維生素A對青農灰鵝屠宰性能和免疫性能的影響

青島農業大學動物科技學院 孫淑潔 李文立＊

青島農業大學優質水禽研究所 葛文華 張名愛 王寶維＊

維生素A作為動物所必需的一種營養素，具有維持生長發育、正常視覺、繁殖性能，促進淋巴細胞的增殖與分化及提高機體免疫力的重要作用。Friedman和Sklan（1989）研究發現，低維生素A日糧能抑制T淋巴細胞體外增殖活性及機體對特異性抗原的刺激、大腸桿菌感染的體液免疫應答能力。Sklan等（1995）研究表明，日糧維生素A缺乏會導致火雞T淋巴細胞增殖反應顯著減弱，新城疫病毒的血清抗體效價下降；補充維生素A后免疫機能明顯提高，但是進一步提高維生素A水平會抑制免疫反應。也有報道指出，維生素A缺乏時大鼠脾NK細胞減少22%~80%，免疫應答下降，血漿IgM、IgG水平分別下降70%和30%（Stephensen，2001）。本試驗研究了不同添加水平維生素A對青農灰鵝屠宰性能、免疫性能的影響，旨為鵝維生素營養研究提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料與基礎日糧 維生素A購于浙江新維普添加劑有限公司，其有效成分50萬IU/g。試驗鵝基礎日糧以玉米和豆粕為主要原料，參照NRC（1994）家禽營養需要量中推薦的鵝日糧營養水平設計配方。全期分為0~4周齡，5~12周齡兩個飼養階段，基礎日糧組成及營養水平見表1。

表1 基礎日糧組成及營養水平（風干基礎）

1.2 試驗動物及試驗設計 選擇1日齡青農灰鵝200只，隨機分為5個處理，每處理4個重復，每重復10只鵝。分別在5個處理組（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、 Ⅴ）的基礎日糧中添加 0、1500、3000、6000、12000 IU/kg的維生素A，飼養期為12周。

1.3 飼養管理 試驗鵝自由飲水和采食，全期舍飼，自配混合料育雛期隨時調節育雛溫度：育雛前3周溫度分別為28~30℃、26~27℃、24~25℃，3周齡以后逐漸降到常溫。光照：1~2周，23 h；第3周，18 h；4~12周齡采用自然光照。平均相對濕度65%。按常規程序進行疫苗的免疫接種（1～3日齡小鵝瘟、鵝副黏病毒二聯滅活疫苗；10日齡禽流感H5N1 0.3 mL/只；20日齡雞新城疫油苗每 1 mL/只；50日齡禽流感（H5/H9）二價滅活苗）。每天記錄喂料量、溫度、死淘數等相關數據，注意觀察鵝的生長狀況。

1.4 測定指標及方法

1.4.1 屠宰性能指標 28、84日齡，每重復按平均體重選取2只試驗鵝稱重，采血后進行屠宰試驗，測定屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、腹脂率。

活體重：試驗鵝每周以重復為單位稱重。稱重前12 h禁食、不禁水，第二天清晨8∶00進行空腹稱重，并作詳細記錄。

屠體重：試驗鵝放血，去除羽毛、腳角質層、趾殼和喙殼后的重量。

半凈膛重：屠體重去除氣管、食道、嗉囊、腸、脾、胰、膽、生殖器官、肌胃內容物及角質膜后的重量。

全凈膛重：半凈膛減去心、肝、胃、腹脂的重量。

腹脂重：腹部和肌胃周圍的脂肪剖離稱重。

按以下公式進行計算：

屠宰率/%=屠體重/活體重×100；

全凈膛率/%=全凈膛重/活體重×100；

半凈膛率/%=半凈膛重/活體重×100；

腹脂率/%=腹脂重/（凈膛重+腹脂重）×100。

1.4.2 免疫性能指標

1.4.2.1 免疫器官指數測定 28、84日齡時，從重復中分別抽取2只體重接近該組平均體重的鵝，頸靜脈放血致死，剖開腹腔，小心將胸腺、脾臟、法氏囊一并摘取，去除脂肪后用濾紙吸干血水進行準確稱重，按下式計算胸腺、脾臟和法氏囊指數：

免疫器官指數 （mg/g）=免疫器官重量/活體重。

1.4.2.2 禽流感抗體效價的測定 按常規方法給鵝群免疫禽流感疫苗，每隔7 d分別從各重復隨機抽取2只試驗鵝，翼下靜脈采血，分離血清，采用血凝和血凝抑制試驗法（HA-HI）測定鵝禽流感抗體滴度。

1.4.2.3 外周血T淋巴細胞轉化率的測定 試驗至28、84日齡分別從各重復隨機抽取2只試驗鵝，翼下靜脈采血（肝素鈉抗凝），采用四甲基偶氮唑鹽（MTT）法測定外周血T淋巴細胞轉化率，結果以刺激指數（SI）表示：

1.5 統計分析 采用SPSS17.0軟件中單因素方差分析 （One-Way ANOVA），LSD法進行多重比較。試驗數據以“平均數±標準差”表示。通過回歸分析對劑量-效應關系作二次曲線擬合，根據二次方程計算最適添加量。

2 結果

2.1 維生素A對鵝屠宰性能的影響 由表2可見，4周齡時，維生素A對青農灰鵝屠宰率、全凈膛率、半凈膛率和腹脂率均無顯著影響 （P>0.05）。12周齡時，各維生素A添加組屠宰率、半凈膛率、全凈膛率均高于未添加組；Ⅲ、Ⅳ組與Ⅰ組相比，屠宰率提高3.4%、3.1%（P<0.05），半凈膛率提高 3.9%、4.4%（P<0.05）；Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組的全凈膛率分別較Ⅰ組提高4.2%、4.2%、3.3%（P<0.05）；各處理組間腹脂率均無顯著差異（P>0.05）。通過回歸分析，屠體率、半凈膛率、全凈膛率（Y）與日糧維生素A水平（X）間均呈二次曲線關系，分別為：Y=-0.135X2+1.291X+86.626（R2=0.839，P=0.161），Y=-0.178X2+1.682X+77.668（R2=0.839，P=0.161），Y=-0.132X2+1.301X+69.466（R2=0.892，P=0.108），而腹脂率與維生素A添加水平間的二次曲線關系不顯著（R2<0.700）。

2.2 維生素A對鵝免疫性能的影響

2.2.1 維生素A對鵝免疫器官指數的影響 由表3可見，4周齡時，各維生素A添加組的胸腺指數均高于未添加組，其中，Ⅳ、Ⅴ組較Ⅰ組分別提高 116.1%、100.8%（P<0.01），Ⅱ、Ⅲ組較Ⅰ組分別提高 53.4%、66.9%（P<0.05）；各處理組間脾臟指數和法氏囊指數無顯著差異 （P>0.05）。12周齡時，Ⅳ組的胸腺指數較Ⅰ組提高30.9%（P<0.05），其他各處理組間均差異不顯著 （P>0.05）；各處理組間的脾臟指數均差異不顯著（P>0.05）；法氏囊指數，除Ⅱ組外，其他各組均高于Ⅰ組，其中Ⅳ組極顯著高于Ⅰ組（P<0.01），Ⅲ組顯著高于Ⅰ組（P<0.05）。經回歸分析，胸腺指數、法氏囊指數（Y）與日糧維生素A水平（X）間均呈二次曲線關系，分別為：Y=-0.015X2+0.156X+1.431（R2=0.851，P=0.149），Y=-0.013X2+0.123X+0.335（R2=0.797，P=0.203），而脾臟指數與維生素A添加水平間的二次曲線關系不顯著（R2<0.700）。

表2 飼糧中不同水平維生素A對青農灰鵝屠宰性能的影響 %

表3 飼糧中不同水平維生素A對青農灰鵝免疫器官指數的影響 mg/g

2.2.2 維生素A對鵝禽流感抗體效價的影響由表4可見，免疫后7 d，各維生素A添加組抗體效價均有不同程度的提高，其中Ⅳ組較Ⅰ組提高18.3%（P<0.05），其他各組間均差異不顯著（P>0.05）；免疫后14 d，Ⅳ、Ⅴ組抗體效價分別較Ⅰ組提高 13.3%、13.3%（P<0.05），其余各組間均差異不顯著（P>0.05）；其他階段各組的抗體效價均無顯著差異（P>0.05）。通過回歸分析，免疫后7、14日，血清抗體效價（Y）與日糧維生素A水平（X）間均呈二次曲線關系，分別為：Y=-0.149X2+1.067X+5.898 （R2=0.787，P=0.213），Y=-0.104X2+0.798X+5.714（R2=0.894，P=0.106），而免疫前、免疫后21日血清抗體效價與維生素A添加水平間的二次曲線關系不顯著（R2<0.700）。

表4 飼糧中不同水平維生素A對鵝禽流感抗體效價的影響log2

2.2.3 維生素A對鵝淋巴細胞轉化率的影響由表5可見，4周齡時，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組的淋巴細胞轉化率分別較Ⅰ組提高30.3%、25.5%、22.4%（P<0.01）， Ⅱ組較Ⅰ組提高 12.7%（P<0.05）；12 周齡時，各維生素A添加組淋巴細胞轉化率均高于未添加組，其中，Ⅳ組較Ⅰ組提高13.7%（P<0.01），Ⅲ組較Ⅰ組提高 8.33%（P<0.05），其他各組間均差異不顯著（P>0.05）。通過回歸分析，4、12周齡時，淋巴細胞轉化率（Y）與日糧維生素A水平 （X）間均呈二次曲線關系，分別為：Y=-0.020X2+0.199X+1.694 （R2=0.801，P=0.199），Y=-0.016X2+0.129X+2.051（R2=0.951，P=0.049）。

表5 飼糧中不同水平維生素A對青農灰鵝鵝外周血T淋巴細胞轉化率的影響

3 討論

3.1 維生素A對鵝屠宰性能的影響 屠宰性能是評價家禽品種優劣、飼養管理水平及屠宰加工效益的重要依據。屠宰率和全凈膛率是衡量畜禽產肉性能的主要指標（韋來紅，2001）。目前，不僅維生素A對鵝屠宰性能的影響研究鮮見報道，而且對其改善鵝屠宰性能的機制尚不十分清楚，現有報道的可能途徑為：（1）維生素A具有類激素的活性，能夠調控分泌生長激素的基因轉錄，促進生長激素的分泌，而生長激素能促進動物蛋白質的沉積，減少脂肪的沉積（咼于明，1999）。（2）維生素A的代謝產物視黃酸能夠抑制乙酰輔酶A基因的表達，阻止未成熟脂肪細胞分化為成熟脂肪細胞，進而減少脂肪的沉積（Surai等，2000）。本試驗結果表明，日糧中添加一定水平的維生素A能顯著提高青農灰鵝后期（12周齡）的屠宰率、半凈膛率和全凈膛率，但對前期（4周齡）的屠宰性能的影響不顯著。經回歸分析擬合二次曲線，12周齡時青農灰鵝屠宰率、半凈膛率及全凈膛率最高時維生素A的添加水平分別為7172.22、7087.08、7392.05 IU/kg。綜上所述，當以屠宰性能作為衡量指標時，日糧維生素A的添加水平以7000 IU/kg比較適宜。

3.2 維生素A對鵝免疫性能的影響

3.2.1 維生素A對鵝免疫器官指數的影響 胸腺、脾臟、法氏囊是家禽的主要免疫器官。胸腺是產生免疫的中樞淋巴器官，是免疫細胞發育分化的場所。脾臟是動物的外周免疫器官，是T淋巴細胞和B淋巴細胞定居和對抗原的刺激進行免疫應答的場所。法氏囊為禽類特有的淋巴上皮器官，是抗體生成系統的細胞成長和分化的部位。免疫器官指數反映了機體免疫器官的生長發育狀況，直接決定禽類的免疫水平。魏立民等（2008）研究表明，日糧中維生素A缺乏時，北京鴨的胸腺、脾臟和法式囊指數均顯著降低，說明維生素A能夠影響北京鴨免疫器官的發育。馬軼凡等（1998）在大鼠上也得到了相似的結論。而龐建建（2010）研究發現，日糧維生素A水平對免疫器官指數未產生顯著影響。本試驗結果表明，日糧添加維生素A能極顯著提高4周齡胸腺指數及12周齡法氏囊指數，顯著提高12周齡胸腺指數，說明維生素A能夠提高青農灰鵝免疫力。經回歸分析擬合二次曲線，4周齡青農灰鵝胸腺指數最高時維生素A的添加水平為8331.52 IU/kg；12周齡青農灰鵝胸腺及法氏囊指數最高時維生素A的添加水平分別為7800、7096.15 IU/kg。綜上所述，當以免疫器官指數作為衡量指標時，日糧維生素A的添加水平以7000~8000 IU/kg比較適宜。

3.2.2 維生素A對鵝抗體效價的影響 禽流感抗體效價是反映機體禽流感免疫狀態的指標。抗體效價的高低直接反映了機體的體液免疫狀態，同時也體現了動物體對疫病的抵抗力。維生素A與動物免疫應答有著密切的關系。宋志剛（2002）研究表明，維生素A缺乏能顯著降低肉雞體液免疫能力。王選年等（2002）研究指出，日糧中缺乏維生素A時，雛雞對β-酪蛋白抗原刺激的特異抗體生成能力明顯降低，而補充維生素A后，抗體水平則逐漸升高。然而，也有報道指出，維生素A對體液免疫無顯著影響（張春善等，2002）。本試驗結果顯示，在4次禽流感抗體效價測定中，維生素A添加水平對免疫后7、14 d影響顯著，對免疫前及免疫后21 d影響不顯著，這與前人的研究結果相似。經回歸分析擬合二次曲線，免疫后7、14 d維生素A的最適添加量分別為5370.80、5754.81 IU/kg。

3.2.3 維生素A對鵝淋巴細胞轉化率的影響檢測淋巴細胞轉化率是細胞免疫研究的一種常用方法，通常是用來檢查細胞免疫功能的缺損，篩選具有免疫調節作用的藥物等。其中，T細胞是進行細胞免疫應答的主要功能細胞，維生素A是T細胞生長、分化、激活不可缺少的因子。張春善等（2002）研究證明，維生素A水平在750、1500、2700 IU/kg與外周血T淋巴細胞百分數及淋巴細胞轉化率間呈顯著正相關，說明維生素A對維持和增強肉仔雞細胞免疫功能具有一定作用。高士爭和雷風（1999）在肉雞日糧添加維生素A（0~44000 IU/kg）時發現，淋巴細胞轉化率隨維生素A水平提高而增加，22000 IU/kg時達到最高值，高于22000 IU/kg時免疫反應則降低。本試驗結果表明，維生素A能夠極顯著提高4、12周齡青農灰鵝淋巴細胞轉化率。經過回歸分析擬合二次曲線，4、12周齡淋巴細胞轉化率最高時，維生素A的最適添加水平為7462.50、6064.88 IU/kg。

4 結論

4.1 日糧中添加維生素A可以提高12周齡青農灰鵝的屠宰率、半凈膛率和全凈膛率，綜合考慮屠宰性能的各項指標，得出維生素的適宜添加量為7000 IU/kg。

4.2 維生素A可以提高青農灰鵝免疫器官指數和血清禽流感抗體效價，刺激外周血淋巴細胞的增殖，以6000~7000 IU/kg添加水平效果最佳。

綜上所述，本試驗條件下肉雞日糧中維生素A的適宜添加量為7000 IU/kg。

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