急性盆腔炎患者白細胞計數與促炎細胞因子的相關性研究

賀志華

盆腔炎性疾病是青春期及育齡女性常見的病癥?？稍斐僧愇蝗焉?、不孕及慢性盆腔等，對現代女性的生活質量影響很大。炎癥的發生、發展與細胞因子的異常表達關系密切，重癥急性盆腔炎時內毒素可刺激多種細胞合成，釋放大量炎性遞質。但目前對于感染引發的免疫紊亂缺乏理論依據，臨床亦缺乏有效的評估指標。因此，研究盆腔炎性白細胞計數與促炎細胞因子的相關性，具有重要的理論意義和潛在的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2008 年1 月—2011 年12 月在我院門診確診重癥急性盆腔炎患者31 例。入選患者均符合急性盆腔炎的診斷標準，且就診前1 周內無用藥史?；颊咂骄挲g(35.8±7.5) 歲，平均病程(41.5 ±7.5) h。

1.2 治療藥物 頭孢曲松鈉(羅氏芬) 由上海羅氏制藥有限公司生產，批準文號： 國藥準字H10983038?？祴D炎膠囊由山東神州制藥有限公司生產，批準文號： 國藥準字Z20055634。

1.3 試劑盒及檢測儀器 ELISA 檢測試劑盒： 白介素－l (IL－l) 、白介素－6 (IL－6) 、干擾素－γ (IFN－γ) 均由美國PeproTech 公司生產，北京尚柏生物醫學技術有限公司分裝，ELX800 酶標儀美國BIO－TEKS 公司生產。檢測儀器采用法國生產的ABX PENTRA60 血細胞分析儀。

1.4 治療方法 康婦炎與羅氏芬聯合用藥組： 將2g 羅氏芬注射液加入500ml 的5%葡萄糖注射液內，行靜脈滴注治療，1次/d，療程為10d，口服中藥康婦炎膠囊1.2g/次，2 次/d，服用14d，治療結束后取靜脈血檢測各項指標。

1.5 檢測方法 采患者靜脈血，采用雙抗夾心ELISA 法，單抗包被于酶標板上，兔標本中的ck 會與單抗結合。加入生物素化的二抗，它將與結合在單抗上的ck 結合而形成免疫復合物，未結合的將被洗去。辣根過氧化物酶標記的Streptavidin將與二抗的生物素結合，多余的物質會被洗掉。加入TMB 顯色。具體操作按照ELISA kit 操作說明進行。根據標準管的光密度值，作標準曲線，然后根據標準曲線計算每一血清樣本IL－1、IL－6、IFN－γ 的濃度。計算時每個標準品和標本的OD 值應減去空白孔的OD 值。標準曲線及樣品濃度采用Cruve Expert 1.3 軟件計算。

1.6 統計學方法 采用SPSS17.0 統計軟件統計。計量資料用均數±標準差(±s) 形式表示，采用t 檢驗，多組間比較用方差分析，P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 治療前后患者白細胞計數和促炎因子IL－1、IL－6 和IFN－γ 的檢測結果 治療后，患者白細胞計數和促炎因子IL－1、IL－6 和IFN－γ 顯著降低，t 檢驗P 值分別為0.034、0.023、0.016 和0.008 (見表1) 。

2.2 治療前后患者白細胞計數變化值和促炎因子IL－1、IL－6、IFN－γ 表達水平變化值之間相關性分析 分別以31 為患者的白細胞計數變化值與促炎因子IL－1、IL－6、IFN－γ 表達水平變化值之間之間進行相關性分析，其相關系數分別為0.9392、0.94763、0.2968，說明急性盆腔炎血象與促炎因子IL－1 (見圖1) 、IL－6 (見圖2) 之間具有良好的相關性，與干擾素IFN－γ 無相關性(見圖3) 。

表1 治療前后白細胞計數、IL－1、IL－6、IFN－γ 含量比較(±s)Table 1 Comparison of the content of WBC，IL－1，IL－6，IFN－γ before and after treatment

表1 治療前后白細胞計數、IL－1、IL－6、IFN－γ 含量比較(±s)Table 1 Comparison of the content of WBC，IL－1，IL－6，IFN－γ before and after treatment

組別 白細胞計數(109/L)IL－1(pg/mL)IL－6(pg/mL)IFN－γ(pg/mL)2.1 186.32 ±32.21 198.63 ±56.12 126.37 ±49.17治療后治療前1.6 110.23 ±45.32 153.97 ±45.61 60.25 ±36.41

圖1 急性盆腔炎患者白細胞計數與細胞因子IL－1 相關分析圖Figure 1 Correlation analysis diagram of white blood cell count in patients with acute pelvic inflammatory cytokines and IL－1

圖2 急性盆腔炎患者白細胞計數與細胞因子IL－6 相關分析圖Figure 2 Correlation analysis diagram of white blood cell count in patients with acute pelvic inflammatory cytokines and IL－6

圖3 急性盆腔炎患者白細胞計數與細胞因子IFN－γ 相關分析圖Figure 3 Correlation analysis diagram of white blood cell count in patients with acute pelvic inflammatory cytokines and IFN－γ

3 討論

細胞因子(cytokine，CK) 是由一些特定的細胞產生分泌的可溶性蛋白分子，為細胞間可溶性化學信號之一，通過靶細胞表面的受體，經由特有的信號轉導過程，調節細胞的基因表達和其他功能，可通過激活淋巴細胞增殖分裂、活化巨噬細胞的行為。促炎細胞因子主要由活化的巨噬細胞產生，包括IL－1、IL－6、IFN－γ 等。IL－1 主要由單核和巨噬細胞產生［1］，可刺激單核細胞和巨噬細胞產生IL－6 和腫瘤壞死因子； 誘導內皮細胞活化； 刺激中性粒細胞釋放炎癥遞質； 促進肝細胞合成急性時相蛋白等。全身或局部誘發的IL－1 可有力地啟動、加強、延長神經系統(CNS) 疾病的炎癥反應，與IL－1 相應的血管內皮細胞功能的改變可使白細胞滲到炎癥區。IL－6 是多功能炎性細胞因子，是炎性遞質網絡的關鍵成分，在炎癥反應中起重要作用［2］。作為抗炎性細胞因子或遠期細胞因子可平衡前炎癥細胞因子或早期細胞因子的損傷效應，起到一定的保護作用。血清中IL－6 的含量會有不同程度上升因此其水平可用來判斷病情嚴重程度及預后，IL－1 與IL－6 相互作用影響、關系密切。干擾素 (interferon，IFN)是多功能細胞因子家族中的一員，是生物體內一種適應性機體保護糖蛋白，是機體自身產生的一種抵御病毒入侵、維持機體或細胞功能自我穩定的防御性物質［3］。

本研究結果顯示，急性盆腔炎患者血白細胞數隨血漿，IL－1 與IL－6 水平增高而呈明顯增加趨勢，而IFN－γ 與白細胞數計數之間無明顯相關性。提示急性盆腔炎時白細胞數目的異常變化可能是IL－1 與IL－6 對多形核中性粒細胞趨化作用的結果。

1 Huber AR，Kunkel SL，Todd RF，et al. Regulation of transendothelial neutrophil migration by endogenous interleukin－8 ［J］. Science，1991，254 (5028) ： 99－102.

2 Maymon E，Romero R，Paeora P，et al. Evidenece for the partieipatin of interstitial collagenase (matrix metalloproteinase l) in preterm premature rupture of the membranes ［J］. Am J Obstet Gyneeol，2000，183(4) ： 914－920.

3 余傳霖，葉天星，陸德源，等. 現代醫學免疫學［M］. 上海： 上海教育出版社，1998： 36－49.