無償獻血者B(A)表型2例報告

王林 張國平 李雪英

筆者在工作中發現2例正反定型不符的無償獻血者標本，經一系列血型血清學檢查，證實為罕見的B(A)表型，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源 均來源于本市街頭無償獻血者，其中女性1名，曾有獻血史，獻血檔案記錄為B型；男性1名，為初次獻血者。

1.2 材料

1.2.1 試劑 單克隆抗-A、抗-B(分別由國內甲、乙、丙3個試劑生產廠家提供，均經中國食品藥品鑒定研究院鑒定合格并有合格標簽)；人源抗-A、人源抗-B、抗-A1、抗-H(均由上海血液生物醫藥有限責任公司提供)；A2、A2B細胞是本室制備的冰凍解凍紅細胞；A1、B、O紅細胞是本室使用當天自配的新鮮紅細胞。

1.2.2 儀器設備 KA-2200血球洗滌離心機(日本KUBOTA公司)；SBHW2-1型電熱恒溫水浴箱(北京醫療設備廠有限責任公司)。

1.3 方法

1.3.1 ABO正反定型 分別用3個試劑生產廠家的單克隆抗血清和自配的A1、B、O紅細胞進行正反定型[1]。結果見表1。

1.3.2 亞型檢測 (1)和多克隆人源抗-A 、抗-B反應；(2)和抗-H反應并觀察其反應強度；(3)觀察和抗-A1的反應情況；(4)觀察和A2細胞及A2B細胞的反應情況。結果見表2。

1.3.3 血漿中抗-A1和抗-A效價測定 (1)取2名獻血者血漿各0.3 ml，分別和0.15 ml A2細胞混合，置4 ℃冰箱吸收40 min，當吸收后的血漿和A2細胞的反應呈陰性時，血漿中所剩抗體即為抗-A1。(2)取獻血者吸收后的血漿0.1 ml，用生理鹽水倍比稀釋，加入等量2% A1紅細胞測定抗-A1的凝集效價；(3)取獻血者未吸收的血漿0.1 ml，用生理鹽水倍比稀釋，加入等量2% A2紅細胞測定抗-A的凝集效價。結果見表2。

1.3.4 基因檢測 將獻血者標本快遞至上海市血液中心，由血型參比實驗室協助進行基因檢測。

2 結果

2.1 血型血清學結果 由表1、表2看，2名獻血者的血清學反應格局可歸納為以下3點：(1)紅細胞A抗原減弱，B抗原正常；(2)H抗原明顯增強，與O細胞反應強度相當；(3)血清凝集A1細胞，也凝集A2細胞，即血清中既存在抗-A1，又存在抗-A，均符合B(A)表型的血型血清學特點[2]，所以初步確定為B(A)表型。

2.2 基因檢測結果 經上海市血液中心血型參比實驗室進行基因檢測，2名獻血者分別具有B(A)﹡02和B(A)﹡04等位基因，所以進一步證實為B(A)表型。

表1 2名獻血者ABO正反定型反應格局

表2 2名獻血者亞型檢測反應格局及血漿中抗-A1、抗-A效價測定結果

3 討論

ABO亞型在血型血清學試驗中是導致正反定型不一致的主要原因之一。其中B(A)表型是AB型中非常少見的亞型，在人群中的發生頻率大約在1/17萬～1/58萬[3]。其形成的機制，在文獻[4]中有這樣的描述：(1)A和B糖基轉移酶在選擇催化供體底物時并不是十分精確的，A和B的基因產物可能存在少部分的重疊，在合適的條件下，高活性的B轉移酶能夠催化N－乙酰氨基半乳糖到一種低分子質量的H類似物(2′-巖藻糖)，形成一種具有A活性的結構。(2)在某些個體的分子遺傳學研究結果顯示，與上述高活性B轉移酶能夠產生A抗原的理論并不一致。有2例的核苷酸序列與正常B基因相比具有一個有意義的突變，Ser235Gly，他們是B(A)/O雜合子，他們的父親是A1B，基因型A1/B(A)，因而B(A)表現型更像是由于底物特異性的酶轉變所致，而不是由于顯著增強的B轉移酶活性所致。

無論B(A)表型的形成是哪一種機制，其血型血清學均表現為弱的A抗原，而血清中卻含有比較強的抗-A和抗-A1抗體，極易被誤定為B型而輸注給B型患者，從而導致輸血不良反應，給臨床安全輸血帶來極大隱患。筆者對2例獻血者血漿中的抗體活性及效價進行測定，結果證實，兩者均含有在37 ℃有反應活性的抗-A抗體，所以，當其作為受血者時，只能輸注O型或B型紅細胞，而不能輸注AB型紅細胞，但需要輸注血漿類制品時，則只能輸注AB型，否則，同樣發生輸血不良反應。由此進一步證明，正確鑒定獻血者的B(A)表型以及對其輸血安全問題進行指導的重要性。本文中的女性獻血者，在以往獻血時即被誤定為B型，可能因本站原來初、復檢均使用丙廠家生產的單克隆試劑所致。這種試劑可能是針對一種血型抗原的單個抗原決定簇的單克隆細胞技術生產的單一抗體試劑，抗原抗體反應極為單一[5]，當某一血型抗原的基因表位上哪怕是一個功能基團或原子不同、位置差異和立體構象變化，均可能不被識別而漏檢[6]。本站采用系列參考品，選擇凝集效價高、親和力強、亞型標本檢出率高的甲、乙兩個生產廠家的單克隆抗體試劑，分別用于體采科初檢和檢驗科復檢，從而避免了漏檢情況的再次發生。另外，由于該血型具有遺傳性，本站征得獻血者同意，將組織相關人員對其家系進行調查，以觀察B(A)基因在家族中的傳遞情況，并進一步就獻血、用血以及遺傳等相關問題給予具體指導，確實保證兩個家系家庭成員的輸血安全。由此也體現了本站良好的獻血服務及科學嚴謹的工作態度。

[1] 葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].第3版.南京：東南大學出版社，2006：246-271.

[2]郭忠慧，向東，朱自嚴，等.罕見的CisAB與B(A)血型的基因型研究[[J].中華醫學遺傳學雜志，2004，21(4)：321-324.

[3]范亞欣，孟慶麗，潘凌子，等.1例罕見的B(A)亞型患者的血型鑒定和配血[[J].中國輸血雜志，2011，24(10)：892-893.

[4] 杰夫.丹尼爾.人類血型[M].朱自嚴，譯.北京：科學出版社，2007：27-28.

[5] 宿蘭，楊世英，廉維，等.罕見的B(A)表型血清學及基因檢測[J].中國輸血雜志，2010，23(3)：200-202.

[6] 吳敏慧，劉毅，劉洪莉，等.ABO血型正反定型不符確認試驗結果分析[J].臨床輸血與檢驗，2005，7(3)：198 -199.