雷公藤內酯醇提取工藝的研究比較

肖永平 郭彬 凌英蓉

雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook.f.)，屬衛矛科雷公藤屬植物，性味“苦，大毒”，可“殺蟲，消炎，解毒”[1]，其主要作用成分雷公藤內酯醇(triptolide)經提取富集常用于治療類風濕性關節炎、器官移植排異、皮膚病等多種自身免疫系統疾病。目前國內外主要采用先經水或乙醇提取，再用氯仿或醋酸乙酯等有機溶劑萃取的生產工藝[2]及超臨界提取法等。筆者所在機構以雷公藤葉為材料研究比較雷公藤內酯醇水提醇沉法與醇提水沉法，現報告如下。

1 實驗材料與設備

高效液相色譜儀(上海天普分析儀器有限公司);雷公藤內酯醇對照品(昆明科翔生物科技有限公司);雷公藤葉(浙江新昌);實驗用乙醇含量為95%，其他所有試劑均為分析純。

2 方法

2.1 色譜條件[3]色譜柱:LichrospherC18柱(4.6 mm×200 mm，5μm，淮陰漢邦科技有限公司);流動相:乙腈-水(35∶65，v/v);檢測波長210 mm;流速:1.0 ml/min。進行前樣品經0.45 μm濾膜過濾。

2.2 考察方法 色譜分離:經過上述色譜條件下分離，雷公藤內酯醇保留時間約為10 min，且與其他共有物質分離良好。同時對同一批供試品進行重復性、穩定性、精密度實驗，均進行10次，結果RSD分別為0.52%，5.2%，3.67%。取已測知雷公藤內酯醇含量供試品平行10份進行加樣回收率實驗，均精密加入對照品242.4 μg，按樣品制備方法操作，得出平均加樣回收率93.17%，由此可證明所行測定方法可行。

2.3 樣品處理方法[4]醇提水沉法:取雷公藤葉1kg，95%乙醇回流提取3次，每次2 h，回收適量乙醇靜置，再經抽濾、濾渣烘干，稱重得a醇=46.3 g，濾液定容至每次0.5 g/ml生藥(A醇)，留樣待測。其余加10倍量蒸餾水煮沸，靜置48h后過濾，所得濾渣量很少，忽略不計。將濾液濃縮至0.5 g/ml生藥(B醇)備用。

水提醇沉法:取雷公藤葉1 kg，水剪煮3次，每次2 h，將所得水煎液合并濃縮至適量，靜置48 h，再經抽濾、濾渣烘干，稱重得a水=56.3 g，濾液定容至1 g/5 ml生藥(A水)，留樣待測。其余加95%乙醇至含醇量70%，沉淀靜置48h，抽濾、濾渣烘干稱重得b水=66.3 g，濾液濃縮至1 g/2 ml生藥，靜置24h后抽濾、濾渣烘干稱重得c水=1.6 g，將濾液定容為1 g/2 ml生藥(B水)備用。

2.4 樣本制備 固體樣本:取a醇20 g，a水20 g，b水20 g，c 水 1.6 g，分別加蒸餾水 100 ml、100 ml、100 ml、50 ml，經水浴、過濾、濾液氯仿萃取、水浴揮干，最后定容至10 ml，留樣測定含量，詳見表1。

液體樣本:取 a醇 80 ml，b 醇 80 ml，a 水 100 ml，b 水 80 ml，水浴揮干，加水40 ml，繼續揮干至無醇味，加蒸餾水60 ml，氯仿萃取、水浴揮干，最后定容至10 ml，留樣測定含量，詳見表2。

3 結果

表1 各固體樣本中雷公藤內酯醇含量

表2 各液體樣本中雷公藤內酯醇含量

4 討論

雷公藤內酯醇的提取目前以溶劑法為主，本研究通過比較醇提水沉法與水提醇沉法兩種提取工藝，得出醇提水沉法更加有利于保存雷公藤內酯醇，其提取液中含量比水提醇沉法提取液含量更高且差異明顯。分別加水處理后，醇水法雷公藤內酯醇含量損失較水醇法更低。

通過本研究，筆者可得出結論醇，醇水法提取雷公藤內酯含量明顯優于水醇法。

[1]蔡光先.湖南藥物志.湖南科技出版社，2004:3645-3647.

[2]陳俊元，夏志林，鄧福孝.雷公藤內酯醇提取工藝改進.中國醫藥工業雜志，1989，20(5):195.

[3]李克，袁依盛，戴曉莉，等.反相高效液相色譜法測定雷公藤提取物中雷公藤甲素含量.色譜，1998，16(4):356-357.

[4]王曙東，湯淏，李克.不同提取工藝對雷公藤內酯醇含量的影響.南京中醫藥大學學報，2009，25(4):289-290.