D變異型受血者輸RhD陰性血1例

師巧紅樊紅

在臨床輸血工作中，一般采用抗-D(IgM)單克隆試劑檢測(cè)受血者Rh血型，極少能發(fā)現(xiàn)受血者D變異型，本例受血者因附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科與輸血科檢測(cè)RhD采用不同來(lái)源抗-D試劑，兩科試劑檢測(cè)結(jié)果不一致，才發(fā)現(xiàn)受血者為D變異型，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 受血者，男，49歲，2011年7月29日確診為胃癌，術(shù)前備血，本地附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科檢驗(yàn)血型A型RhD陽(yáng)性，輸血科檢驗(yàn)血型為A型RhD陰性，因兩個(gè)實(shí)驗(yàn)室的RhD檢測(cè)結(jié)果不一致，送血站血型室進(jìn)一步確認(rèn)患者RhD血型。筆者所在科室采用間接抗人球蛋白法確認(rèn)為D變異型，輸RhD陰性血，無(wú)輸血不良反應(yīng)。

1.2 試劑與儀器 初篩選用抗-D(IgM)單克隆抗體(來(lái)源：上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，批號(hào)：20110218)；戴安娜微柱凝膠(批號(hào)：1107.02)；DiaMed，微柱凝膠(批號(hào)：50093.35.06)；確認(rèn)試劑為抗 -D1、抗 -D2、抗 -D3，抗 -D1(IgG)；單克隆抗體(來(lái)源：上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，批號(hào)：20101022)；抗-D2(IgG+IgM，來(lái)源：美國(guó)美德聲公司，批號(hào)：NDMG05602)；抗-D3(IgG+IgM，來(lái)源：Millipore UK，批號(hào)：BMH0806E)；BASO 2002-2離心機(jī)；電熱恒溫水浴箱(北京醫(yī)療設(shè)備廠)。

1.3 方法 血型血清學(xué)方法，按試劑說(shuō)明書(shū)采用鹽水法、抗人球蛋白法檢測(cè)[1]。

2 結(jié)果

2.1 受血者RhD初篩血型，醫(yī)院檢驗(yàn)科用戴安娜微柱凝膠法檢測(cè)為RhD陽(yáng)性。醫(yī)院輸血科采用Diamed微柱凝膠法檢測(cè)為RhD陰性，血站血型室采用鹽水凝集法檢測(cè)為RhD陰性。

2.2 受血者RhD血型確認(rèn)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 受血者RhD血型確認(rèn)結(jié)果

3 討論

在紅細(xì)胞29個(gè)血型系統(tǒng)中，Rh血型系統(tǒng)是最具復(fù)雜性和多態(tài)性的血型系統(tǒng)，在輸血醫(yī)學(xué)中的重要性?xún)H次于ABO血型系統(tǒng)[2]。Rh血型系統(tǒng)抗原總數(shù)約有45種之多，主要抗原有D、C、E、c和e五種抗原，由于D抗原的抗原性最強(qiáng)，具有高免疫性而最具臨床意義，因此，根據(jù)紅細(xì)胞上D抗原的有無(wú)，將其分為Rh陽(yáng)性或Rh陰性，其它抗原強(qiáng)弱依次為E>C>c>e的次序，均顯示劑量效應(yīng)。RhD血型在不同人種中的分布比例是有差異的，Rh陰性血型在我國(guó)漢族和蒙古族屬稀有血型[3]。近年來(lái)通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，RhD抗原分為D陽(yáng)性、D陰性和D變異型，而D變異型又分為弱D和部分D；弱D抗原的改變位于細(xì)胞膜內(nèi)和膜中，細(xì)胞膜外的蛋白質(zhì)沒(méi)有改變，只有抗原數(shù)量的改變，而抗原質(zhì)量未改變；部分D抗原的改變則位于細(xì)胞膜外，抗原性和數(shù)量都發(fā)生了改變[2]。本例受血者在常規(guī)鹽水法初篩D抗原時(shí)為陰性，間接抗人球蛋白試驗(yàn)確認(rèn)為陽(yáng)性，證實(shí)存在D抗原，由于血型血清學(xué)方法只能檢測(cè)抗原與抗體的反應(yīng)，無(wú)法區(qū)別弱D和部分D。D抗原位于RhD基因編碼的RhD多肽上，該多肽帶有6個(gè)細(xì)胞外環(huán)，貫穿紅細(xì)胞膜12次，氨基端和羧基端均位于胞漿中[4]。6個(gè)細(xì)胞外環(huán)中含有多個(gè)具有抗原性的抗原決定簇，當(dāng)RhD基因發(fā)生突變、缺失，影響D抗原決定簇的質(zhì)或(和)量的表達(dá)稱(chēng)之為D抗原變異型。國(guó)際輸血協(xié)會(huì)(ISBT)根據(jù)D抗原將D表型分為五型：(1)D表型：即D抗原正常。(2)弱D(DU)表型：抗原數(shù)減少，抗原表位正常。(3)不完全D：抗原數(shù)量正常，但缺乏某些抗原表位。(4)不完全弱D：抗原數(shù)量少，同時(shí)缺乏某些抗原表位。(5)增強(qiáng)D：抗原數(shù)量明顯增加，抗原性增強(qiáng)。不同的商品化的抗D試劑與D抗原決定簇結(jié)合位點(diǎn)不同，即使對(duì)同一抗原決定簇反應(yīng)，但其結(jié)合能力也有差別。這就是表達(dá)D抗原變異型紅細(xì)胞與某些商品化的抗-D試劑在不同條件下反應(yīng)格局不同的原因。本例受血者在醫(yī)院檢驗(yàn)科與輸血科采用不同廠家微柱凝膠檢測(cè)卡檢測(cè)同一份血液，其結(jié)果不同，經(jīng)過(guò)筆者所在站血型室進(jìn)一步檢測(cè)，在常規(guī)鹽水法初篩D抗原時(shí)為陰性，間接抗人球蛋白試驗(yàn)確認(rèn)為陽(yáng)性，證實(shí)存在D抗原。

根據(jù)美國(guó)AABB技術(shù)手冊(cè)第12版(1996)規(guī)定：Du這術(shù)語(yǔ)不再使用，攜帶弱的D抗原的紅細(xì)胞仍被歸類(lèi)為D陽(yáng)性，稱(chēng)之“弱D(weakD)”，原稱(chēng)之Du紅細(xì)胞一部分具有與正常D陽(yáng)性紅細(xì)胞同樣性質(zhì)的D抗原，只是D抗原數(shù)量減少；另一部分原D紅細(xì)胞D抗原與正常D抗原相比缺少正常D抗原中1個(gè)或多個(gè)抗原表位[5]。

本例受血者，在術(shù)中輸4單位ABO同型的RhD陰性冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞。在臨床輸血中，未發(fā)生溶血性輸血不良反應(yīng)。

由于D變異型仍具有免疫原性及抗原性，因此，此類(lèi)人群作為獻(xiàn)血者視為RhD陽(yáng)性，如果此類(lèi)人群為受血者則視為RhD陰性。在受血者人群RhD血型檢測(cè)時(shí)，由于微柱凝膠檢測(cè)卡方法其靈敏度高，加之如果反應(yīng)體系內(nèi)加入廣譜、高效價(jià)抗D試劑，易導(dǎo)致部分D變異型誤定為陽(yáng)性，而給患者輸入RhD陽(yáng)性紅細(xì)胞血液制品，增加產(chǎn)生抗D抗體的幾率。建議醫(yī)院在對(duì)患者進(jìn)行RhD血型篩查時(shí)選用單克隆試劑，并且采用鹽水凝集法檢測(cè)，有條件的醫(yī)院應(yīng)采用不同廠家的抗-D試劑進(jìn)行檢測(cè)，以確保輸血安全。

總之，受血者采用常規(guī)鹽水法初篩D抗原即可，如果為D陰性無(wú)需做間接抗人球蛋白確認(rèn)試驗(yàn)，該受血者需要輸注RhD陰性血液；供血者為D變異型應(yīng)作RhD陽(yáng)性論，不應(yīng)當(dāng)輸血給RhD陰性的受血者，因此，在血站對(duì)供血者做Rh血型檢測(cè)，檢測(cè)出陰性的標(biāo)本必須做確認(rèn)試驗(yàn)，采用不同批次的抗-D血清進(jìn)行間接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)，如果是陽(yáng)性結(jié)果，表明D陽(yáng)性，按Rh陽(yáng)性血對(duì)待。

[1]李勇，楊貴貞.人類(lèi)紅細(xì)胞血型血清學(xué)實(shí)用理論與實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].北京:中國(guó)科學(xué)技術(shù)出版社，1999:82-86.

[2]孫國(guó)棟，王曉平.Rh血型系統(tǒng)弱D及部分D研究進(jìn)展[J].臨床輸血與檢驗(yàn)，2007，9(2)：183-185.

[3]王華，張洪為，譚芳，等.RhD陰性患者血清學(xué)表型和不規(guī)則抗體篩查結(jié)果分析[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2011，8(2)131-133.

[4]孫國(guó)棟，段現(xiàn)民，張彥平，等.中國(guó)人群眾發(fā)現(xiàn)的主要弱D型-弱D15個(gè)體的分子背景研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志，2006，14(5)：1024-1028.

[5]也應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].南京:東南大學(xué)出版社，2006:251.