血栓調節蛋白和纖維蛋白原在原發性腎病綜合征中的相關性研究

王玉路，褚以德，胡文博

（1.青海大學醫學院，西寧810001；2.青海省人民醫院腎內科，西寧810007）

原發性腎病綜合征（idiopathic nephrotic syndrome，INS）是腎病綜合征中最常見的類型，主要的病理類型有微小病變腎病（minimal change disease，MCD）、系膜增生型腎小球腎炎（mesangial proliferative glomerulonephritis，MsPGN）、系膜毛細血管性腎小球腎炎（mesangiocapillary glomerulonephritis，MCGN）、膜性腎病（membranous nephropathy，MN）、局灶性節段性腎小球硬化（focal segmental glomerularsclerosis，FSGS）5種。各種病理類型均可引起腎小球血管內皮細胞的損傷，其常見的并發癥是血栓和栓塞，而血栓的形成是引起腎小球硬化的主要因素［1］。血栓調節蛋白（thrombomodulin，TM）是血管內皮細胞膜上的糖蛋白，當血管內皮細胞受損時加速斷裂或脫落進入血循環中，依其濃度的變化可以評估患者血管內皮細胞損傷及疾病的嚴重程度，是反映血管內皮細胞損傷的敏感指標［2］。纖維蛋白原（fibrinogen，FG）即凝血因子Ⅰ，是由肝臟合成的一種急性時相血漿糖蛋白，FG能刺激血管內皮細胞和平滑肌細胞合成和分泌內皮素并抑制一氧化氮合酶和一氧化氮的生成，造成血管損傷，發揮促凝作用［3］。血清TM（serum TM，sTM）與FG在不同病理類型INS是否存在相關性尚未見報道，本研究探討不同病理類型INS患者sTM表達水平是否存在差異，及其與FG表達水平是否存在相關性，并為INS并發血栓和栓塞形成的觀察指標提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011年1～9月在青海省人民醫院行腎活檢，組織經HE、PAS、PASM特殊染色、Masson染色及免疫組化染色檢測明確診斷病理類型的INS患者60例。其中，男33例，女27例；年齡14～64歲，平均（32.39±13.16）歲；病理活檢分型：MCD 9例、MsPGN 26例、MCGN 7例、MN 13例、FSGS 5例；健康對照30例，其中，男19例，女11例，年齡16～65歲，平均（33.54±14.43）歲，均來自青海省人民醫院體檢中心，發病年齡及男女比例比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 sTM檢測方法 所有患者均于腎活檢當日靜脈采血5mL，自然存放1～2h后，再3 000r／min離心15min，取上清液置于－20℃低溫冰箱保存待測，1個月內測定sTM，檢測采用人類CD141酶標記免疫吸附測定法，定量測定人血清中CD141蛋白（TM）。試劑盒購自上海亞培生物科技有限公司，嚴格按說明書操作。

1.3 FG的測定 清晨空腹采取外周血，用3.8%枸櫞酸鈉抗凝，1h內離心（3 000r／min）血漿10min，在血凝分析儀上用比濁法定量測定。

1.4 統計學處理 采用SPSS16.0軟件對數據進行統計分析，結果用±s表示，顯著性檢驗采用方差分析，兩兩比較采用SNK－q檢驗，指標相關性分析采用簡單相關性及直線回歸，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 各種分型的INS的sTM及FG水平 不同分型INS的sTM水平均高于健康對照組，MN組sTM水平低于INS其他各組、FG水平高于INS其他各組，見表1。

表1 不同病理類型INS患者sTM、FG與健康對照組檢測結果比較（±s）

表1 不同病理類型INS患者sTM、FG與健康對照組檢測結果比較（±s）

＊：P＜0.05，與健康對照組比較；＃：P＜0.05，與 MN組比較；△：P＜0.05，與MN組比較；－：表示此項無數據。

組別 n sTM（ng／mL） FG（g／L）健康對照組30 0.399±0.035 4 －MCD組 9 1.143±0.079 0 3.170±0.652 0 MsPGN組 26 1.117±0.096 8＊ 2.953±0.567 5＊MCGN組 7 1.169±0.073 6＊＃ 3.270±0.536 5＊＃MN組 13 0.805±0.221 4 3.970±0.544 8 FSGS組 5 1.230±0.137 3＊△ 3.200±0.729 2＊＃△F－ 268.048 15.451 P－＜0.05 ＜0.05

2.2 INS各種病理類型血清sTM水平與FG的相關性分析

MCD組、MCGN組、FSGN組血清sTM與FG無顯著相關性（P＞0.05），MsPGN組、MN組血清sTM與FG呈負相關（P＜0.05），隨FG的增加而表達降低，見表2。

表2 INS各種病理類型血清中sTM與FG的相關分析

3 討 論

TM是1982年首次由Esmon從兔肺中分離提取的一種具有重要抗凝作用的細胞膜蛋白，大多出現在動脈、靜脈、毛細血管和和淋巴血管的內皮細胞表面，主要是作為凝血酶受體發揮生物學效應［3］。其凝血功能主要通過兩個方面發揮作用：（1）促進蛋白C（PC）的活化，形成活化后的蛋白C（APC）。（2）是與凝血酶形成復合物，使凝血酶促凝性質改變［4－5］。TM也是細胞間黏附分子的一種，參與腫瘤細胞的產生、增殖和轉移［6］。TM通常在體內細胞膜表面和血漿中穩定表達，當人體內正常內皮細胞病變和損傷時，常發生TM在細胞膜表面和血漿中表達水平的變化［7］。由于TM特異分布于血管內皮細胞，故已被作為血管內皮損傷的一個分子標記物廣泛用于微血管病變、腦血管、原發性高血壓、腫瘤、系統性紅斑狼瘡、糖尿病腎病、慢性腎衰竭等臨床研究［8－13］。FG即凝血因子Ⅰ，血漿中的FG含量正常范圍是2～4g／L，現在研究發現FG水平升高就會增加血管中血液的黏度、使血小板的聚集，促進血栓形成［14］。腎病綜合征并發血栓和栓塞的發生率約占10%～42%，以MN發生率最高，約為29%～60%，主要與INS的嚴重程度、腎小球疾病的種類有關，但監測手段的敏感性也影響血栓和栓塞的發現［1］。本研究顯示，sTM可以作為血管內皮損傷的一個分子標記物，不同分型INS的sTM水平均高于健康對照組，MN組的sTM水平低于INS其他各組、FG水平高于INS其他各組；病理類型為MN的sTM較其他INS病理分型表達水平低，也說明了MN較其他類型INS患者更容易發生血栓和栓塞，病理類型為MsPGN和MN的sTM與FG表達呈負相關，說明了此兩種病理類型INS可以用FG間接反映血管內皮細胞損傷的程度。病理類型為MCD、MCGN、FSGN的sTM與FG表達無顯著相關性，具體原因有待進一步研究。

本研究提示，sTM水平不僅可以作為腎小球血管內皮細胞損傷的敏感指標，而且與FG在MsGPN、MN組中有負相關性，可以為MsGPN、MN類型的INS并發血栓和栓塞的臨床觀察指標提供一定的指導依據。

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