進(jìn)展性腦梗死炎癥免疫因子臨床研究

孫志華

進(jìn)展性卒中臨床治療效果不佳，致死率、致殘率高，是什么因素促發(fā)或加重了腦梗死的發(fā)生和病情進(jìn)展是臨床迫切需要解決的課題。目前已經(jīng)明確動(dòng)脈粥樣硬化是腦梗死的主要病理基礎(chǔ)，炎癥機(jī)制在動(dòng)脈硬化及心腦血管病病理損害的作用和地位日益受到人們的認(rèn)可，腦梗死發(fā)生后，可引起機(jī)體發(fā)生一系列的免疫變化，眾多細(xì)胞因子在此過程中起著重要的病理作用，腦梗死后炎癥反應(yīng)產(chǎn)生的炎癥介質(zhì)是缺血中心區(qū)和周圍區(qū)神經(jīng)元損傷的重要機(jī)制之一。本研究檢測了急性進(jìn)展性腦梗死患者的血清白介素－6（interleukin－6，IL－6）、白介素－8（interleukin－8，IL－8）、腫瘤壞死因子－α（tumor necrosis factor－α，TNF－α）及其他臨床生化指標(biāo)，探討其與腦梗死的早期進(jìn)展之間是否相關(guān)，以期發(fā)現(xiàn)規(guī)律，從新的角度為臨床防治進(jìn)展性腦梗死提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 病例組：為急性腦梗死患者，入選標(biāo)準(zhǔn)：發(fā)病48h內(nèi)入院；符合第四屆全國腦血管病會(huì)議修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)，均經(jīng)頭CT和／或磁共振成像（MRI）證實(shí)；初發(fā)腦梗死，既往無神經(jīng)系統(tǒng)疾病病史。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往患有免疫系統(tǒng)疾病、腫瘤者；發(fā)病前后存在感染者；發(fā)病前后使用激素、免疫抑制劑、非甾體類抗炎藥物者；合并其他臟器嚴(yán)重并發(fā)癥者（心、肝、腎功能不全者）；確診系因動(dòng)脈炎發(fā)病的腦梗死患者。

共入選128例，其中男81例，女47例，年齡44歲～78歲（62.79歲±11.60歲），于入院當(dāng)時(shí)、入院第3天以及第7天進(jìn)行改良愛丁堡斯勘的那維亞神經(jīng)功能缺損評(píng)分（SSS），采用的進(jìn)展性缺血性腦卒中的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)為：任何2次連續(xù)SSS評(píng)估時(shí)，在意識(shí)水平、上下肢運(yùn)動(dòng)、眼球運(yùn)動(dòng)中，任何1種有≥2分的加重和／或在言語功能中有≥3分的加重。除外腦梗死后出血、發(fā)生其他新梗死灶或因嚴(yán)重的感染、高熱、心功能不全所致的病情進(jìn)展，其中進(jìn)展性腦梗死38例，非進(jìn)展性腦梗死90例。

對(duì)照組：收集同時(shí)期門診常規(guī)體檢的患有高血壓、糖尿病、高脂血癥、高黏血癥等基礎(chǔ)疾病者49例，其中男30例，女19例，年齡44歲～79歲（61.59歲±11.60歲），其年齡、性別、伴隨疾病等情況與腦梗死組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 方法

1.2.1 研究方法 橫斷面研究。

1.2.2 標(biāo)本收集 腦梗死患者入院次日清晨、對(duì)照組空腹采靜脈血10mL，離心、取血清存放于－70℃冰箱內(nèi)，用于IL－6、IL－8、TNF－α的測定，其余血生化指標(biāo)（血糖、膽固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、纖維蛋白原、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞比容）抽血送至醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室檢測。

1.2.3 血清IL－6、IL－8、TNF－α的測定方法 采用中國人民解放軍總醫(yī)院東亞放免研究所提供的試劑盒，均為放射免疫平衡法，反應(yīng)時(shí)間24h。

2 結(jié) 果

2.1 腦梗死組與對(duì)照組IL－6、IL－8、TNF－α水平的比較（見表1）

表1 腦梗死組與對(duì)照組IL－6、IL－8、TNF－α水平比較（±s）

表1 腦梗死組與對(duì)照組IL－6、IL－8、TNF－α水平比較（±s）

組別 n IL－6（pg／mL） IL－8（ng／mL） TNF－α（ng／mL）腦梗死組128 101.99±47.51 0.71±0.37 0.89±0.33對(duì)照組 49 84.09±44.75 0.53±0.31 0.76±0.30 P＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 進(jìn)展性腦梗死組與非進(jìn)展性腦梗死組IL－6、IL－8、TNF－α水平比較 進(jìn)展性腦梗死血清IL－6、IL－8水平明顯高于非進(jìn)展性腦梗死組（P＜0.05）；TNF－α水平雖然也略高于非進(jìn)展性腦梗死組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。詳見表2。

表2 兩組IL－6、IL－8、TNF－α水平比較（±s）

表2 兩組IL－6、IL－8、TNF－α水平比較（±s）

組別 n IL－6（pg／mL） IL－8（ng／mL）TNF－α（ng／mL）進(jìn)展性腦梗死組38 118.10±51.09 0.86±0.31 0.96±0.34非進(jìn)展性腦梗死組 90 95.59±44.40 0.64±0.40 0.86±0.32 P 0.014 0.002 0.141

2.3Logistic回歸分析 只有IL－8、纖維蛋白原（FIB）、血糖進(jìn)入到最后的回歸模型，這表明IL－8、FIB、血糖對(duì)腦梗死的進(jìn)展與否的影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，IL－8、FIB、血糖的參數(shù)估計(jì)值的符號(hào)均為正，可認(rèn)為它們是預(yù)示腦梗死發(fā)生進(jìn)展的危險(xiǎn)信號(hào)。從其比數(shù)比上看出，在因素FIB、血糖固定不變時(shí)，因素IL－8的水平每增加一個(gè)等級(jí)（1ng／mL）所引起的腦梗死發(fā)生進(jìn)展的近似相對(duì)危險(xiǎn)度為增加前的3.754倍；在因素IL－8、血糖固定不變時(shí)，因素FIB每增加一個(gè)等級(jí)（1g／L）所引起的腦梗死發(fā)生進(jìn)展的近似相對(duì)危險(xiǎn)度為增加前的1.944倍；在因素IL－8、FIB固定不變時(shí)，因素血糖每增加一個(gè)等級(jí)（1mmol／L）所引起的腦梗死發(fā)生進(jìn)展的近似相對(duì)危險(xiǎn)度為增加前的1.166倍。對(duì)腦梗死發(fā)生進(jìn)展的相對(duì)貢獻(xiàn)：IL－8＞FIB＞血糖。詳見表3。

表3 進(jìn)展性腦梗死組Logistic回歸分析

3 討 論

炎癥免疫因子是免疫活性細(xì)胞產(chǎn)生的一系列免疫調(diào)節(jié)因子，在機(jī)體防御疾病及損傷修復(fù)過程中具有重要作用，但炎癥免疫因子產(chǎn)生過多又可加重組織損傷。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，大量的證據(jù)表明炎癥在急性腦梗死的病理生理過程中起重要作用，大多數(shù)的炎癥反應(yīng)由細(xì)胞因子所介導(dǎo)，細(xì)胞因子在缺血性腦血管病中的作用已引起眾多學(xué)者的關(guān)注。

進(jìn)展性腦梗死患者臨床癥狀進(jìn)行性加重的病理生理機(jī)制還不太清楚，盡管有一些臨床的、放射學(xué)的和生化因素被認(rèn)為與早期的神經(jīng)功能惡化有關(guān)，但是預(yù)測價(jià)值大多較低。本課題重點(diǎn)研究進(jìn)展性腦梗死的細(xì)胞因子方面的改變，其結(jié)果顯示，進(jìn)展性腦梗死患者炎癥免疫因子有較為顯著的異常，進(jìn)一步證實(shí)炎癥免疫機(jī)制參與腦梗死的發(fā)生發(fā)展。研究表明，血清IL－6是一種在機(jī)體防御、急相反應(yīng)、免疫反應(yīng)和造血反應(yīng)等過程中起重要作用的多效細(xì)胞因子，與缺血性卒中的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)［1］。一方面，IL－6作為神經(jīng)保護(hù)因子和神經(jīng)營養(yǎng)因子，對(duì)缺血后的腦損傷具有保護(hù)作用。在腦室內(nèi)注射重組的IL－6可明顯降低缺血后腦損傷［2］；另一方面，眾多研究也表明，IL－6作為一種重要的炎癥介質(zhì)，在缺血性腦損傷的腦組織中顯著增高、過度表達(dá)可能參與繼發(fā)性腦損傷的過程。有研究表明缺血性卒中患者血清IL－6水平與體溫、血糖、纖維蛋白原以及梗死體積高度相關(guān)，回歸分析證實(shí)血清中IL－6水平為早期臨床癥狀加重的獨(dú)立因素［3］。本研究結(jié)果亦顯示，進(jìn)展性腦梗死組在臨床癥狀惡化前其血清IL－6水平明顯高于非進(jìn)展性腦梗死組，提示IL－6參與局灶性腦缺血后的急性反應(yīng)，與早期的臨床癥狀加重有關(guān)，可以作為預(yù)測腦梗死進(jìn)展的血清學(xué)指標(biāo)。IL－8主要生物學(xué)功能是在炎癥反應(yīng)過程中趨化中性粒細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞。在本次研究中，同樣發(fā)現(xiàn)IL－8在腦梗死患者血清中含量明顯增高，尤其在進(jìn)展性腦梗死患者中尤為突出，經(jīng)回歸分析證實(shí)，其為腦梗死進(jìn)展惡化的危險(xiǎn)因素，是否可通過降低IL－8的活性或拮抗其功能而逆轉(zhuǎn)腦梗死的進(jìn)展，成為擺在我們面前的新課題。作為一種具有廣泛生物學(xué)活性的細(xì)胞因子，TNF－α在腦缺血損傷中的作用日益受到人們的重視，但對(duì)于其是加重缺血神經(jīng)元損傷還是保護(hù)神經(jīng)元免受損傷還存在爭論。一方面認(rèn)為，TNF－α作為一種促炎癥細(xì)胞因子在腦缺血損傷中發(fā)揮重要作用。但是近年來，也有研究提示TNF－α在急性腦損傷中可能具有神經(jīng)保護(hù)作用。不少實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，預(yù)先應(yīng)用TNF－α可提高腦缺血耐受性，達(dá)到與缺血預(yù)處理相同的神經(jīng)保護(hù)效果［4，5］。本研究結(jié)果顯示，TNF－α在腦梗死患者血清中的含量明顯增高，說明TNF－α參與了腦缺血的炎癥反應(yīng)，與國外的報(bào)道相一致，提示TNF－α在腦梗死的發(fā)生發(fā)展中有重要的作用，但是在進(jìn)展性腦梗死組的研究中，未見明顯增高趨勢(shì)，回歸分析亦不提示為進(jìn)展性卒中的危險(xiǎn)因素，說明TNF－α水平與缺血性卒中神經(jīng)功能惡化的關(guān)系不明顯。

高水平的IL－6、IL－8、TNF－α在腦梗死的發(fā)病中具有重要作用，特別是IL－8是進(jìn)展性腦梗死發(fā)生發(fā)展的重要因素。腦卒中后機(jī)體免疫反應(yīng)參與并加重局部腦損傷，各種細(xì)胞因子間相互聯(lián)系、相互依賴并且可能有互相拮抗，形成復(fù)雜的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)。對(duì)炎癥因子在腦梗死發(fā)病中作用的研究，特別是進(jìn)展性腦梗死及其關(guān)系的研究，有助于揭示腦梗死發(fā)病以及其神經(jīng)功能惡化的病理生理過程，并為臨床防治進(jìn)展性腦梗死發(fā)生和減輕其急性期應(yīng)激反應(yīng)、保護(hù)缺血神經(jīng)元提供一定的理論依據(jù)。

［1］劉清閣，邊連防，陳曉紅，等.腦梗死急性期血清IL－6、IL－8動(dòng)態(tài)變化及其與腦梗死病情、預(yù)后的相關(guān)研究［J］.中國醫(yī)師進(jìn)修雜志（內(nèi)科版），2006，29（9）：28－30；54.

［2］Oleksowicz L，Mrowiec Z，Zuckerman D，etal.Platelet activation induced by interleukin－6：Evidence for a mechanism involving arachidonic acid metabolism ［J］.Thrombosis ＆ Haemostasis，1994，72（2）：302－308.

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