VEGF、Flt-1在妊娠期高血壓疾病胎盤中的表達研究

王平 劉麗

PIH存在血管發生和功能障礙。VEGF作為重要血管生長因子之一，與受體Flt-1結合，在調節胎盤血管發育和PIH病中發揮重要的作用，PIH是嚴重的產科并發癥，發病率約為9.4%，是導致母嬰發病率和病死率顯著增加的重要原因，但其病因和發病機制尚不明確。本研究通過測定孕婦胎盤組織中VEGF和Flt-1表達情況，進一步揭示它們在妊高征發病機制中的作用及二者間是否存在相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2008月12月至2012年2月鄭州市中醫院婦產科住院的晚期妊娠婦女200例，其中正常妊娠婦女100例(對照組)，年齡(25±5)歲，分娩孕周(38±2)周;PIH患者100例(PIH組)，根據全國高等院校統編教材《婦產科學》(第6版)的分類及定義，再分成3個小組，其中妊娠期高血壓1組35例，年齡(25±5)歲，分娩孕周(38±2)周;子癇前期2組30例，年齡(25±5)歲，分娩孕周(38±2)周;子癇3組35例，年齡(25±5)歲，分娩孕周(38±2)周;由專人檢測身高、體質量，并計算體質量指數。200例均為第1胎、臨產前行剖宮產術的孕婦，并除外糖尿病、高脂血癥等其他疾病。各組孕婦年齡、孕周、孕晚期體質量指數、血脂、血糖差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法 VEGF和Flt-1表達測定

1.2.1 胎盤組織的取材及制備。胎盤娩出后30min內取胎盤母面中央絨毛組織塊約1cm×1cm×1cm，避開鈣化區及壞死區，生理鹽水充分漂洗后用10%中性福爾馬林溶液固定24h以上，常規石蠟包埋4 pure連續切片。

1.2.2 鼠抗人VEGF單克隆抗體(南京博爾迪):鼠抗人Flt-1單克隆抗體(南京博爾迪)，SP9000通用型試劑盒均購自北京中山生物技術有限公司;磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀、氯化鈉、氯化鉀等化學試劑均為分析純，由北京益利化學有限公司生產。

1.2.3 免疫組化測定具體步驟按說明書進行。用已知陽性標本做陽性對照，用1%BSA代替一抗做陰性對照。染色以細胞有棕黃色顆粒沉著視為陽性反應;與背景一致為0;胞核或胞漿內可見少量淡黃色顆粒，明顯高于背景為1;胞核或胞漿內可見較多深棕色顆粒為2;胞核或胞漿內可見大量深棕色或褐色顆粒為3。陽性細胞百分率:無陽性細胞為0;＜25為1;25%～50%為2;＞50%為3。取以上兩項乘積:積分0～1分為(-);2～3分為(+);4～5分為(++);＞5分為(+++)。

1.3 統計學方法 采用SPSS 11.5統計軟件包進行統計，計量資料以均數士標準差表示，兩兩比較采用獨立樣本t檢驗，多個樣本比較用單因素方差分析;P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

VEGF，Flt-1表達PIH組胎盤組織表達明顯低于對照組(P＜0.05)，且隨著妊高癥病情的加重而水平減低。見表1。

表1 4組胎盤組織的VEGF，Flt-1陽性表達率比較(例，%)

3 討論

近年來，PIH病因“胎盤淺著床”理論逐漸被多數學者所可，認為滋養細胞對子宮螺旋動脈侵蝕不足致使胎盤植入過淺，血流灌注不足，進而引發系統性血管內皮損傷，導致PIH各種臨床癥狀的出現。在妊娠過程中，胚胎滋養層細胞侵入到母體蛻膜，并侵入其中的螺旋動脈，替代血管內皮細胞，建立母體/胎兒的交互式循環，為胚胎的發育提供營養。VEGF是一種高效特異的內皮細胞有絲分裂原，VEGF與FIt-1結合主要調節肉皮細胞間及內皮細胞與基質問的相互作用，發揮強烈的促血管生長及增加微血管通透性的作用。有學者認為作為重要的血管誘生園子，VEGF在妊娠早期參與胎盤血管網的形成，而在妊娠晚期主要調節血管內皮細胞的通透性.有利于胎兒生長發育。關于VEGF和受體能促進血管生成和胎盤發育可通過基因缺失的小鼠胚胎發育障礙得到直接證實[1，2]，研究表明[3]，MMP-9在滋養細胞植入中起重要作用，并與VEGF，Flt-1表達率呈正相關，本研究發現VEGF，Flt-1在 PIH組胎盤組織表達明顯低于對照組，且隨著妊高癥病情的加重而水平減低，說明VEGF，Flt-1可能共同參與PIH的發生。

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