腎細胞癌患者手術前后外周血T 淋巴細胞亞群的變化及其臨床意義

管德輝，王曉民，蘇 宇，王科亮，徐萬海

腎細胞癌是腎實質最常見的惡性腫瘤，占腎臟惡性腫瘤的80% ～90%，占成人全身惡性腫瘤的2% ～3%，發病率位居泌尿生殖系腫瘤的第2 位，每年以2%的速度增加［1］。RCC 是一種免疫原性很強的腫瘤，其發生、發展、轉移及預后與機體的免疫功能變化密切相關。RCC 患者多表現為細胞免疫功能低下，經過治療后患者的免疫功能又有不同程度的恢復。因此，監測患者的細胞免疫功能，對RCC的診斷、療效分析、預后判斷有著重要的臨床意義。T 淋巴細胞亞群在細胞免疫中起到極其重要的作用，外周血T 淋巴細胞亞群的水平是反映機體細胞免疫功能的重要指標之一，在腫瘤的免疫監測中起著舉足輕重的作用。筆者對我院2006－12 至2009－01 間39 例RCC 患者手術前后外周血T 細胞亞群進行檢測，并與同期健康對照組相比較，以了解RCC 患者的免疫功能變化，為臨床診斷、治療及判斷預后提供科學依據。

1 對象與方法

1.1 對象 男27 例，女12 例，年齡36 ～80 歲，平均56 歲。左側18 例，右側21 例，病程3 d ～2.4 年。均行腎癌根治術。病理類型:透明細胞癌32 例，嫌色細胞癌2 例，混合細胞癌5 例。所有患者治療前血常規、肝功、腎功均正常，無急、慢性炎性反應，無自身免疫性疾病，不伴有其他原發惡性腫瘤，無營養不良和惡病質。健康對照組40 例來自我院同期健康體檢正常者，其中男28 例，女12 例，年齡35 ～78歲，平均54 歲。

1.2 方法 RCC 患者術前及術后2 周采集外周血2 ml，以肝素抗凝，24 h 內送檢，采用流式細胞術檢測被檢者外周血T 淋巴細胞亞群。所用儀器為美國BD 公司的FACSCali－bur 流式細胞儀，單克隆抗體為美國BD 公司的BD Tritest 產品。同期取體檢健康的成人外周血，同法檢測T 淋巴細胞亞群，與之對照。

2 結果

RCC 患者與健康對照組外周血淋巴細胞亞群檢測結果見表1。統計結果顯示，RCC 組與健康對照組外周血淋巴細胞亞群比較，RCC 患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較健康者降低，差異有統計學意義(P ＜0.05)，CD8+略有升高，差異無統計學意義。RCC 患者行腎癌根治術后外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+升高，與治療前相比，差異有統計學意義(P ＜0.05);CD8+降低，差異無統計學意義。

表1 RCC 患者與健康對照組外周血淋巴細胞亞群檢測結果(±s;%)

表1 RCC 患者與健康對照組外周血淋巴細胞亞群檢測結果(±s;%)

注:與對照組比較，①P ＜0.05;與治療前比較，②P ＜0.05

組別nCD3 +CD4 +CD8 +CD4 + /CD8+健康對照組4069.81 ±7.7239.80 ±4.9524.74 ±4.141.64 ±0.28 RCC 組治療前3954.91 ±7.37①29.58 ±4.67①25.12 ±4.081.19 ±0.17①治療后3961.46 ±5.76②34.66 ±4.26②24.35 ±3.151.52 ±0.16②

3 討論

機體免疫功能與腫瘤發生發展有密切關系。免疫功能低下或受到抑制時，免疫細胞不能有效識別、排斥和殺滅腫瘤細胞，腫瘤的發病率就增高;而腫瘤進行性生長時，患者免疫功能就受到抑制。經過有效的治療后，機體的免疫功能可不同程度地恢復［2，3］。

RCC 早期臨床表現具有隱蔽性、多變性和非特異性，出現典型的臨床癥狀時往往已有廣泛進展，甚至有遠處轉移。其主要治療手段是根治性切除術，但對于晚期轉移性腎細胞癌，手術治療效果欠佳。RCC 對放療、化療均不敏感，但卻是一種免疫原性極強的腫瘤，免疫治療是晚期及轉移性腎細胞癌患者術后主要的輔助治療手段，細胞因子［4］、靶向治療［5］、腫瘤疫苗［6］、單克隆抗體［7］、過繼細胞免疫治療［8］和基因治療［9］等相繼進入實驗研究和臨床試驗階段，生物免疫治療方法逐漸成為晚期腎細胞癌治療的重要手段。通過糾正腫瘤患者的免疫缺陷，激活特異性抗腫瘤免疫反應，達到消滅腫瘤細胞或抑制腫瘤細胞生長的目的。治療過程中，需要有一個客觀、準確的指標，反映機體免疫功能的變化，來檢測各種治療方法的療效。

機體抗腫瘤免疫以細胞免疫為主，主要是T 淋巴細胞介導的特異性細胞免疫。CD(cluster of differentiation)為人白細胞分化抗原，T 淋巴細胞按其表面標志和功能不同分為CD4+輔助亞群和CD8+抑制亞群，CD4+為輔助性T 細胞，能促進效應細胞抗腫瘤作用，CD8+為抑制性T 細胞，抑制機體的免疫應答，而CD3+為成熟T 細胞［10］。T 淋巴細胞亞群在細胞免疫中起主導作用，在正常情況下，CD4+/CD8+比值處于相對平衡狀態，基本恒定在1.5 ～2.0 之間，免疫功能穩定，維持體內環境的平衡。患者細胞免疫的狀態直接反映機體的抗腫瘤免疫機能，也常作為判斷腫瘤患者預后的一種重要指標。因此，檢測患者外周血T 細胞亞群的變化可作為反映機體抗腫瘤免疫能力的一個指標，而免疫治療后CD3+、CD4+、CD8+的水平和患者長期生存關系密切。腫瘤患者血清中存在抑制淋巴細胞分化增值的可溶性免疫抑制因子，包括腫瘤細胞產生的PGE2和免疫抑制酸性蛋白(IAP)等，導致淋巴細胞表面CD3+、CD4+抗原表達明顯減少，CD8+增高。CD4+細胞的減少及CD8+細胞的增多造成患者CD4+/CD8+比例明顯失調。文獻［11，12］報道腫瘤患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比例顯著低于健康對照組，而CD8+高于健康對照組，表明細胞免疫功能明顯受到抑制。因此，在治療過程中檢查T 細胞亞群能夠了解細胞免疫功能狀況，進而了解疾病發生發展、治療效果以及預后情況，這對制定治療方案有重要的參考價值。

本研究通過檢測外周血T 淋巴細胞亞群，對RCC 患者與健康者的細胞免疫功能狀態進行了對比，對RCC 患者手術前后的免疫功能狀態的變化進行了觀察和分析。研究結果顯示，RCC 患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較健康者明顯降低，CD8+升高，與文獻［13，14］報道一致，說明RCC 患者細胞免疫功能較健康人低。腎癌根治術后患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較術前明顯升高，差異有統計學意義(P ＜0.05)，CD8+也有所下降，但無統計學意義，說明手術治療后RCC 患者細胞免疫功能比手術前有所提高，但仍然低于正常水平。

大量基礎及臨床試驗證明，RCC 根治術后輔以免疫治療，能夠激發體內抗腫瘤免疫反應，可以清除腫瘤微轉移灶，提高患者的生存率，是RCC 治療的重要輔助方法，對預防RCC 術后復發和轉移有較好的療效，越來越多地應用于RCC 的治療。本研究通過對RCC 患者外周血T 淋巴細胞亞群的分析，能夠了解RCC 患者的細胞免疫功能狀況，從而監測疾病的發生、發展進程，為包括免疫治療在內的各種治療方法的療效評定提供科學的指標，為臨床制定和調整治療方案提供客觀的參考依據，并有助于對疾病的預后做出準確的判斷。

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