歸龍筋骨寧片中士的寧的含量測定

2012-11-01 16:42:46張立鳳

亞太傳統醫藥 2012年2期

魏霞，張立鳳，魏海

（1.四平巨能藥業有限公司，吉林四平 136000；2.吉林益民堂制藥有限公司，吉林四平 136001；3.四平婦嬰醫院，吉林四平 136000）

歸龍筋骨寧片由穿山龍、當歸、桃仁（炒）、桂枝、丹參、地楓皮、制草烏、乳香（炒）、蒼術（炒）、川牛膝、威靈仙、甘草、千年健、紅花、馬錢子（制）等中藥組成。具有祛風活血，舒筋止痛的作用，用于風寒濕痹，關節疼痛［1］。本研究以歸龍筋骨寧片中馬錢子的主要成分士的寧的含量為指標，探討其質量標準的定量檢測方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

島津LC-2010高效液相色譜儀（紫外可見雙波長檢測器SPD-10AVP Plus）；BSZZ4S型電子分析天平（北京賽多利斯儀器系統有限公司）；KDQX-260超聲波清洗機（濟寧科電檢測儀器有限公司）。

1.2 試藥

士的寧對照品，含量測定用，批號110721-200211，中國藥品生物制品檢定所提供；醋酸乙酯、乙腈，色譜純，山東禹王實業有限公司禹城化工廠；其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

按照高效液相色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VI D）測定［2］，色譜柱：Shim-pack柱，4.6mm×150mm；乙腈-水（11：89）含三乙胺0.01mol／L，用磷酸調pH 值至3為流動相；流速：1.0mL／min；檢測波長260nm；理論板數按士的寧峰計算應不低于2500。分離度大于1.5。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備

精密稱取士的寧對照品適量，加醋酸乙酯制成每1mL含0.05mg的溶液，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備

取本品重量差異項下的10片，除去糖衣，精密稱定，研細，取0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加氯仿25mL與濃氨試液1mL，密塞，輕輕振搖，稱定重量，放置24h，稱定重量，用氯仿補足減失的重量，振搖，精密量取續濾液10mL，置分液漏斗中，用硫酸溶液振搖提取5次，每次20mL，合并硫酸液，用濃氨試液調節pH值至9～10，用氯仿振搖提取5次（30mL、20mL、20mL、20mL、20mL），合并氯仿液，蒸干，殘渣加醋酸乙酯使溶解，移至5mL量瓶中，加醋酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2.3 缺馬錢子的陰性對照溶液制備

依據處方中的比例，按制法制備缺馬錢子的陰性對照樣品，按“2.2.2”項方法制備陰性對照溶液。

2.3 系統適用性試驗

分別精密吸取供試品溶液及對照品溶液各10μL，注入液相色譜儀中測定。結果士的寧在9～10min內出峰，而且與前后的峰均有較好的分離，見圖1、圖2，陰性樣品不干擾樣品測定，見圖3。

2.4 線性關系的考察

精密稱取士的寧對照品，分別加醋酸乙酯制成0.02514mg／mL、0.1257mg／mL、0.2514mg／mL、0.3352mg／mL、0.419mg／mL的溶液，分別精密吸取上述溶液10μL注入液相色譜儀，測定峰面積積分值，計算（見表1）。以峰面積積分值為縱坐標，士的寧對照品進樣量為橫坐標繪制標準曲線（見圖4）。得回歸方程Y＝17762.8+1870822X，相關系數r＝0.9996，結果表明士的寧量在0.2514～4.19μg／mL范圍內，峰面積積分值與士的寧量呈線性關系。