電針呼循穴區對心律失常模型大鼠的影響*

王珊珊 李開春 李青潤 石玉迎 張明章 潘 鋒 張露芬

（1.三峽大學第一臨床醫學院宜昌市中心人民醫院，湖北 宜昌 443003；2.云南省昆明夕陽紅老年病醫院，云南 昆明 650031；3.寧夏回族自治區中醫研究院，寧夏 銀川 750021；4.中日友好醫院，北京 100029；5.承德醫學院附屬醫院，河北 承德 067000；6.云南省曲靖市中醫院，云南 曲靖 655000；7.北京中醫藥大學，北京 100029）

心律失常指心臟沖動的起源部位、頻率、節律、傳導速度與激動次序的異常，臨床癥狀多有心悸、胸悶、氣急、心前區疼痛等，屬中醫學“心悸”、“怔忡”、“胸痹”、“心痛”等范疇。 針灸治療心律失常以手厥陰、手少陰經穴為主，隨癥配穴［1］。頭針作為針灸體系的重要組成部分，治療心律失常的療效不容忽視；而頭部腧穴除“頭針穴名標準化方案”還有多種流派，非標準化流派在臨床也很常用。本實驗選取方云鵬頭針穴名體系中治療心血管疾病的常用穴區——“呼循穴區”為研究對象，旨在探尋其對心律失常的影響，并初步揭示其部分作用機制，為臨床應用頭皮針治療心律失常提供實驗依據。

1 材料與方法

1.1 動物 健康成年雄性Wistar大鼠，由維通利華實驗動物中心提供，體質量（200±20）g，清潔級，動物房符合SPF屏障系統，溫度25℃，相對濕度45%，氣壓保持在適宜范圍內。實驗過程中，所有動物在同等條件下飼養，自由飲水和攝食。動物適應性飼養3 d后進行正式實驗，避免實驗誤差。

1.2 試藥與儀器 0.4%BaCl2溶液（0.1 mL/100 g）、20%烏拉坦（0.65 mL/100 g）、0.5%利多卡因（0.1 mL/100 g）均為北京化學試劑公司產品。大鼠環磷酸腺苷（cAMP）試劑盒（產品編號：E0003r）、大鼠環磷酸鳥苷（cGMP）試劑盒（產品編號：E0577r）均為北京博惠嘉業科技有限公司產品。G-6805電刺激儀（上海醫用電子儀器廠）；BL-420E生物機能實驗系統 （成都泰盟科技有限公司）；智能離心機（上海化工機械廠）；13 mm×0.25 mm毫針（環球針灸針）。

1.3 分組與造模 采用隨機對照實驗研究，選取大鼠50只，按體質量排序，采用隨機數字表分為5組，每組10只：空白對照組、模型組、額旁1線組、呼循穴區組、藥物對照組。用20%烏拉坦（0.65 mL/100 g）腹腔注射麻醉大鼠后，用針狀電極刺入大鼠四肢皮下，按人體標準導聯（Ⅱ）連接生物機能實驗系統，記錄心電圖。待心電圖穩定后，各組大鼠均經舌下靜脈快速注射0.4%BaCl2溶液0.1 mL/100 g，注射后數秒至5 min內心電圖出現室性早搏、短暫或連續的室性心動過速等改變和動脈血壓的變化，視為造模成功［2］。

1.4 干預方法 額旁1線組：在頭部雙側“額旁1線”區域（參照“頭皮針穴名國際標準方案”分區方法），將兩根毫針沿帽狀腱膜相距約3 mm向下針刺［3］。呼循穴區組：在大鼠顱骨的矢狀正中線與對耳線的水平面交點向外1～2 mm之間，向下0～2 mm之間，兩者構成的長方形區域［4-5］。額旁1線組、呼循穴區組針刺后連接G-6805電刺激儀，選用疏密波，時間間隔為1.9～2.0 s，頻率15Hz，強度為2mA，以引起肢體或頭部輕微顫動為度。藥物對照組：造模成功后5 min，經舌下靜脈注射0.5%利多卡因0.1 mL/100 g。空白對照組、模型組不進行干預。

1.5 標本采集與檢測 （1）室溫下（18～25℃）記錄各組大鼠造模前及干預措施后 1、5、10、15、20、25、30 min 各時刻的心電圖。（2）干預結束后所有動物腹主動脈采血，取血1～2 mL，注入試管中，放入4℃冰箱內靜置4 h后，4℃下1500 r/min離心10 min，分離血漿，置于-20℃冰箱保存，待測cAMP、cGMP水平。

1.6 統計學處理 應用SAS8.2統計軟件。計量資料以（±s）表示，進行正態分布檢驗，計量資料進行ANOVA方差分析，多組均數之間行Q檢驗比較。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 電針呼循穴區對心律失常大鼠模型心率改變的影響 見表1。與麻醉時比較，造模后大鼠心率明顯加快（P＜0.001），模型組造模15 min以后心率明顯減慢（P＜0.001），說明有自復率趨向，但30 min內不會完全恢復。與造模5 min時比較，各干預組心率隨時間的變化逐漸減慢（P＜0.001）；與模型組相同時刻心率比較，各干預組減緩幅度明顯增大（P＜0.05），說明電針呼循穴區、額旁1線及0.5%利多卡因能減慢心律失常大鼠心率。呼循穴區組與額旁1線組間心率變化比較無明顯差異（P＞0.05），但在5、10 min沒有藥物對照組減慢迅速（P＜0.05）。說明電針呼循穴區能減慢心律失常大鼠的心率，效應與額旁1線相當，但是沒有0.5%利多卡因強。

表1 各組不同時相心率比較（次/min，±s）

表1 各組不同時相心率比較（次/min，±s）

與本組麻醉時比較，*P＜0.001；與本組造模5 min比較，△P＜0.001；與模型組同時相比較，▲P＜0.05。

組 別 n 麻醉時 造模5min 干預后5min 10min 15min 20min 25min 30min空白對照組 10 353±49模型組 10 354±51 540±55* 530±56 513±57 488±57 451±54 433±47 399±50額旁 1線組 10 353±58 539±59*▲ 484±60▲△ 440±54▲△ 364±59▲△ 359±56▲△ 354±59▲△ 354±55▲△呼偱穴區組 10 346±63 532±61*▲ 470±64▲△ 409±64▲△ 353±57▲△ 351±57▲△ 346±57▲△ 346±61▲△藥物對照組 10 347±56 538±62*▲ 439±77▲△ 383±69▲△ 348±64*▲△ 347±65▲△ 348±64▲△ 347±63▲△

2.2 電針呼循穴區對心律失常大鼠心電圖復律時間的影響如表2顯示，各干預組大鼠心率逐漸恢復，呼循穴區組與額旁1線組比藥物對照組慢（P＜0.05），呼循穴區組與額旁1線組比較無明顯差異（P＞0.05）。表示電針呼循穴區、額旁1線和0.5%利多卡因對心律失常大鼠有復律作用；電針呼循穴區、額旁1線復律效果相當，但不如0.5%利多卡因快。

2.3 血漿cAMP、cGMP、cAMP/cGMP水平的變化 見表3。結果示與空白對照組相比，模型組血漿中cAMP、cAMP/cGMP水平有顯著升高（P＜0.001）。與模型組比較，各干預組組血漿中cAMP、cAMP/cGMP水平顯著降低 （P＜0.001）。 各各干預組 cAMP、cGMP、cAMP/cGMP 水平無明顯差異（（P＞0.05）。

表2 各干預組大鼠心電圖恢復時間比較（min，±s）

表2 各干預組大鼠心電圖恢復時間比較（min，±s）

與藥物對照組比較，*P＜0.05。

組別 n 心電圖恢復時間額旁1線組 10 19.7±5.355*呼偱穴區組 10 18.1±6.172*藥物對照組 10 14.3±3.831

表3 大鼠血漿中 cAMP、cGMP、cAMP/cGMP水平比較（±s）

表3 大鼠血漿中 cAMP、cGMP、cAMP/cGMP水平比較（±s）

與模型組比較，▲P＜0.001。

組 別 n cAMP（pmol/mL） cGMP（pmol/mL） cAMP/cGMP空白對照組 10 30.202±4.555▲ 18.692±2.829 0.0224▲模型組 10 41.843±5.862 18.796±3.422 0.2484額旁 1線組 10 32.342±6.840▲ 18.643±2.928 0.0264▲呼偱穴區組 10 32.057±6.360▲ 18.529±2.601 0.0268▲藥物對照組 10 31.936±4.119▲ 18.503±4.082 0.0315▲

3 討 論

方云鵬頭針穴名體系是以顱腦功能核團在頭皮上的投影定位、結合臨床實踐經驗所創立的。“呼循穴區”是呼吸、循環中樞在頭皮的投影區，位于延髓，上接橋腦，下連頸髓，位于枕骨外粗隆尖下5 cm，旁開4 cm處［4］。大鼠的呼吸、循環中樞和人一樣在延髓，由疑核、孤束核、腹外側核等幾個核團控制。本實驗結果顯示，電針呼循穴區能顯著降低心律失常大鼠心率，縮短心律失常持續時間。可能是通過針刺這個部位，調節自主神經系統的功能狀態，影響支配心臟的心交感神經和心迷走神經的功能狀態，實現對心血管活動的調節，達到改善心功能和異常心電圖改變［6］。另一方面，由于經絡內連臟腑外絡肢節，溝通內外，貫穿上下，運行氣血濡養周身，頭面部又是經氣匯集部位，所以電針也可以通過針刺頭皮特定部位起到疏通氣血、調理陰陽、防治疾病的作用。

環核苷酸是體內具有廣泛調節機能的生物活性物質，主要為cAMP、cGMP，其將第一信使傳來的信息由細胞膜傳向細胞內，影響細胞內酶的活性，進而調節細胞的各種功能。BaCl2誘發心律失常的機制可能為增加心肌蒲氏纖維Na+、Ca2+內流，抑制了K+流出，并增加內源性腎上腺素的釋放［7］。當腎上腺素釋放增加，激活細胞膜上腺苷酸環化酶，致使細胞內cAMP濃度升高，cAMP升高又可加速細胞對鈣的攝取和轉運，從而改變細胞興奮性，使心肌細胞電生理特性發生紊亂［8］；cAMP含量增加還可使自由脂肪酸生成增加，導致心肌耗氧量增加，對心律失常心肌能量代謝造成更大障礙［9］。本實驗結果表明，電針“呼循穴區”抑制心肌細胞內cAMP升高，從而調節cAMP/cGMP比值的失衡。因此，推測電針呼循穴區對心律失常的影響機制是通過抑制心肌細胞內cAMP升高，使cAMP/cGMP比值趨于平衡，而減緩細胞對鈣的攝取和轉運，以及游離的脂肪酸增加，減低心肌耗氧，調整心臟收縮和舒張功能，達到抗心律失常作用。

綜上所述，電針“呼循穴區”能減慢心律失常大鼠心率、縮短復律時間，降低血漿cAMP、cAMP/cGMP水平，電針“呼偱穴區”與“額旁1線”效果相當，藥物對照組效果最強。電針“呼循穴區”對心律失常大鼠有明顯的改善作用，其作用機制可能與經絡、自主神經系統，血漿cAMP、cGMP水平有關。

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