高效液相色譜法測定復方氨酚苯海拉明片中鹽酸苯海拉明含量

朱葉青，王瑞生，閆占軍

(1.內蒙古自治區呼和浩特食品藥品檢驗所，內蒙古 呼和浩特 010020; 2.內蒙古自治區藥品檢驗所，內蒙古呼和浩特 010020)

復方氨酚苯海拉明片是由對乙酰氨基酚、咖啡因、鹽酸麻黃堿、鹽酸苯海拉明組成的復方制劑，是常用的解熱鎮痛藥，原標準中無鹽酸苯海拉明的含量測定[1]。本試驗中摸索了其含量測定方法[2]，并證實該方法簡便、準確、可行。

1 儀器與試藥

島津LC－2010A高效液相色譜儀。鹽酸苯海拉明對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號為066－9204);甲醇、乙腈為色譜純，其余均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱:Phenmenex C18柱(250mm×4.6mm，5μm);流動相:己烷磺酸鈉溶液(用冰醋酸調節pH為3.3±0.5)－乙腈－甲醇(50∶30∶20);柱溫:30℃;檢測波長:254 nm;進樣量:10μL。理論板數不低于2 000。

2.2 溶液制備

取本品20片，研細，精密稱取細粉適量(約相當于鹽酸苯海拉明7.5mg)，置50mL量瓶中，加0.5%醋酸適量，充分振搖使溶解，并用0.5%醋酸稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜濾過，取續濾液作為供試品溶液。精密稱取對照品適量，加0.5%醋酸溶解，并稀釋制成每1mL含0.15mg的溶液，作為對照品溶液。

2.3 方法學考察

陰性干擾試驗:按處方比例制備不含鹽酸苯海拉明的空白片，按擬訂的方法進樣分析。結果陰性對照品溶液色譜在鹽酸苯海拉明峰對應位置無干擾，見圖1。

線性關系考察:精密稱取對照品30 mg，置50mL量瓶中，用0.5%醋酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取該溶液0.5，1.5，2.5，3.5，4.5，5.0 mL，分別置 10 mL 量瓶中，用 0.5%醋酸溶液稀釋，搖勻，各進樣10μL。以峰面積(Y)對進樣量(X)進行回歸分析，得回歸方程 Y=772.5X －72.53，r=0.999 9(n=6)。結果表明，鹽酸苯海拉明進樣量線性范圍是0.296～2.96μg。

精密度試驗:取同一對照品溶液，重復進樣5次。測得鹽酸苯海拉明平均峰面積為106 508，RSD為0.15%(n=5)。

穩定性試驗:取同一供試品溶液，每間隔1 h進樣，共進樣6次。結果峰面積基本不變，RSD為0.05%(n=6)。

重復性試驗:取同一批樣品，精密稱取5份，依法測定。測得鹽酸苯海拉明的平均含量為97.46%，RSD為0.3%(n=5)，表明方法的重復性好。

加樣回收試驗:精密稱取已知含量的樣品9份，精密加入鹽酸苯海拉明對照品適量，依法測定，計算回收率。結果見表1。

圖1 高效液相色譜圖

表1 鹽酸苯海拉明加樣回收試驗結果(n=9)

2.4 樣品含量測定

取3批批號為20100604，011201013，20100714的樣品，依法測定，結果含量分別為標示量的87.82%，97.01%，87.29%。

3 討論

流動相pH對鹽酸苯海拉明的色譜行為影響較大，通過試驗最終確定pH為(3.3±0.5)時鹽酸苯海拉明的峰形最佳。

從檢驗情況看，來自不同廠家的3批樣品中，有2批的含量小于標示量(90%)。為全面控制質量，建議盡快修訂標準。

[1]WS－10001－(HD－0671)－2002，國家藥品標準[S].

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:化學工業出版社，2005:528.