不同貯藏條件對桃仁飲片酸敗度及苦杏仁苷含量的影響

蘭志瓊 盧先明 張麗娟 孫雪梅 蔣桂華

1.成都中醫藥大學藥學院 中藥資源系統研究與開發利用省部共建國家重點實驗室培育基地，四川 成都 611137；2.石家莊四藥有限公司，河北 石家莊 050035

桃仁為薔薇科植物桃Prunus persica（L.）Batsch或山桃Prunus davidiana（Carr.）Franch.的干燥成熟種子[1]，為常用中藥，具有活血祛瘀、潤腸通便之功效，用于經閉、痛經、癥瘕痞塊、跌撲損傷、腸燥便秘，是婦科要藥[2]。

同其他富含油脂的果實種子類飲片一樣，桃仁在貯藏中極易發生泛油、蟲蛀、霉變、變色等變質現象。但是，目前桃仁的研究工作主要集中在化學成分及藥理學領域，貯藏養護的相關研究甚少，亟待加強這方面的研究工作，保障臨床用藥的安全性、有效性和穩定性。桃仁等易泛油，飲片在貯藏中易產生酸敗現象，酸敗不僅導致藥材產生一定的毒性，同是還影響飲片中有效組分油酸和亞油酸的含量，故酸敗度是評價桃仁等易泛油飲片質量的重要指標；苦杏仁苷在《中國藥典》2005年版一部[1]196-197、《中藥學》[2]和日本漢方制劑規格試驗法[3]中，均被規定為質量評價的指標成分。故本文初步考察2年貯藏期內不同貯藏條件下桃仁飲片酸敗度及苦杏仁苷含量的變化規律，為進一步開展其貯藏養護方法的研究提供一定的科學依據。同時，通過對桃仁飲片的貯藏養護的系統研究，為今后易泛油類飲片的貯藏養護研究及實踐奠定一定的基礎。

1 儀器與試藥

桃仁飲片于2008年4月30日購自成都市荷花池中藥材市場，經成都中醫藥大學藥學院盧先明教授鑒定其原藥材為薔薇科植物桃Prunus persica（L.）Batsch的干燥成熟種子。

遠紅外輻射干燥箱（上海陽光試驗儀器有限公司，766-2），海爾臥式低溫設備冷柜（青島海爾股份有限公司，DB255-LT/100LT），真空干燥箱 （上海森信實驗儀器有限公司，DZG-6090型），電熱鼓風干燥箱（上海實驗儀器廠有限公司，202-2型），高效液相色譜儀及其配套工作站（美國Agilent公司，1100型），電子天平（上海精密科學儀器有限公司，YP601N），紫外-可見分光光度儀 （上海天美科學儀器有限公司，UV1100）。

乙腈（色譜純，美國Fisher公司），水（超純水，Milipore制備），白酒（重慶江津牌60°高粱酒，重慶江津酒廠有限公司），其余試劑均為分析純。

苦杏仁苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110820-200403）。

2 方法與結果

2.1 不同貯藏條件

前期預實驗研究結果表明：預處理方法、溫度、對抗劑和包裝材料是影響桃仁飲片貯藏養護效果的主要因素。本文以正交設計試驗法來初步考察不同貯藏條件對桃仁飲片酸敗度及苦杏仁苷的影響。將藥材整理去雜質，平均分為11組，每組1.5 kg。其因素水平設計見表1，具體分組見表2。

表1 桃仁貯藏條件因素水平表

遠紅外干燥法：將桃仁藥材均勻平鋪于托盤中，厚度不超過10 mm，50℃下遠紅外干燥處理10 h，冷卻備用。

60Co-γ輻照滅菌法：將藥材桃仁經60Co-γ射線輻照30 min，輻射量8 kGy，處理后備用。

間歇冷凍法：將藥材用厚質藥用聚乙烯薄膜封口袋包裝，放于海爾臥式低溫設備冷柜，溫度設為-20℃，冷凍5 d后取出，并常溫保存5 d，再放入冷柜中，冷凍5 d，取出，常溫保存。

常溫（21～30℃）：庫房自然放置。陰涼（11～20℃）：空調室。

低溫（0～10℃）：冰箱模擬冷庫。

明礬對抗同貯法：將明礬粉碎成小塊，與桃仁以1∶7的重量比混合并攪拌均勻，裝袋。

滑石對抗同貯法：將滑石粉碎成小塊，與桃仁以1∶7的重量比混合并攪拌均勻，裝袋。

酒精對抗同貯法：將預處理后的藥材，在敞口塑料箱內鋪一層藥，用95%的酒精噴灑一層，每10 kg藥材用酒精250～400 μL。藥材要鋪薄，噴灑酒精要均勻。將噴灑后的藥物用手反復拌勻，然后裝袋。

2.2 酸敗度檢查

2.2.1 油脂的提取 取桃仁20 g，研碎成粗粉，置索氏提取器中，加正己烷50 μL，置水浴上加熱回流2 h，放冷，用3號垂熔漏斗濾過，濾液置水浴上（約55℃）減壓回收溶劑至盡，即得。

2.2.2 酸敗度測定方法 按《中國藥典》2005年版ⅨP酸敗度測定法[1]附錄59分別測定各組酸值和羰基值。結果見表3、4。

由表3、4實驗結果可知，在2年貯藏期內，隨著貯藏時間的延長，各組桃仁飲片的酸值和羰基值均呈現明顯的上升趨勢。其中，第1、7、10、11組飲片酸敗最為明顯，24個月后其酸值均高達7.0以上，特別是第11組，其酸值已超過藥典限量規定 （10.0）；各組羰基值貯藏2年后雖均符合藥典標準，但第10、11組升高趨勢特別明顯，已超過7.80。

表2 桃仁貯藏養護條件實驗研究分組

表3 貯藏期間桃仁酸值測定結果

表4 貯藏期間桃仁羰基值測定結果

2.3 苦杏仁苷含量測定[1]

2.3.1 色譜條件 色譜柱 Hypersil ODS2（4.6 mm×150 mm，5μm），檢測波長為 210 nm，柱溫度為 25℃，流動相為乙腈-水（11∶89），流速1 μL/min，理論板數按苦杏仁苷峰計算應不低于2 000。

2.3.2 對照品溶液的制備 精密稱取苦杏仁苷對照品適量，置10 μL的容量瓶中，加甲醇溶解，并定容至刻度，配制成含苦杏仁苷0.5 mg/μL的對照品溶液。

2.3.3 供試品溶液的制備 取干燥的桃仁藥材粉末約0.2 g，精密稱定，置50 μL帶塞錐形瓶中，加甲醇約20 μL，超聲提取30 min，放至室溫后，濾過，用甲醇于25 μL的容量瓶中定容。0.45μm微孔濾膜過濾，取續濾液，即得。

2.3.4 樣品測定 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定。按外標法計算苦杏仁苷含量。見表5。

表5 貯藏期間桃仁苦杏仁苷含量測定結果（%）

由表5實驗結果可知，用于貯藏研究的桃仁飲片苦杏仁苷含量為2.27%，達到《中國藥典》2005年版的要求（不低于1.5%）。在2年貯藏期內，隨著貯藏時間的延長，各組桃仁飲片的苦杏仁苷含量均呈現下降趨勢。其中，第8、9組飲片苦杏仁苷含量降低趨勢相對較慢，貯藏18個月，其苦杏仁苷含量仍然合格。第1、3、7、10、11組飲片降低最為明顯，貯藏2年后甚至降至0.30%以下。

3 討論

在2年貯藏期間，隨著貯藏時間的推移，各貯藏條件下，桃仁飲片的酸值和羰基值均呈現上升趨勢，而苦杏仁苷含量呈現明顯的下降趨勢。其中，尤以麻袋或紙箱包裝、常溫條件下貯藏的的桃仁藥材（第1、7、10、11組）其變化趨勢最為明顯。而以真空包裝或低溫條件下貯藏的桃仁飲片（第8、9組）其酸敗程度較輕，苦杏仁苷含量降低較慢。可見，桃仁飲片應以真空包裝，在低溫條件下貯藏；同時，實驗結果也表明桃仁飲片的有效使用年限亟待研究。

貯藏2年后，經磷化鋁熏蒸的桃仁飲片（第11組）的酸值和苦杏仁苷均未達到《中國藥典》2005年版標準。可見，目前常用的化學養護法對貯藏桃仁飲片效果較差，且該方法會污染中藥及貯藏環境，應予以淘汰。亟待通過系統的科學研究，尋找適宜桃仁等富含油脂易泛油中藥飲片安全、綠色、有效的貯藏新方法，保證該類中藥臨床用藥的有效性、安全性和可控性。

本文僅研究了桃仁飲片2年貯藏期內桃仁飲片酸敗度及苦杏仁苷含量的變化規律，接下來的研究應體現在延長貯藏時間，增加研究對象，建立飲片性狀、藥效學、安全性及貯藏成本等多指標綜合評價系統上，篩選桃仁、苦杏仁、郁李仁、柏子仁等富含油脂易泛油類中藥飲片的適宜包裝貯藏方法及條件，為臨床提供安全、有效、質量穩定的中藥。

[1]國家藥典委員會.中國藥典[S].一部.北京：化學工業出版社，2005.

[2]張廷模.中藥學[M].北京：高等教育出版社，2002：265.

[3]原田正敏．漢方生藥制劑品質評價[M]．東京：廣川書店株式會社，1992：76．