酸（11∶89），流速為1.0ml?min-1，檢測波長為327nm。結果 綠原酸與其他組分分離良好。線性范圍為0.1032～1.032μg，相關系數r=0.9998，平均加樣回收率為98.93%（RSD= 0.4%）。結論 本法簡便、準確可靠，可用于該藥的質量控制。

高效液相色譜；小兒咳喘口服液；綠原酸

1 儀器與試藥

儀器高效液相色譜儀戴安U3000，Sartorias電子天平（CPA-225D）；綠原酸（110753-200413），中國藥品生物制品檢定所提供小兒咳喘口服液為市售品；試藥甲醇、乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純，水為超純水。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱：Agela Promosil C18 (4.6mm× 100mm，5μm)；流動相：乙腈∶1%冰醋酸（11∶89），流速為1.0mL?min-1，檢測波長為327nm，柱溫為30℃，進樣量10μl。

2.2 溶液的制備 精密稱定綠原酸對照品10.32mg，用甲醇制成濃度為20.64μg?mL-1的溶液，作為對照品溶液（見圖1）。精密量取本品1ml，精密加入60%甲醇1ml搖勻，作為供試品溶液（見圖2）。按處方中稱取除金銀花外的藥材適量，照文獻[1]中方法制得陰性對照溶液（見圖3）。

2.3 標準曲線的繪制 在上述條件色譜下，精密吸取上述對照品溶液5、10、20、30、50μl，注入液相色譜儀，測得峰面積。以對照品峰面積為縱坐標，以進樣量為橫坐標作標準曲線，并以最小二乘法計算得回歸方程：Y = 321451X+6851，Y =0.9998，綠原酸在0.1032μg～1.032μg范圍內有良好線性關系。

2.4 精密度試驗 取同供試品溶液，連續進樣6次，結果綠原酸RSD為0.68%（n=6）。

2.5 穩定性試驗 取供試品溶液，間隔4h進樣1次，共間隔24h，結果綠原酸RSD為1.01%（n=7）。

2.6 重復性試驗 取同一批號樣品6份，分別按本法處理后進行測定，結果綠原酸平均含量為41.11μg?ml-1，RSD為1.33%（n=6）。

2.7 加樣回收試驗 精密量取已知含量的小兒咳喘口服液6份1ml，精密加入對照品溶液1ml、1ml、2ml、 2ml、3ml、3ml，照本法制備供試品溶液，按本法進行含量測定并計算回收率見表1。

2.8 樣品的測定 精密量取3個批號的樣品各2份，按本法制得供試品溶液，按本法進行含量測定結果批號為20111203，20111010，20120111的樣品綠原酸含量分別為41.11μg?ml-1，39.41μg?ml-1，45.37μg?ml-1。

3 討論

曾用不同比例甲醇-0.4%磷酸，甲醇-1%冰醋酸，乙腈-0.4%磷酸，乙腈-1%冰醋酸作為流動相進行試驗，其中以乙腈-1%冰醋酸作為流動相，綠原酸保留時間適中，而且能有效抑制綠原酸拖尾現象，基線平穩，綠原酸峰處無干擾雜質峰。該方法簡單準確，可行，可用于綠原酸的質量控制。

表1 樣品中綠原酸回收率試驗結果（n=6）

圖1 對照品

圖2 樣品

圖3 陰性對照

[1] 中國國家藥典委員會·中華人民共和國藥典2010年版一部[S].北京:化學工業出版社,2010:485

Determination of Chlorogenic Acid Pediatric Kechuan Oral Liquid By HPLC

Deng yuntian1Shi donghai2(1 Jiangsu Suzou Junan Medical Corporation,Suzhou 215129,China; 2 Jiangsu Suzou Leiao Biological Science and Technology Ltd, Suzhou 215104 ,China)

Objective To establish a HPLC method for the determination of pediatric Kechuan oral liquid on the content of chlorogenic acid. Methods Agela Promosil C18(250mm×4mm,5μm) column, the mobile phase consisted of acetonitrile -1% glacial acetic acid (11∶89), the flow rate was 1.0ml?min-1, the detection wavelength was 327 nm. Results Chlorogenic acid and other components were separated well. The linear range was 0.1032～1.032μg, the correlation coefficient r=0.9998, the average recovery rate was 98.93% (RSD= 0.4%). Conclusion This method is simple, accurate and reliable, and can be used for the quality control of drugs.

High performance liquid chromatography; Pediatric Kechuan oral liquid; Chlorogenic acid

10.3969/j.issn.1672-2779.2012.15.108

1672-2779（2012）-15-Ⅲ-01

蘇玲

2012-06-07）