人脂肪基質(zhì)細(xì)胞向胰島素分泌細(xì)胞的分化誘導(dǎo)

韋安慧，李會(huì)敏，付常皓，王浩天，王文加，蘇曼曼，顏煒群

(1.吉林大學(xué)藥學(xué)院生物工程教研室，吉林 長(zhǎng)春 130021； 2.吉林大學(xué)第二醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林 長(zhǎng)春 130041)

糖尿病是由多種病因引起的以慢性高血糖為特征的代謝性疾病，嚴(yán)重危害人類(lèi)健康。近年來(lái)，隨著胰島素治療的改善，胰腺和胰島細(xì)胞移植成為治療糖尿病的有效途徑[1-2]。但是胰腺和胰島細(xì)胞移植治療受到供體來(lái)源不足和移植排斥等因素的限制[3]。干細(xì)胞研究為胰島細(xì)胞來(lái)源開(kāi)辟了新的途徑。通過(guò)干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化，可以產(chǎn)生大量有功能的胰島樣細(xì)胞，進(jìn)而移植治療糖尿病[4-6]。胚胎干細(xì)胞具有分化的全能型，體外可以分化為胰島素分泌細(xì)胞[7-8]，但是存在潛在致瘤性和倫理道德的問(wèn)題，因此成體干細(xì)胞成為了理想的細(xì)胞來(lái)源。Timper等[9-10]誘導(dǎo)人脂肪基質(zhì)細(xì)胞(human adipose tissue-derived stromal cells,hADSCs)分化為胰島素分泌細(xì)胞，但是誘導(dǎo)后細(xì)胞是否受葡萄糖調(diào)節(jié)未檢測(cè)，而且誘導(dǎo)后細(xì)胞的分化率低。在此基礎(chǔ)上，本研究利用exendin-4、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(epidermal growth factor,EGF)和尼克酰胺等誘導(dǎo)hADSCs形成胰島樣細(xì)胞團(tuán)、分泌胰島素，旨在探討hADSCs分化為胰島素分泌細(xì)胞的潛能，為其應(yīng)用于臨床移植治療糖尿病奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 主要材料DMEM培養(yǎng)基(Gibco)、胎牛血清、exendin-4(Sigma)、尼克酰胺、雙硫腙、bFGF(Promega)、Trizol試劑(Invitrogen)，引物由上海生工合成。

1.2 細(xì)胞培養(yǎng)脂肪組織由吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院整形外科提供，供者均為健康女性，年齡20～35歲，吸脂部位為腰腹部。知情同意，將所得脂肪組織，低溫條件下2 h送到實(shí)驗(yàn)室操作。……