CD3700血細胞分析儀復檢規則的建立與應用評價

潘 婉，陳曉丹，李 霞，覃 西*

(1.海南醫學院附屬醫院檢驗科，海南 海口 570102；2.海南醫學院熱帶醫學與檢驗醫學院，海南 海口 571101)

隨著各類型的血細胞分析儀廣泛應用于臨床，全血細胞分析的精密度和檢驗效率大大提高。但是，血細胞分析儀在形態學檢查方面只能作為一種過篩手段，遇到可疑情況仍需要人工進行顯微鏡鏡檢[1-2]。目前國內各級醫院實驗室都有各自的復檢規則，但規則內容不盡相同。2005年國際血液學復檢專家組通過對13 298份血標本進行詳細分析后，提出了41條自動血細胞分析和分類復檢規則[3-4]。由于中國人群的血細胞分析參考范圍不同于西方人群，國內實驗室應用該規則時存在一些問題，有必要制定適用我國人群的血細胞分析儀復檢規則。此外，由于不同廠家生產的血細胞分析儀的檢測原理、性能特點和測定參數不盡相同，也有必要結合儀器的自身特點而制定相應的規則[5]。因此，我們參考國際血細胞分析儀復檢規則結合CD3700全自動血細胞性能特點、檢測原理和測定參數，建立適合CD3700全自動血細胞分析儀使用的復檢規則。并根據儀器檢測結果和旗標信息提示與顯微鏡結果進行統計分析，以評估制訂的規則。

1 資料與方法

1.1 儀器和試劑 CD3700全自動血細胞分析及其配套試劑，校準物由美國雅培公司提供，質控物由美國伯樂公司提供；雙目生物顯微鏡購自日本奧林巴斯公司；瑞氏-姬姆薩染液按標準操作規程自行配置。

1.2 標本來源 隨機收集2011年4月份海南醫學院附屬醫院門診及住院病人EDTA-K2抗凝靜脈血654份。

1.3 方法 所有標本按臨床標本的檢測流程和方法在采血后2 h內進行全血細胞分析儀檢測。每份標本分別推制厚薄適宜的血涂片各兩張，按《全國臨床檢驗操作規程》[6]進行瑞氏染色、沖洗、涼干用于血細胞形態學鏡檢分析和血細胞分類計數。顯微鏡鏡檢法采用雙盲法，在顯微鏡油鏡下，做全片觀察，記錄有無血細胞大小、形態、結構異常；瘧疾等寄生蟲等情況。并分別計數兩張血涂片，按細胞形態特征分類計數100個白細胞，取平均值為靶值。

1.4 統計學方法 根據設定的復檢方案，評估儀器檢測結果的真陽性、假陽性、真陰性、假陰性及與涂片鏡檢結果的符合性。真陽性為觸發了任意復檢規則，同時涂片鏡檢結果陽性；假陽性為觸發了任意復檢規則，但涂片鏡檢結果為陰性；真陰性為未觸發復檢規則，同時涂片鏡檢結果為陰性；假陰性為未觸發復檢規則，但涂片鏡檢結果為陽性。首先參考“41條”規則，再根據實際情況調整和優化復檢方案，對儀器檢測結果的評價以真陽性率、假陽性率、符合率、復檢率及漏診率來表示，復檢率=真陽性率+假陽性率，漏診率=假陰性率，符合率指血細胞分析儀檢測結果與涂片鏡檢結果的一致性[7]。

2 結果

采用“41條”規則，通過對654份標本進行分析，CD3700全自動血細胞分析儀的假陰性即漏診率為1.8%(12/654)，真陽性率為24.9%(163/654)，假陽性率為 27.7%(181/654)，真陰性率為 45.6%(298/654)，符合率為70.5%(461/654)，復檢率為52.6%(344/654)，無血液惡性腫瘤漏診。

結合CD3700全自動血細胞分析儀的性能特點、檢測原理和測定參數，優化“41條”規則，針對本科室的具體情況制訂出符合本科室使用的血細胞計數和分類復檢規則，見表1。對654份標本進行檢測和分析，其真陽性率為15.3%(100/654)，假陽性率為11.0%(72/654)，真陰性率為69.4%(454/654)，假陰性率即漏檢率上升為3.8%(25/654)，符合率為84.7%(554/654)，復檢率下降為26.3%(172/654)，無血液惡性腫瘤漏診。

表1 CD3700復檢規則

3 討 論

從結果中可發現如按“41條”進行復檢的話，復檢率為52.6%，將會增加檢驗科的工作量，而且有時候有的標本不需要進行復檢。因此結合CD3700全自動血細胞分析儀的性能特點、檢測原理和測定參數，優化“41條”規則，針對本科室的具體情況制訂出CD3700全自動血細胞分析儀復檢規則如表1所示，其復檢率為26.3%，符合率高達84.7%，且無血液惡性腫瘤疾病漏診。

CD3700血細胞分析儀具有自動化程度高、性能良好，檢測參數結果準確可靠等優點，充分利用其在快速、準確進行各類血細胞計數和對成熟的、特征明顯的白細胞分類方面的優勢，及時篩選出大部分符合標準無需復檢的標本，及時報告結果。但由于血細胞的多樣性和復雜性，特別是在病理情況下，儀器不能完全識別細胞而造成錯誤的檢測結果。分析其假陰性樣本的分布情況，主要為異型淋巴細胞為16.7%(2/12)，血小板聚集為8.3%(1/12)，有核紅細胞為16.7%(2/12)，晚幼粒細胞為8.3%(1/12)，細胞形態異常50.0%(6/12)。為了避免假陰性，除急待儀器性能的進一步提高，做好復檢復片工作的同時還應不斷完善復檢規則。

CD3700血細胞分析儀為了不遺漏潛在的異常結果，儀器報警系統的靈敏度都調得很高，以旗標進行提示，提示操作者可能存在的形態異常、儀器無法識別的異常細胞和幼稚細胞，以及血小板聚集、細胞碎片、有核紅細胞等。然而過高的靈敏度引起可疑旗標的增多，使復檢率居高不下。本實驗檢測真陽性占總例數的15.2%，而假陽性率為11%，假陰性率即漏檢率為3.8%，低于國際標準化委員會血液專家制定的5%的最大允許范圍。如完全按照儀器旗標提示進行顯微鏡復檢，不僅耗時費力，而且沒有必要。按照“41條”規則，所選的654例標本中，淋巴細胞和單核細胞分類異常報警的標本有172例，在對這部分標本進行顯微鏡鏡檢分類時，發現只有20例標本與儀器報警相符合，占總數的3.0%，即該大部分標本為假陽性報警。因此，在白細胞計數正常且其他參數未異常的情況下，白細胞分類異常報警的標本不需要復檢。異型淋巴細胞、有核紅細胞、原始細胞、桿狀細胞、未成熟粒細胞等的符合率都不高，其中有核紅細胞報警系統的靈敏度調得很高。在所選654例標本中，有核紅細胞報警的標本有284例，對這部分標本進行顯微鏡鏡檢，發現只有18份標本與儀器報警相符合，占總數的2.7%。因此，在白細胞計數正常且未有其他參數報警的情況下，有核紅細胞單獨報警時，一般不進行顯微鏡鏡檢，如伴有異型淋巴細胞、原始細胞、桿狀細胞、未成熟粒細胞等報警時，均需進行顯微鏡鏡檢避免血液科疾病的漏診。高潔等[8]報道血細胞分析儀白細胞分類與人工分類不符的病例，目前的血細胞分析儀檢測血液細胞的方法與顯微鏡鏡檢觀察細胞形態的方法不同，還不能完全替代顯微鏡鏡檢。因此，血細胞分析儀檢測形態異常細胞時的作用仍然是篩選，對提示檢測結果異常的標本仍應按照操作規程認真進行顯微鏡鏡檢。

目前各種檔次的血細胞分析儀廣泛應用于臨床，但均不能完全替代顯微鏡鏡檢，為了既保證血細胞分析儀的分析質量，又能減少不必要的工作負擔，各臨床實驗室有必要根據自己所用儀器的特點制定出合理的復檢規則。

[1]朱忠勇.怎樣看待血液及尿分析儀的過篩作用[J].臨床檢驗雜志,2003,21：321-323.

[2]朱曉輝,何菊英,朱忠勇.應用血液分析儀后復檢血片的內容方法及程序[J].中華檢驗醫學雜志,2003,26：785-787.

[3]Bames PW,Mc Fadden SL,Machin SJ,et al.The international group for hematology review：suggested criteria for action following automated CBC and WBC diferential analysis[J].Lab Hematol,2005,11(1)：83-90.

[4]中華檢驗醫學雜志編輯委員會.全國血液學復檢專家小組工作會議紀要暨血細胞自動計數復檢標準釋義[J].中華檢驗醫學雜志,2007,30：380-382.

[5]王建中,楊文雙,李 濤,等.ADVIA120/2120及多種類血細胞分析儀復檢規則的建立和評價[J].中華醫學雜志,2010,90(22)：1526-1530.

[6]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京：東南大學出版社,2006：123-124.

[7]北京協和醫院血細胞分析復檢規則制定組.Siemens Advia 2120血細胞分析儀復檢規則的制定及應用[J].中華檢驗醫學雜志,2010,33(7)：674-679.

[8]高 潔,許宏敏,盧晉英.Sysmex SF-3000血液分析儀對形態異常細胞提示功能的評價[J].中華醫學檢驗雜志,2001,24(4)：221,223.