大豆皂甙對糖尿病大鼠心、肝、腎組織細胞酶活性作用的影響

白 雪，石 搏，王元春，黃可欣＊

（1.吉林大學白求恩醫學院 形態學中心，吉林 長春130021；2.中國解放軍第二零二醫院；3.吉林大學中日聯誼醫院）

我國有悠久的大豆栽培歷史，大豆產品是我國人民日常生活不可缺少的食品。大豆不僅富含優質蛋白質和油脂，且還含有大量具有生理活性的物質，包括大豆皂甙、大豆磷脂、低聚糖類等［1］；其中對大豆皂甙的研究，近年來有資料表明大豆皂甙能降低血糖、保護心血管系統、抗癌癥以及抗衰老作用［2］，但大豆皂甙對糖尿病大鼠心、肝、腎組織細胞酶活性的研究在國內外尚未見相關報道，本實驗旨在觀察大豆皂甙對糖尿病大鼠心、肝、腎的作用，為大豆皂甙廣泛應用于臨床和預防保健提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物和主要試劑 190－210g健康雄性Wistar大鼠45只，由吉林省藥品檢驗所提供（合格證號960101032）；大豆皂甙（SS）由吉林省中醫中藥研究所提供；實驗用大豆皂甙用生理鹽水稀釋；鏈脲佐菌 素 （STZ）購 于 Sigma 公 司、GOT、GPT、GLDH、ICDH、CK、LDH、HBDH、LAP、AKP試劑盒購于南京建成生物有限公司。

1.2 糖尿病模型制備 在實驗分組前，首先制備糖尿病模型，隨機取實驗動物35只，腹腔注射STZ（用新配制的枸櫞酸緩沖液溶解）50mg／Kg；48小時后采尾血測空腹血糖，濃度大于16.7mmol／L為模型復制成功［3］，該模型成功30只。

1.3 實驗分組及給藥 取未造模的10只動物做正常對照組，造模成功的30只動物隨機分為糖尿病對照組（15只）、大豆皂甙給藥組（15只），大豆皂甙給藥組每日灌胃大豆皂甙10mg／Kg，正常對照組及糖尿病對照組均每日給與等劑量生理鹽水，連續給藥3個月。在實驗過程中糖尿病對照組動物死亡4只、大豆皂甙給藥組動物死亡1只。

1.4 實驗后的處理 各組均取10只動物取材，實驗結束次日清晨處死，稱量體重。取心、肝、腎組織50mg，加2.0ml pH7.4PBS，手動勻漿，2000g離心，留上清待測［4］；測試儀器為日本日立牌7150型生化自動分析儀檢測。

1.5 統計學分析 大鼠體重及心、肝、腎組織的各指標（GOT、GPT、GLDH、ICDH、CK、LDH、HBDH、LAP、AKP）均以表示，應用SPSS19.0統計軟件進行統計學處理，多個樣本均數間比較采用方差分析。

2 結果

2.1 大鼠的體重 對照組：大鼠精神狀態好、皮毛光滑、體重明顯增加、反應靈敏；糖尿病組：大鼠明顯消瘦，精神萎靡，毛皮無光澤，反應遲鈍。大豆皂甙給藥組：大鼠體重、精神狀態、毛皮光澤和反應度較對照組差，但明顯好于糖尿病組。

2.2 大鼠心肌組織酶活力的變化檢測 檢測心肌組織可見GOT、GPT、GLDH、ICDH、CK值在對照組、大豆皂甙給藥組和糖尿病模型組呈遞減趨勢（P＜0.01），LDH、HBDH、LAP、AKP在組間無顯著性差異（P＞0.01）。見表1。

表1 各組心肌組織各指標的比較（n＝10，，U／g）

表1 各組心肌組織各指標的比較（n＝10，，U／g）

＊P＜0.01compared with control group；＃P＜0.01compared with ss treatment group

Group Control Diabetic model ss treatment GOT 46.32±3.14 20.19±2.85＃ 32.47±5.31＊GPT 8.62±1.74 4.31±1.28＃ 6.13±2.08＊LDH 348.23±4.86 320.17±5.46 314.52±4.29 HBDH 287.19±2.37 293.44±3.56 290.37±2.95 LAP 0.72±0.08 0.69±0.11 0.67±0.14 GLDH 3.45±0.98 1.77±0.48＃ 1.41±0.72＊ICDH 28.26±1.38 11.47±2.31＃ 20.13±1.55＊CK 569.75±4.39 328.71±3.22＃ 526.93±4.76 AKP 1.34±0.07 1.28±0.13 1.31±0.08

2.3 大鼠肝臟組織酶活力的變化檢測 檢測肝組織糖尿病模型組與對照組、大豆皂甙給藥組比較GOT、GPT顯著升高（P＜0.01），對照組與大豆皂甙給藥組無顯著差異（P＞0.01）；大豆皂甙給藥組與對照組、糖尿病模型組比較LDH、HBDH、LAP和ICDH明顯降低（P＜0.01），對照組與糖尿病模型組無顯著差異（P＞0.01）；GLDH、CK、AKP在組間無顯著性差異（P＞0.01）。見表2。

表2 各組肝臟組織各指標的比較（n＝10，，U／g）

表2 各組肝臟組織各指標的比較（n＝10，，U／g）

＊P ＜0.01compared with Diabetic model group；＃P ＜0.01 compared with ss treatment group

Group Control Diabetic model ss treatment GOT 70.36±2.43＊ 121.18±3.91 71.28±2.39＊GPT 65.71±3.65＊ 135.74±2.58 71.69±3.17＊LDH 452.15±5.63＃ 446.92±5.81＃ 357.13±6.21 HBDH 172.34±4.19＃ 178.81±3.67＃ 127.36±5.22 LAP 0.62±0.11＃ 0.58±0.13＃ 0.36±0.09 GLDH 10.17±0.86 9.65±0.34 9.32±0.87 ICDH 33.38±1.06＃ 31.42±2.07＃ 22.09±1.31 CK 12.36±2.51 11.09±1.83 13.09±2.59 AKP 0.33±0.01 0.37±0.04 0.31±0.03

2.4 大鼠腎組織酶活力的變化檢測 檢測腎組織可見GOT、LAP、ICDH、CK值在對照組、大豆皂甙給藥組和糖尿病模型組呈遞減趨勢（P＜0.01），GPT、GLDH、LDH、HBDH、AKP在組間無顯著性差異（P＞0.01）。見表3。

表3 各組腎臟組織各指標的比較（n＝10，，U／g）

表3 各組腎臟組織各指標的比較（n＝10，，U／g）

＊P＜0.01compared with control group；＃P＜0.01compared with ss treatment group

Group Control Diabetic model ss treatment GOT 21.35±2.35 6.58±1.16＃ 12.26±1.74＊GPT 2.46±0.37 2.35±0.61 2.42±0.53 LDH 95.34±3.21 89.35±2.41 98.26±3.54 HBDH 115.31±1.12 108.34±1.68 100.86±3.52 LAP 18.89±1.67 11.26±2.48＃ 13.19±1.56＊GLDH 12.39±2.15 11.88±2.24 12.05±3.01 ICDH 13.56±1.82 8.53±1.39＊ 8.11±2.08＊CK 23.83±2.47 13.25±2.17＃ 15.38±1.61＊AKP 70.15±2.36 67.27±3.14 68.81±2.73

3 討論

大豆皂甙有降血脂、抗氧化、抑制腫瘤、抗血栓、抗病毒、免疫調節、減肥、調節糖代謝等多種生物活性［5－8］。以往研究還表明大豆皂甙具有降血糖及促進胰島素分泌的作用［9］。本實驗在這些研究的基礎上進一步研究大豆皂甙對糖尿病大鼠心、肝和腎組織細胞酶活性的變化，觀察大豆皂甙對糖尿病時心、肝和腎的損傷具有一定的保護作用。糖尿病時它的繼發損傷多見于心、腎，而肝臟也是它的累及器官，主要是因為它們與多種酶的合成有關［10］。本實驗所檢測的九種酶：GOT（谷草轉氨酶）、GPT（谷丙轉氨酶）、GLDH（谷氨酸脫氫酶）、ICDH（異檸檬酸脫氫酶）、CK（細胞角蛋白）、LDH（乳酸脫氫酶）、HBDH（羥丁酸脫氫酶）、LAP（肽水解酶）、AKP（磷酸單酯水解酶）都主要存在于心、肝、腎組織中。通過對心肌組織的檢測可見GOT、GPT、GLDH、ICDH、CK值在對照組、大豆皂甙給藥組和糖尿病模型組呈遞減趨勢（P＜0.01），LDH、HBDH、LAP、AKP在組間無顯著性差異（P＞0.01），說明大豆皂甙能調節糖尿病大鼠心肌組織中GOT、GPT、GLDH、ICDH、CK酶的代謝而對LDH、HBDH、LAP、AKP沒有顯著作用（P＞0.01）；通過對肝組織的檢測可見糖尿病模型組與對照組、大豆皂甙給藥組比較GOT、GPT顯著升高（P＜0.01），對照組與大豆皂甙給藥組無顯著差異（P＞0.01），大豆皂甙給藥組與對照組、糖尿病模型組比較LDH、HBDH、LAP和ICDH明顯降低（P＜0.01），對照組與糖尿病模型組無顯著差異（P＞0.01），GLDH、CK、AKP在組間無顯著性差異（P＞0.01），說明大豆皂甙能調節糖尿病大鼠肝組織中GOT、GPT、LDH、HBDH、LAP、ICDH、CK酶的代謝而對GLDH、AKP沒有顯著作用（P＞0.01）；通過對腎組織的檢測可見GOT、LAP、ICDH、CK值在對照組、大豆皂甙給藥組和糖尿病模型組呈遞減趨勢（P＜0.01），GPT、GLDH、LDH、HBDH、AKP在組間無顯著性差異（P＞0.01），說明大豆皂甙能調節糖尿病大鼠腎組織中GOT、LAP、ICDH、CK酶的代謝而對 GPT、GLDH、LDH、HBDH、AKP沒有顯著作用（P＞0.01）。總之，大豆皂甙能夠調節糖尿病大鼠心、肝和腎組織的細胞酶代謝，并對糖尿病時心、肝和腎的損傷具有一定的保護作用，其具體的調節機制、保護機理及各組織之間的調節是否具有相關性還有待于進一步的研究。

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