胃癌血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA聯合檢測的意義

劉 羽 焦志凱 李 勇 范立僑 趙 群 郝英杰 檀碧波

(河北醫科大學第四醫院外三科，河北 石家莊 050011)

胃癌是我國常見的惡性腫瘤之一，其病死率居各種惡性腫瘤之首。早期發現、早期診斷對胃癌的防治具有重要意義。目前胃癌主要依靠胃鏡及活檢病理確診，有一定痛苦，患者不易接受，且不適合對大樣本高危人群動態觀察，血清、血漿腫瘤標志物由于檢查方便、快速、無創，易于被患者接受，已成為最方便、最廣泛應用于臨床的輔助檢查方法。近年來，腫瘤標志物的研究已成為防治胃癌的熱點〔1～3〕，但對其報道一般僅限于患者的外周血，對胃癌患者骨髓的研究尚未見報道，本研究選用癌胚抗原(CEA)、糖類抗原 72-4(CA72-4)、胃癌相關抗原(MG7-Ag)三種腫瘤標志物，進行胃癌患者血清及骨髓中三種腫瘤標志物的檢測，分析其單項、聯合檢測的意義，為臨床早期診斷胃癌提供依據。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取河北醫科大學第四醫院外三科2009年10月至2010年12月入院的胃癌患者61例，均行根治性手術切除，未接受過放、化療。其中男49例，女12例，年齡30～76〔平均(59.51±9.30)〕歲。取血清及骨髓為研究對象，均得到患者或委托人同意并簽字。正常組標本均來自健康志愿捐獻者，共計32例。

1.2 實驗試劑與儀器 CEA放射免疫分析試劑盒(北京北免東雅生物技術研究所)，MG7-Ag ELISA試劑盒(Altru Biomedical Inc USA)，CA72-4 ELISA 試劑盒(Altru Biomedical Inc USA)。超低溫冰箱(日本SANYO MDFU50V)，酶標儀(澳大利亞biocell ht2)，恒溫水溫箱(溫州永強醫療器械廠)，放射免疫γ計數器(上海原子核研究所日環儀器一廠SN-684型)。

1.3 方法

1.3.1 外周血及骨髓采集方法

1.3.1.1 外周血采集 術前由外周靜脈取血3 ml，不加抗凝劑，離心機2000 r/min離心10 min，分離上清儲存至低溫冰箱備用。

1.3.1.2 骨髓采集 以骨髓檢測常用的髂前上棘穿刺法取髓3 ml，不加抗凝劑，離心機2000 r/min離心10 min，分離上清儲存至低溫冰箱備用。

1.3.2 CA72-4、MG7-Ag、CEA檢測 ELISA法檢測外周血及骨髓中CA72-4、MG7-Ag的含量，RIA法檢測外周血及骨髓中CEA的含量。

1.3.3 結果判定 根據試劑盒說明書，CA72-4、MG7-Ag均以＞6 U/ml為陽性表達，CEA＞20 ng/ml為陽性表達。

1.4 統計學方法 應用SPSS10.0統計軟件，結果以±s表示，采用兩樣本均數比較的t檢驗、χ2檢驗、相關分析等方法。

2 結果

2.1 胃癌患者與正常人血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量比較 胃癌患者血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量明顯高于相應的正常組(P＜0.01);胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量與胃癌血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量對比差異無顯著性(P＞0.05)，正常骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量與正常血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量對比差異無顯著性(P＞0.05)。見表1。

表1 各組血清及骨髓中 CA72-4、MG7-Ag、CEA含量(±s)

表1 各組血清及骨髓中 CA72-4、MG7-Ag、CEA含量(±s)

與正常組比較:1)P＜0.01

組別 n CEA(ng/ml) CA72-4(U/ml) MG7-Ag(U/ml)血清正常組 32 11.52±6.75 2.85±1.56 3.21±2.56胃癌組 61 29.73±35.521) 17.37±29.611) 21.76±42.011)骨髓正常組 32 10.58±8.24 3.05±1.16 3.22±1.98胃癌組 61 34.82±35.501) 17.81±23.201) 25.96±43.321)

2.2 胃癌患者血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA單獨及聯合檢測的陽性表達 胃癌血清及骨髓檢測陽性率在單一指標檢測和聯合檢測均高于正常組，差異有統計學意義(均P＜0.01)。胃癌血清三者聯合陽性率較單一指標CEA、CA72-4為高;胃癌骨髓三者聯合陽性率均高于單一指標，差異有統計學意義(均P＜0.05)。胃癌血清、骨髓三者聯合檢測分別為70.49%、78.69%，雖較二指標聯合檢測陽性率有所升高，但差異無統計學意義。見表2。

表2 各組血清及骨髓CEA、CA72-4、MG7-Ag單一檢測和聯合檢測的陽性表達情況〔n(%)〕

2.3 胃癌患者血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量的相關性分析

2.3.1 胃癌患者血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量的相關性分析 胃癌患者血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量兩兩相比均存在顯著相關。CA72-4含量與CEA含量呈明顯正相關(r=0.722，P＜0.01);MG7-Ag含量與CEA含量呈明顯正相關 (r=0.745，P＜0.01);CA72-4含量與MG7-Ag含量呈明顯正相關(r=0.921，P ＜0.01)。

2.3.2 胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量的相關性分析 胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量兩兩相比均顯著相關。CA72-4含量與CEA含量呈明顯正相關(r=0.826，P＜0.01);MG7-Ag含量與CEA含量呈明顯正相關(r=0.906，P＜0.01);CA72-4含量與 MG7-Ag含量呈明顯正相關(r=0.862，P ＜0.01)。

2.4 CA72-4、MG7-Ag、CEA各自分別在胃癌患者血清及骨髓中含量的相關性分析 CA72-4在胃癌患者血清和骨髓中的含量呈明顯正相關(r=0.871，P＜0.01);MG7-Ag在胃癌患者血清和骨髓中的含量呈明顯正相關(r=0.973，P＜0.01);CEA在胃癌患者血清和骨髓中的含量呈明顯相關(r=0.757，P＜0.01)。

3 討論

CA72-4屬糖蛋白類癌胚抗原，由乳腺癌肝轉移細胞的細胞膜成分免疫小鼠所得，對惡性腫瘤特異性高，在健康人和良性疾病患者血液中極少出現，對癌癥的正確診斷具有一定價值，文獻報道其陽性檢測率為36% ～94%〔4〕;MG7-Ag是由鼠源性抗人胃癌單克隆抗體MG7發現的胃腸道腫瘤相關抗原，亦屬糖蛋白抗原，對胃癌有較高的敏感性和特異度〔5，6〕;CEA是研究較為成熟的腫瘤標志物，在診斷、監測預后和指導治療中均有一定意義，且具有價廉等優點，適用于消化道腫瘤的聯合檢測及對比研究〔7〕。本研究結果顯示胃癌患者血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量明顯高于相應的對照組，與文獻報道一致。同時我們還檢測了胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA的含量，旨在為腫瘤診斷尋找新的領域，結果顯示胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量亦明顯升高，可能的解釋為:抗原物質經血液循環進入造血系統;骨髓中有轉移的癌細胞或形成轉移灶，進而產生抗原物質。結果還顯示CA72-4、MG7-Ag、CEA在胃癌血清、骨髓中存在明顯的正相關性，說明骨髓中有著與血中類似的表達趨勢，因此，檢測骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量對胃癌診斷也具有一定價值。

單一檢測某項腫瘤標志物有一定的局限性，因此近年來許多學者著重于聯合檢測腫瘤標志物，以提高診斷的敏感性和特異性，其中 CEA、CA724、MG7-Ag 二二聯合檢測常見報道〔8〕，但三種指標的聯合檢測在文獻上并不多見。我們將CEA、CA724、MG7-Ag進行聯合檢測，發現其陽性率均高于70%，且其含量兩兩比較均顯著正相關，提示它們在產生和分泌的機制上可能有共同之處，在胃癌的侵襲轉移中可能發揮著類似或協同的作用，同時聯合檢測時相互之間可能會有互補作用，從而提高陽性率并保持一定的特異性。

總之，本研究發現聯合檢測腫瘤標志物具有提高胃癌陽性檢出率的優點，較單一指標具有優勢。但本研究樣本較小，應進一步擴大研究規模，以期為聯合檢測診斷胃癌提供依據。

1 周 琦，張 瓊，魏 來.聯合檢測 CA19-9、CEA、CA72-4、MG-Ag對胃癌的診斷價值〔J〕.世界華人消化雜志，2010;18(25):2698-701.

2 Bain GH，Petty RD.Predicting response to treatment in gastroesophageal junction adenocarcinomas:combining clinical，imaging，and molecular biomarkers〔J〕.Oncologist，2010;15(3):270-84.

3 Cappellani A，Zanghi A，Di Vita M，et al.Clinical and biological markers in gastric cancer:update and perspectives〔J〕.Front Biosci，2010;2:403-12.

4 李建剛，陳 忠，劉 云，等.CEA、CA19-9、CA72-4、MG-Ag單項及聯合檢測對診斷胃癌的臨床價值〔J〕.同位素，2002;15(1):58-60.

5 Chen Z，Hong L，Liu L，et al.Monoclonal antibody MG7 as a screening tool for gastric cancer〔J〕.Hybridoma，2010;29(1):27-30.

6 黃立群，郭光華，黃杰雄，等.血清腫瘤標志物MG7Ag在胃癌診斷中的意義〔J〕.中國醫師雜志，2002;4(6):691-2.

7 Kumar Y，Tapuria N，Kirmani N，et al.Tumour M2-pyruvate kinase:a gastrointestinal cancer marker〔J〕.Eur J Gastroenterol Hepatol，2007;19(3):265-76.

8 郭成業，閆 春，于文軍，等.聯合檢測血清CA72-4、CA19-9和CEA對胃癌臨床價值的探討〔J〕.中國腫瘤臨床，2000;27(10):776-7.