舒立云
血細胞檢驗是指對血液中白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血小板(PLT)、血紅蛋白(HGB)及相關數據的技術檢測分析,、也稱血常規檢驗。血常規檢驗不僅是診斷各種血液病的重要依據,而且對其他系統疾病的診斷和鑒別也可提供許多重要信息,是臨床醫學檢驗中最常用、最重要的基本內容之一。
1.1 檢驗人員需要具備系統的理論基礎和專業水平。在操作儀器前,要對儀器設備的原理、性能、操作規程、使用注意事項、報警的含義、引起實驗誤差的因素、儀器的維護、保養、使用方法等了如指掌。
1.2 嚴把質控關,注意患者生理或病理因素造成的實驗誤差,注意工作環境對儀器的干擾,嚴格按照操作規程進行操作,以確保檢驗結果的準確無誤。
高質量的標本是取得準確、可靠的檢驗結果的第一步。為了保證血液標本中各項細胞的形態完整,一定要注意血液細胞檢驗標本制備過程中的幾個重要環節-采集、抗凝,標本的稀釋和貯存。
2.1 采血部位的選擇 最常用的是靜脈采血和末梢毛細血管采血兩個部位,文獻表明,靜脈血血樣是最為可靠的標本。與靜脈血相比,手指血的準確性和可重復性較差:表現為白細胞計數明顯升高(+8%)而血小板計數明顯減低(-9%),因此,除少數不易取得靜脈血的(如新生兒、血液病及大面積燒傷)患者外,原則上均應采取靜脈血行血常規檢驗。
采集靜脈血時,要避免造成人為因素引起的血液稀釋或血液濃縮,因此不易在輸液靜脈同側血管采集標本及止血帶壓迫時間不易過長(<1 min)。
2.2 標本的抗凝 用于血常規檢驗的血樣必須經抗凝劑抗凝處理,在目前種類繁多的抗凝劑中,EDTA鹽(EDTA-Na、EDTA-K2、EDTA-K3)是對白細胞形態和血小板影響相對較小的抗凝劑,因此最適合于血常規檢驗。除了采血因素(生理性因素、采血部位等)的影響外,血樣的質量絕大多數取決于血液和抗凝劑的比例。EDTA的最佳濃度(與血液比)為1.5 mg/ml。
2.3 標本的稀釋 血液是由血細胞和血漿兩部分組成的紅色粘稠混懸液。在進行白細胞檢驗計數時,直接血液計數非常困難,無論是鏡檢還是血細胞分析儀檢測,血液均需合適準確的稀釋后才能進行檢驗計數[1]。基于血細胞分析儀的基本原理,在血細胞分析儀的設計應用中,稀釋倍數和計數容量是最重要的設計指標之一。實際應用時,是將血液稀釋于稀釋液中形成稀釋標本(稀釋比為1:N),以流動檢測的方式測出一定量(V)的稀釋標本內的血細胞數(T),經換算后得出血液中的細胞濃度L(L=T N/V)。
2.4 標本的儲存 前文提到,抗凝劑因時間和濃度的不同,會造成對血細胞形態的影響。在研究表明,用EDTA抗凝靜脈血標本,在標本收集后的5 min內或30 min后,8 h內(室溫)檢測,可以得到最佳的檢測結果,如果不能及時用儀器進行檢測,須盡快推制血涂片,以便必要時用顯微鏡對血涂片進行復查。
3.1 血液分析儀計數的最適溫度為18℃ ~22℃,溫度過高、過低均對結果有影響。
3.2 應嚴格按照操作程序操作,應定期對儀器進行保養,清洗和濃縮沖洗,避免半堵孔現象發生。
3.3 每日開機后,應先做室內質控,參加室間質評。室內質量控制是質控的主要環節,它能夠保證儀器測定值的穩定性;室間質評可以解決準確性和參加室間結果協調一致的問題,這是保證成批測定標本不會產生明顯誤差的重要部分。
3.4 根據直方圖及參數變化確定計數結果是否準確,是否需要顯微鏡復查。
3.5 準確分析實驗結果及各參數之間的關系,分析實驗結果是否與臨床相符,出現異常結果主動與臨床聯系。
總之,影響血常規檢驗結果的因素很多,要想取得準確的數據,對實驗中的每一個步驟都應進行監督和管理,尤其應大力提高對質量控制方面的分析、判斷、表達及計算能力,要有一套完整的質量控制體系,才能保證實驗的科學性、準確性,才能為臨床診斷、治療和療效評價提供準確的信息。
[1]劉健,梁玉霞.抗凝劑對血小板及其參數檢測結果的影響分析.國際醫藥衛生導報,2004,10(8):64-65.