溶血對檢測標本生化項目結果的影響

劉學琦

(西山煤電職工總醫院，山西太原 030051)

標本溶血是生化檢驗中較為常見的一種干擾影響因素，可分為體內溶血和體外溶血兩大類。某些物質如天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、乳酸脫氫酶(LDH)、K+在紅細胞內外分布有很大的差異，如發生溶血則紅細胞破裂內容物釋放，細胞內成分進入血清，而造成對一些生化項目檢測的影響，從而影響到報告數據的可靠性。為了解溶血對生化項目檢測的影響及原因，尋找應對措施，以更準確地報告臨床患者的指標結果。本文對40例健康體檢者溶血和非溶血部分生化項目檢測進行對比，現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源

抽取40例來自西山煤電職工總院的健康體檢者清晨空腹血3 mL，分為溶血及未溶血兩組，分別注入兩支真空無添加劑的生化試管并編號。

1.2 檢測方法

未溶血組40例的新鮮血液在室溫靜置20 min后，以3 500 r/min的速度離心5 min，分離取得新鮮血清，即刻上機使用Backman DXC 800型全自動生化分析儀對 K+、Na+、Cl‐、GLU、尿素氮(BUN)、血尿酸(UA)、總蛋白(TP)、ALT、AST、LDH、總膽紅素(TBIL)十一項生化項目測定，分別測定3次，取平均值。同時，溶血組40例的標本模擬臨床上的溶血現象(人為的使用竹簽輕輕將試管中的血塊攪拌使其溶血)并采用與未溶血組同樣的轉速、時間分離血清，取得溶血標本后對以上相同項目分別測定，每個項目測定3次，取平均值。并將兩組溶血前后的數值進行對比。

ALT、AST、LDH、TBIL、GLU、BUN 等 11 項檢測項目均采用 Backman COULTER原裝試劑，其中 K+、Na+、Cl‐采用離子選擇電極法測定;ALT、AST、LDH采用速率法測定;GLU采用葡萄糖氧化酶氧電極法測定;BUN采用脲酶紫外速率法測定;TBIL采用重氮法測定;TP采用雙縮脲法測定;UA采用尿酸酶比色法測定等。質控品、校準品為美國Backman產品。

1.3 統計學方法

資料數據以均數±標準差表示，采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

溶血組標本中檢測的生化項目ALT、AST、LDH、K+、TP、TBIL的測定值均明顯高于非溶血組，差異均有統計學意義(均 P ＜0.05)。對 Na+、Cl－、GLU、UA、BUN影響較小，差異無統計學意義(P＞0.05)。見表1～4。

表1 溶血對離子系列檢測項目的影響(±s)mmol/LTable 1 Effect of Hemolysis of Ionization Series Inspection Item(ˉx ± s) mmol/L

表1 溶血對離子系列檢測項目的影響(±s)mmol/LTable 1 Effect of Hemolysis of Ionization Series Inspection Item(ˉx ± s) mmol/L

組別 K+ Na+ Cl －未溶血組4.62 ±0.29 131.56 ±2.5 103.01 ±1.09溶血組 5.75 ±0.42 133.82 ±3.2 104.89 ±1.58 P ＜0.05 ＞0.05 ＞0.05

表2 溶血對腎功檢測項目的影響(±s)Table 2 Effect of Hemolysis of Renac Function Inspection Item(ˉx ± s)

表2 溶血對腎功檢測項目的影響(±s)Table 2 Effect of Hemolysis of Renac Function Inspection Item(ˉx ± s)

組別 GLU/(mmol·L－1) BUN/(mmol·L－1) UA/(μmol·L－1)未溶血組4.68 ±0.70 5.82 ±1.23 304.21 ±100.23溶血組 3.12 ±0.08 6.24 ±1.03 309.56 ±90.23 P ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05

表3 溶血對肝功檢測項目的影響Table 3 Effect of Hemolysis of Liver Function Inspection Item

表4 溶血對心肌酶檢測項目的影響 U/LTable 4 Effect of Hemolysis of Myocardial Enzyme Inspection Item U/L

3 討論

溶血可以分為體外溶血和體內溶血兩大類，其中體外溶血可以由物理因素如抽血時負壓過大、壓脈帶壓迫時間過久、機械性破壞、水浴溫度過高、不恰當的存放、冰凍等引起;化學因素如血樣接觸表面活性劑;代謝因素如遺傳性疾病引起的血細胞脆性增加等引起。體內溶血可由物理因素如人工心臟瓣膜或大血管手術后及化學因素如藥物毒性反應等原因引起 。

紅細胞在發生溶血破壞時，紅細胞內外物質的含量及濃度差使得其內容物如血紅蛋白、高濃度鉀以及多種酶類等物質順著濃度差進入血清，從而使血清中的這些成分增高。溶血造成各項生化項目改變的原因:a)溶血對體液平衡分析的影響。K+是細胞內的主要陽離子且是血漿中的20倍，由表1可以看出溶血會對K+造成明顯影響，會導致血 K+濃度升高;而Na+、Cl‐是細胞外液的主要離子，因而發生溶血時對Na+、Cl–不會有明顯干擾。b)對酶類測定的影響。由于紅細胞內外的酶類的含量有顯著差異，紅細胞中的LDH的濃度是血漿中的160倍左右，AST是血漿的40倍，ALT是血漿的7倍，標本溶血后紅細胞內的酶類釋放于血清導致LDH、AST、ALT等酶類異常增高，輕度溶血就會造成假性增高，且溶血越嚴重，增高越顯著。研究表明，溶血對心肌酶譜也造成明顯影響，尤其是CK﹣MB的影響較為明顯，臨床上兒科患者中CK﹣MB增高較為多見，嚴重溶血時可使其假性增高10倍以上。所以溶血不適宜做CK﹣MB的測定［2］。c)溶血對腎功能中的BUN、UA影響不明顯。溶血后紅細胞中的谷胱甘肽可競爭尿酸檢測中的過氧化氫，造成結果偏低。對GLU影響不大。d)溶血后，紅細胞內的物質釋放入血清，也會使血清中原有物質測定受到干擾。如血紅蛋白在431 nm和555 nm有吸收峰，而血紅蛋白與膽紅素的比色波長相近，所以當溶血后血紅蛋白釋放入血清就造成了總膽紅素的升高［3］。e)溶血可使TP升高。因為總蛋白測定采用的雙縮脲法其主波長為540 nm，溶血后血紅蛋白在555 nm處有吸收峰，因而總蛋白的測定結果會偏高。

針對上述原因應采取相應的應對措施使溶血造成生化檢測項目的干擾降到最低，以便給臨床提供準確可靠的數據。a)標本抽血時嚴格按照操作技術規范執行，患者抽血部位應用碘伏消毒，因酒精可致溶血;不要將血標本放置在冰箱冷凍室，避免融化后引起溶血。止血帶不應扎得太緊太久。另外抽血時盡量在大血管操作，因為有時扎在血管壁時，也會引起溶血。b)血液標本抽取后應及早分離出血清，及時上機，一般放置30 min左右分離血清。避免消毒液或其他物質滴入標本等物理化學因素引起溶血的一切［4］。c)離心轉速應控制在一定范圍，不要過快，時間不宜過長。d)從方法學上，可以通過設置空白或改用雙波長比色，改進試劑類型和試劑組配來減少溶血對生化檢測項目的影響。e)目前臨床檢驗中全自動生化分析儀已多普及應用，也都采用雙波長、雙試劑等來盡量校正溶血對標本檢測項目的影響［5］，但結果與真值間的誤差仍然存在，因而在條件允許的情況下最好與臨床取得聯系重新抽取血樣，對于無法退回的溶血標本和非人為性溶血標本，要在檢驗報告單上標注“標本溶血結果僅供參考”并與臨床醫生及時取得聯系。

綜上所述，標本的溶血對部分生化檢測項目造成了影響，做為檢驗人員首先要有高度的責任心，避免標本溶血，并采取積極有效的措施與臨床醫生溝通，復查之后再慎重報告，以便更好服務于患者，提高檢驗報告的準確性和真實性。

［1］黃 琛.生化檢驗中標本溶血對結果的影響及對策［J］.海南醫學院學報，2009，15(8):955-956.

［2］文家遠.生化檢驗結果異常的原因分析［J］.吉林醫學，2010，31(17):2638.

［3］劉 波，范 建.標本溶血對常規生化檢驗項目的影響［J］.邯鄲醫學高等專科學校學報，2001，1(3):63-64.

［4］韓鳳琴.標本溶血對臨床檢驗結果的影響［J］.中國社區醫師(醫學專業)，2010，12(23):166.

［5］高曉陽.溶血標本對部分血液生化結果的影響及應對措施［J］.實用預防醫學，2012，19(3):439-440.