口蹄疫病毒3ABC抗體檢測結果分析

侯生庫

（青海省果洛州瑪沁縣獸醫站，青海 瑪沁814000）

口蹄疫（FMD）是一種高度接觸性傳染病，對國際貿易具有深遠的影響，世界動物衛生組織（OIE）和聯合國糧農組織（FAO）將口蹄疫列為A類烈性傳染病之首。控制和消滅FMD策略包括疫苗免疫和屠宰可疑畜群。可疑畜群就是被FMDV感染動物和帶毒動物。只有將感染動物和隱性帶毒動物與疫苗免疫動物加以區分才能為FMD的控制和消滅提供科學的依據。3ABC－I－ELISA方法不但可以檢測隱性感染動物而且可以區分感染動物和免疫動物。

1 材料與方法

1.1 待檢血清 血清來源地多年用口蹄疫O型、亞洲Ⅰ型二價滅活疫苗春秋兩季注射成年牦牛。秋季注苗后21d采血高倍離心后提取血清，達日46份，久治30份。

1.2 檢測試劑 口蹄疫O型正向血凝抗原，批號：100408，來源于中國農業科學院蘭州獸醫研究所。檢測牛血清專用的口蹄疫病毒非結構蛋白3ABC抗體檢測ELISA試劑盒，由中國農業科學院蘭州獸醫研究所國家口蹄疫參考實驗室研制，中國農業科學院蘭州獸醫研究所生產，批號：2010012208。

1.3 檢測方法 按照青海省動物疫病實驗室檢測技術培訓班教材中的O型口蹄疫正向間接血凝試驗中的操作進行。按檢測牛血清專用的口蹄疫病毒非結構蛋白3ABC抗體檢測ELISA試劑盒使用說明書進行。

2 檢測結果

2.1 正向間接血凝試驗 在對照孔合格的前提下，待檢血清免疫抗體效價達到1∶32呈現“＋＋”凝集判定為免疫合格，血清合格率為100%。

2.2 3ABC抗體檢測ELISA試驗 通過試驗得到標準陰性血清OD值為0.488，標準陽性血清OD值為0.053 5。按照判定標準公式：樣品OD值＜0.2（陽性OD值－陰性OD值）＋陰性OD值（即0.140 3）為陰性；樣品OD值＞0.3（陽性OD值－陰性OD值）＋陰性OD值（即0.183 85）為陽性；它們之間為可疑。對76份為被檢血清OD值進行了比對。結果共檢出陽性血清4份，可疑血清14份，陰性血清58份。

3 結果分析

用兩種試驗檢測免疫牛血清76份，正向間接血凝試驗血清免疫合格率100%，說明被檢血清來源的牛能夠抵御FMDV的侵襲，不再是帶毒動物。3ABC抗體檢測ELISA試驗檢出陽性血清4份，陽性率5.2%，可疑血清14份，說明有4份血清來源的牛已經感染了FMDV或曾經感染過FMDV并產生了抗體；其他陰性血清來源的牛已被進行了疫苗預防，得到了合格的免疫抗體。

4 討論及建議

對正向間接血凝試驗陽性率為100%，血清通過口蹄疫病毒非結構蛋白抗體檢測試驗，出現陽性血清4份，其原因：一是注射疫苗后感染了FMDV；二是長期注射疫苗且劑量過大，疫苗中殘留的非結構蛋白抗體有所顯現；三是血清來源于感染FMDV后已消滅了病毒的動物；四是動物正處于隱性感染期。建議加強本地區檢疫防疫工作，排查FMDV的帶毒動物，嚴防對傳染源留有死角。另一方面改進血清學試驗，使其能夠可靠地確定動物是否已感染了FMD病毒，不管它們是否注射過疫苗。最好還應當能把感染后已經消滅了病毒的動物與形成持續性感染的動物區分開。