ANA譜檢測對自身免疫性疾病診斷的臨床意義

劉 萍

(云南省普洱市人民醫院，云南普洱665000)

自身免疫性疾病是指機體自身對自身抗原發生免疫反應，從而導致自身組織損害所引起的疾病。病人血清中可檢測出高滴度的自身抗體。ANA譜的檢測在判斷疾病的活動過程、觀察治療效果，以及指導臨床用藥等方面有重要的臨床意義[1］。臨床常見的自身免疫性疾病有系統性紅斑狼瘡(SLE)、干燥綜合癥(SS)、硬皮病(PSS)、多發性肌炎和皮肌炎(Pm/Dm)及混合型結締組織病(MCTD)、類風濕關節炎(RA)、原發性膽汁肝硬化(PBC)等。

1 資料與方法

1.1 一般材料:選取2008年至2011年本院經臨床確診為自身免疫性疾病患者110例，為A組，有SLE 30例;SS 40例;PSS 12例;RA 15例;Pm/Dm 7例;MCTD 3例;PBC 3例。本院健康體檢者110例為B組。

1.2 標本采集:取空腹血3mL，離心分離血清，－20℃冰箱保存。

1.3 檢測方法與試劑:ANA譜檢測采用免疫印跡法，試劑由德國歐蒙(杭州)醫學實驗診斷有限公司研制生產。待測血清用標本緩沖液1:101稀釋，將稀釋血清與檢測膜條反應溫育。如果樣本陽性，特異性的IgG(也包括IgA和IgM)與相應抗原結合，為檢測已結合的抗體，加入酶標抗人IgG(酶結合物)進行第二次溫育。然后加入酶底物液，以產生可觀察的顏色反應。待膜條用吸水紙小心吸取水分，風干后采用EUROLineScan評判結果，將待分析膜條放置在相應的工作紙上，進入EUROLineScan軟件，Test的代碼是Ana3(ANA譜3，14 個抗原)，LIDE 掃描[2］。

1.4 統計學處理:采用SPSS 13.0統計學軟件進行數據分析，陽性率之間的比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

ANA譜檢測自身免疫性疾病，A組自身抗體陽性檢出88例，陽性率為88/110，即80%。各類自身免疫性疾病單項或多項自身抗體陽性率分布見表1。因考慮到成本費用，B組先采用間接免疫熒光篩選(試劑用歐蒙)，110例健康體檢者有7例陽性，再將這7例用歐蒙ANA譜試劑膜條分析。該組自身抗體陽性檢出7例，陽性率為7/110，即6.2%。但這7例抗原帶著色均較淺或無色，掃描分析結果均為陰性。

表1 各類自身免疫性疾病單項或多項自身抗體陽性分布

健康體檢采用間接免疫熒光篩選(試劑用歐蒙)，110例健康者有7例陽性，考慮到成本費用，將這7例再用歐蒙ANA譜試劑膜條分析。抗原帶著色較淺或無色，掃描分析均為陰性。分析表1可知，各種自身抗體在膜條上的陽性率以SS－A、Ro－52、SS－B為主，為39%(43/110);ds－DNA、核小體次之，為5.4%(6/110);再者是nRNP/Sm，為4%，Sm為1.8%。各種疾病如SLE出現nRNP/Sm、SS－A、Ro－52、SS－B、ds－DNA、核小體、HI、核糖體 P 蛋白、Sm 多種抗體，SS出現SS－A、SS－B抗體頻率較高。PSS抗URNA、抗Sct－70為75%(10/12)，RA抗URNP為26%(4/15)，Pm/Dm、Jo－1為 50%(1/2)，MCTD 抗 URNP為 33%(1/3)，PBC、AMA－M2為66%(2/3)。

3 討論

自身免疫性疾病是以多個臟器系統損傷為特點所引起的疾病。總體上可分為器官特異性和系統性自身免疫病兩類。器官特異性自身免疫病指組織器官的病理損害和功能障礙，僅限于抗體或致敏淋巴細胞所針對的某一器官，如PBC。系統性自身免疫病指由于抗原抗體復合物廣泛沉積于血管壁等原因導致全身多器官損害，習慣上又稱為膠原或結締組織病[3］，如SLE、SS等。自身免疫疾病一般病理較長，慢性疾病，發作與緩解反復交替出現，任何年齡、性別均可發病，女性大于男性，常累計多器官多系統。自身免疫性疾病主要是自身免疫抗體存在于患者體內。檢測患者自身免疫抗體也成為診斷自身免疫疾病的重要依據。采用ANA譜檢測可查到自身抗體14種(IgG)，不同的疾病可出現不同程度的陽性[4］。

3.1 系統性紅斑狼瘡SLE，病人血清中可出現多種自身抗體。抗Sm和抗ds－DNA一起出現可為特異性診斷指標(90%)。ds－DNA滴度的變化可以作為檢測SLE病情變化的實驗指標。

3.2 原發性干燥綜合征SS，是一種累積外分泌腺體的慢性炎性反應疾病。SS－A、Ro－52、SS－B對原發性干燥綜合癥診斷具有較高敏感性，二者抗體幾乎總是相伴出現，40例SS患者中單獨出SS－A+Ro－52的有23例，單獨出現SS－B的有16例。在診斷干燥綜合癥時，抗SS－B抗體比抗SSA抗體更特異，是干燥綜合癥血清中的特異抗體。同時在其他自身免疫性疾病中也有抗SS－A和SS－B抗體出現，如SLE、RA，但血清滴度水平遠低于干燥綜合癥。

3.3 進行性系統硬化癥PSS，在12例皮膚有彌漫型多發性系統性硬化癥患者血清中有抗Scl－70抗體有10例。

3.4 多肌炎:抗Jo－1、PM－Scl對多發性肌炎具有較強特異性，2例患者中出現1例，陽性率為50%。

3.5 混合型結締組織病MCDT，在MCDT病中抗U1－RNP抗體幾乎均為陽性，且有較高滴度的血清水平。抗體滴度與疾病活動相關，在SLE也可檢出U1－RNP抗體，但幾乎均伴有Sm抗體。在沒有其他抗體存在的情況下，一般認為抗U1－RNP抗體是MCDT的診斷指標。

3.6 原發性膽汁性肝硬化PBC，高滴度的AMA－M2抗體是PBC的診斷指標。在其他肝病(慢性肝臟疾病30%和進行性系統性硬化癥7% ～20%)中可見出抗體AMA－M2抗體，但滴度較低。若在PSS中出現AMA－M2可能是重疊有原發性膽汁肝硬化疾病。

總之，自身免疫性疾病因其發病原因至今未明，臨床表現變化多樣，不易被早期診斷。自身抗體14項抗體的檢測對多種自身免疫性疾病的診斷和鑒別診斷具有重要意義，但是存在一定的假陽性(就如本文中的110例健康者也有7例陽性)，還需要和其他檢測方法(如FII、ELSE、斑點法)聯合檢查。臨床醫生在對實驗結果做出正確判斷之前，還要結合臨床表現、病史等，不能孤立地看待每項結果。應將疾病全面衡量，以免本末倒置，給予正確的診斷疾病。

[1]劉軍鋒，賈克鋼，劉遠德.免疫印記法檢測在自身免疫性疾病ENA多肽抗核抗體譜及臨床意義[J］.國際檢驗醫學雜志，2006，27(7):669 －670.

[2]歐蒙公司:ANA譜(IgG)檢測試劑盒(歐蒙印跡法)產品說明書第5頁.

[3]張德法，崔毓祥，陳子慶，等.8種自身抗體聯合檢測對自身免疫性疾病診斷的臨床意義[J］.江蘇醫藥，2010，36(10):1123.

[4]劉蘭，陳娟.抗核抗體與5種自身免疫性疾病應用[J］.檢驗醫學與臨床，2010，7(20):2263 －2264.