應用磁球凝固法建立適合未成年人凝血常規指標參考區間的探討

孫 濤，艾 清＊，袁寶山，邱 俊

（1.吉林大學第一醫院二部 檢驗科，吉林 長春130031；2.空軍航空大學門診部）

凝血常規檢測是反應內源性與外源性凝血途徑障礙的主要篩選試驗，是臨床出血和血栓性疾病常用的檢驗項目，主要包括PT、APTT、Fib、TT，但由于市場上血凝儀使用品牌眾多，各廠家檢測原理也不盡相同，所用參考區間多針對于成年人，而對適合未成年人的參考區間的探討鮮有研究，本文旨在通過回顧性分析探討應用磁球凝固法建立適合未成年人凝血常規檢測的參考區間。

1 對象與方法

1.1 檢測對象 所有檢測對象均為我院2010年11月至2011年2月的間收治的非感染性的擇期手術未成年人（0－16歲）共計469例，其中男性289例（嬰幼兒組0－2周歲56例，學齡前組3－6周歲119例，學齡組7－12周歲71例，青春期組13－16周歲43例），女性180例（嬰幼兒組0－2周歲29例，學齡前組3－6周歲74例，學齡組7－12周歲58例，青春期組13－16周歲19例），所有未成年人無出血癥狀及血栓性疾病家族史，體格檢查正常，白細胞計數及分類正常，近2周內未服用過抗凝及抗血小板藥物；成人對照組采用我院體檢中心體檢正常人群共計970例，其中男573例，女397例，年齡均在18－55周歲間，體檢無肝、腎功能異常，無血栓性疾病的人群。

1.2 試驗儀器 采用法國stago公司生產的STA－Evolution全自動血凝儀，磁珠凝固法，專用配套試劑、配套耗材、配套質控品，檢測過程完全按照sop文件操作執行，并在批檢測前確保室內質控在±2SD范圍內。

1.3 試驗方法 所有患者均為手術前常規采集枸櫞酸鈉抗凝靜脈血，采血量為1.8ml（采血量：抗凝劑＝9：1），采血管為奧地利GREINER公司生產VACUEETTE品牌，采集完畢后立即顛倒混勻8次，然后以1 750g離心力離心10分鐘，分離血漿，并于30min內上機檢測。

1.4 統計學處理 計量資料采用95%可信區間確定各組參考范圍，采用SPSS17.0統計學軟件進行統計學分析，多組間均數比較采用單因素方差分析，以P＜0.01為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 將469例未成年人及970例成年人PT、APTT、Fib、TT檢測結果導入SPSS17.0統計學軟件，計算均值及標準差，然后以均值±1.96倍標準差確定各項目參考范圍，見表1。

表1 469例未成年人及970例成年人凝血常規參考區間比較

2.2 統計學分析 將所有檢測結果導入到SPSS17.0統計學軟件進行多組間單因素方差分析，嬰幼兒組、學齡前組、學齡組、青春期組男孩與女孩間PT、APTT、Fib、TT結果分布差異無統計學意義（P值均＞0.05）；成年男、女間各項指標差異無統計學意義（P＞0.05）。各男、女未成年組與男、女成年組PT、APTT、TT、Fib P值比較詳見表2。

表2 未成年男、女各年齡組與成年男、女組PT、APTT、TT、Fib比較的P值

3 討論

生物參考區間是臨床判斷健康與否的標準，實驗室必須保證給臨床提供的參考區間正確、適用，否則會導致誤診，甚至錯誤的治療。因此，實驗室建立參考區間工作意義重大［1］，從上述實驗結果中可以看出PT、TT參考區間男、女未成年組與成年組無明顯統計學差異（P＞0.05），且兒童期的PT、TT水平已接近于成人。APTT參考區間各年齡組未成年人男、女間無明顯統計學差異（P＞0.05）；但嬰幼兒組、學齡前組、學齡組男、女均與成年組間有明顯統計學差異（P＜0.01），且男性青春期組與成年組有明顯統計學差異（P＜0.01），而女性青春期組與成年組無明顯統計學差異（P＞0.05），同時結果表明男、女各未成年組參考區間均高于成人組。Fib參考區間未成年各年齡組男、女間無明顯統計學差異（P＞0.05），但嬰幼兒組、學齡前組男、女均與成人組有明顯統計學差異（P＜0.01），且男、女各未成年組參考區間均低于成人組，并隨著年齡的增長呈上升趨勢。

未成年兒童APTT參考區間高于成年人是由于其維生素K依賴的凝血因子和接觸系統因子水平較低［2］，以及較高的紅細胞比容致血漿相對于抗凝劑的比例不足［3］導致，本研究顯示，嬰幼兒期、學齡前期、學齡期、青春期間的男孩APTT均值水平已高于男性成人對照組，嬰幼兒期、學齡前期、學齡期女孩APTT均值水平已高于女性成人對照組，故男性成人的APTT參考區間已不適用于小于16歲的男性兒童，女性成人的APTT參考區間已不適用于小于12歲的女性兒童。

Fib在肝臟合成，主要分布在血漿，也存在于血小板和巨核細胞［4］。從本實驗中可以看出Fib水平隨著年齡的增長而增高，嬰幼兒期、學齡前期、學齡期、青春期的Fib水平均低于正常成年人，這與溫奕欣［5］研究結果基本一致，具體原因可能與胎兒型Fib向成人型Fib轉換有關［3］，故成人的Fib參考區間已不適用于小于6歲的兒童。

通過上述實驗表明，同年齡段的男性兒童與女性兒童間凝血常規變化差異不大，這表明PT、APTT、Fib、TT參考區間分布與性別無關，可以適用同一參考區間。目前許多實驗室使用的凝血常規參考區間多參考葉應撫［6］或由儀器廠家所提供，且大多參考區間只針對于健康成年人，對于未成年兒童則未作過多說明，由于不同地區的儀器、試劑對凝血常規檢測結果也存在一定差異，所以更不能搬用其他地區的參考區間。因此，每個實驗室應建立適合于自己實驗室、儀器、年齡的凝血常規參考區間。

［1］李啟亮，李玉清，靳劍云.北京地區健康兒童PT和APTT正常參考范圍的探討［J］.現代檢驗醫學雜志，2011，3（2）：84.

［2］Andrew M，Paes B，Milner R，et al.Development of the human coagulation system in the Full－tem infant［J］.Blood，1987，70：165.

［3］李建新，徐安平，賴 馨，等.兒童年齡相關的常規凝血功能測指標參考區間的調查［J］.中華檢驗醫學雜志，2010，12（12）：1193.

［4］徐 剛，劉秋菊，章 文，等.兒童纖維蛋白原兩種測定方法的比較［J］.國際檢驗醫學雜志，2008，6（6）：51.

［5］溫奕欣，洪曉鵬.252例健康人凝血參數參考范圍調查分析［J］.臨床醫藥實踐雜志，2005，5（5）：379.

［6］葉應撫，王毓三，申子瑜，等.全國臨床檢驗操作規程［M］.第3版.東南大學出版社，2006：210－211.