活性鈣離子液對著色牙去漬作用的體外實驗

畢瑋 余優成 龔逸明 王慶 周康

（復旦大學附屬中山醫院口腔科，＊中心實驗室，上海 200032）

隨著生活水平的提高，人們對牙齒美觀的要求也日益增高。多方面因素造成的著色牙不僅影響美觀，也對患者造成一定的心理障礙。活性鈣離子液是一種有機生物溶液，研究［1］顯示，將其應用于口腔時對牙齒硬組織及口腔黏膜均無損傷。離體牙經鈣離子液浸泡后，牙齒變白。本研究用色度學的方法評價活性鈣離子液對著色牙的去漬效果。

1 資料與方法

1.1 材料與試劑 （1）活性鈣離子液（上海力昂生物離子鈣技術應用有限公司）是將水生有機物（貝殼）經溶液萃取而生成的一種無色透明的生物活性溶液，已申請中國發明專利（生物技術濕法萃取“生物活性鈣離子”工藝，專利申請號：200910196334X）；（2）離體牙（復旦大學附屬中山醫院口腔科）；（3）含三聚磷酸鈉（sodium tripolyphosphate，STP）美白牙膏；（4）人工唾液。

1.2 離體牙選取 選取完整無齲、因正畸治療拔除的第1、第2前磨牙30顆。牙離體后立即刮除牙石、污垢及附著的牙周組織，封閉根尖孔，置于0.9%氯化鈉液與克林霉素混合液中，4℃保存備用。

1.3 制備染色液 以祁門紅茶＋唾液＋洗必泰制備染色液。稱取4 g紅茶放入盛有100 mL水的燒杯中，封閉，水浴加熱至95℃，10 min后濾去茶葉備用。

1.4 制備人工唾液 稱取分析純級別KCl 1.3 g，NaCl 0.1 g，MgCl20.05 g，CaCl20.1 g，NaF25μg，KH2PO40.035 g，ZnSO40.162 g，蛋白胨0.5 g，加蒸餾水至1000 mL（pH6.7～6.8）。

1.5 染色前色彩資料的采集 將每顆牙編號并以相同條件拍攝數碼照片。拍攝條件為暗室，人工光源1000勒，45°照射。樣本位置恒定，用數碼相機（SONY DSC－H9，分辨率810萬像素）拍照，鏡頭與牙面垂直，焦距2.8倍，物距12.0cm，自動曝光。

1.6 染色 將牙齒交替浸泡于紅茶＋唾液＋洗必泰液進行染色，具體方法為：將已處理的實驗牙放入人工唾液中浸泡2 min后，移到蒸餾水中浸泡30 s；再放入質量分數為0.02的洗必泰溶液中浸泡2 min，移到蒸餾水中30 s；最后放入紅茶浸泡液中浸泡30 min；取出自然干燥，以上為1個循環。早晚各1個循環，連續3 d。

1.7 刷牙 將牙齒分成2組并標號，研究組（鈣離子液刷牙組）用鈣離子液刷牙，對照組（美白牙膏刷牙組）用美白牙膏刷牙。每天2次，每次牙冠頰、舌、近中、遠中面各刷10次。

1.8 實驗牙顏色的定量分析 分別在刷牙前及刷牙后的1、4、7 d對實驗牙的牙面顏色定量分析。運行Adobe Photoshop CS2軟件，打開相應的數碼照片，將牙面分為4個象限，讀取各象限中點的L、a、b值，根據公式 W（Lab）＝100－［（100－L）2＋a2＋b2］×1／2，計算其白色度值。

1.9 統計學處理 用SPSS 13.0軟件進行統計學分析。組內前后比較采用配對t檢驗；組間比較采用協方差分析，染色后數據作為協變量，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 研究組和對照組實驗牙的白色度值比較 刷牙后1、4、7 d，研究組和對照組白色度值均高于刷牙前；研究組刷牙前后的白色度差值高于對照組，見表1～2。

表1 2組刷牙前后白色度值比較

表2 2組刷牙前后白色度的差值

3 討 論

牙齒著色因病因學、牙齒外觀、牙齒部位和嚴重程度而有所差異。本研究主要觀察鈣離子液對著色牙的去漬效果，并用色度學的方法加以評價。選取完整無齲、因正畸治療拔除的第1、第2前磨牙，這些牙均為正常的年輕恒牙，牙齒顏色正常，建立牙齒外源性著色模型。

牙著色的機制主要是洗必泰溶液中的陽性離子沉淀到牙面的獲得性膜上，然后與含陰離子的食物色素反應，其產物慢慢地使整個唾液薄膜著色。獲得性膜對牙著色的具體機制尚不清楚，可能與不同個體所形成的牙面獲得性膜的物理和化學性質不同有關。在容易著色的人群中，唾液獲得性膜對鐵的結合力強，有更多的結合位點。此外，不同牙面的物理化學性質不同，也影響獲得性膜形成的能力，如牙面越粗糙越易著色。本研究采用洗必泰＋唾液＋紅茶的外源性著色模型進行染色。其中洗必泰是口腔常用的廣譜抗菌抑菌制劑，廣泛存在于各類漱口水中。有研究顯示，洗必泰的主要活性基團是含6個碳原子的己烷所構成的亞甲基，其終末分支基團能增強黏附力。推測在此模型中，唾液的主要作用是形成獲得性膜，洗必泰附著于獲得性膜上，通過其陽離子與紅茶色素陰性離子相結合，促進紅茶色素的沉積［2］。

STP是線性縮合磷酸鹽，是美白牙膏中的一種成分。Shellis等［3］用羥磷灰石作為牙礦物質的代用品，用紅茶作為著色劑進行STP抑制色素沉積和清除著色的體外研究，該研究把羥磷灰石置于同一個人的動態全唾液內處理2 min，凍干后按質量隨機分組，STP處理組可使樣本對蛋白質和色素吸收減少50%。Lanford等［4］使用石英晶體微天平技術的回聲傳感器對著色的形成、抑制和清除進行實時監控，也證實STP具有抑制和清除茶著色的作用。此外，Busscher等［5］從電泳數據判斷，含有多聚磷酸鹽的牙膏能使牙本質表面的獲得性膜有更開放的結構，這種結構會使著色劑易于被清除。

傳統的測定牙齒顏色的方法有視覺比色法和分光測定法。視覺比色法是通過將牙齒與標準色卡相比較，測定和評價其色度，其結果主觀性高、精確度低。分光測色法是應用多個傳感器測定牙齒表面反射光線各個波長段的反射率，其測定顏色的標準條件、測定顏色的數值具有可重復性，并且可以定量測定2種顏色的差異；但是由于儀器的光導纖維探頭設計的限制和牙面解剖形態的制約，研究者只能測量牙冠中部，而無法詳細測定整個牙冠表面的顏色。這使得對牙齒增白效果的評價有失全面，結果也不準確。為了更加全面、客觀、準確和科學地對去色方法的去色效果作出評價，我們采用1976年國際照明委員會推薦的評價方法［6］。

本研究所用的數碼照相計算機色度分析系統是一種全新的牙齒顏色測定方法。它吸收了傳統的視覺比色法和分光測色法在采集數據方面的優點，故測定顏色的數值具有可重復性；將采集的顏色數據以數碼形式儲存在計算機中，通過計算機軟件分析處理物體的顏色數據，因此，對牙冠顏色的測量更全面，且數碼照相計算機分析系統能夠定量地分析牙面顏色的變化。比較鈣離子液刷牙組和美白牙膏刷牙組在刷牙1、4、7 d與染色后牙面白色度值的差值。刷牙1d后，2組白色度值無顯著差異；刷牙4、7d后，2組白色度值有顯著差異（P＜0.05）。這說明鈣離子液去漬作用顯著優于美白牙膏。

綜上所述，鈣離子液作為一種生物溶液，有可能成為新型的牙齒去漬美白產品。

［1］ 畢瑋，余優成，龔逸明，等.活性鈣離子液對離體牙超微形態的影響和其細胞毒性評價［J］.上海口腔醫學，2012（4）：402－406.

［2］ 許麗霞，李繼遙.牙漂白體外源性著色模型的研究進展［J］.國際口腔醫學雜志，2008，35（4）：166－168.

［3］ Shellis RP，Addy M，Rees GD.In vitro studies on the effect of sodium tripolyphosphate on the interactions of stain and salivary protein with hydroxyapatite［J］.J Dent，2005，33（4）：313－324.

［4］ Langford J，Pavey KD，Olliff CJ，et al.Real－time monitoring of stain formation and removal on calcium hydroxyapatite surfaces using quartz crystal sensor technology［J］.Analyst，2002，127（3）：360－367.

［5］ Busscher HJ，White DJ，Kamminga－Rasker HJ，et al.Influence of oral detergents and chlorhexidine on soft－layer electrokinetic parameters of the acquired enamel pellicle［J］.Caries Res，2003，37（6）：431－436.

［6］ 王瑩，莊欣宇，徐軍，等.Nd－YAG激光漂白四環素牙效果觀察［J］.實用口腔醫學雜志，2001，17（3）：203－205.