紫外分光光度法測定黃芪總皂苷口腔黏附緩釋片中總皂苷的含量

2012-10-10 12:17:24蔡君

中國中醫基礎醫學雜志 2012年7期

蔡君

(廣州中醫藥大學第一附屬醫院，廣州 510400)

黃芪是1味重要的中藥，具有益衛固表、利水清腫、托毒生肌、補中益氣等功效，民間常用于治療自汗、盜汗、血痹、浮腫、痛疽不潰或潰久不斂、內傷帶虛、脾虛泄瀉及一切氣衰血虛之癥［1］。黃芪總皂苷為黃芪的主要活性成分之一。研究表明，黃芪總皂苷有良好的黏膜保護作用［2］。我們利用羥丙基甲基纖維素(HPMC)和丙稀酸樹脂E100作為黏附材料和骨架材料，將黃芪總皂苷制成口腔黏附緩釋片，為保證質量我們對制劑工藝進行考核，并建立了簡便、快捷、準確的紫外分光光度法，以測定黃芪總皂苷口腔黏附緩釋片中總皂苷的含量。

1 材料與儀器

1.1 材料與試劑

黃芪總皂苷購自南京澤朗醫藥科技有限公司，黃芪甲苷對照品由中國藥品生物制品檢定所提供(批號 110781—200613)，濃硫酸、香草醛、無水乙醇、甲醇均為分析純。

1.2 儀器

TU-1810紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司)，AE200型電子分析天平(瑞士梅特勒公司)，電熱恒溫水溫箱(上海躍進醫療器械廠)。

2 方法與結果

2.1 標準品溶液的制備［3］

精密稱取黃芪甲苷對照品5.1mg置于10mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻備用。

2.2 供試品溶液的制備

取黃芪總皂苷制成口腔黏附緩釋片20片，置于干燥、潔凈的研缽中充分研碎并研磨均勻，精密稱取細粉100mg置于25mL量瓶中，準確加無水乙醇25mL稱重，超聲處理(53KHz，功率 100%)30min，取出放涼，用無水乙醇補足減失的重量濾過，收集續濾液備用。

2.3 測定波長的選擇

圖1、2顯示，精密吸取對照品溶液和供試品溶液各0.3ml，分別加入具塞試管中，加無水乙醇補足體積至0.5ml再分別加入8%的香草醛無水乙醇試液0.5 ml和 72%的硫酸 5.0ml，搖勻，立即放入62℃恒溫水浴中，保溫20 min后置冷水浴中冷卻至室溫，以試劑作空白對照，用紫外分光光度計在400～700 nm范圍掃描。結果對照品溶液在580 nm波長處有最大吸收，供試品溶液在580 nm波長處也有較大吸收，故確定測定波長為580 nm。

圖1 黃芪甲苷對照品吸收圖譜

圖2 供試品溶液吸收圖譜

2.4 標準曲線的制備［6］

分別精密吸取黃芪甲苷對照品溶液0.05、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50 mL 至具塞試管中，加無水乙醇補足體積至0.5 ml，再分別加入8%的香草醛無水乙醇試液0.5 ml和72%的硫酸5.0 ml搖勻，立即放入62℃水浴加熱20min取出，置冷水浴中冷卻至室溫，于580 nm波長處測吸光度。同時以隨行試劑作空白，以吸光度為縱坐標，黃芪甲苷的濃度為橫坐標，得標準回歸方程為:Y=0.00159 X+0.06855(r2=0.9942)，表明黃芪甲苷濃度在51～510mg·L－1范圍，線性關系良好。