清胰活血湯對急性壞死性胰腺炎并多器官功能不全大鼠腹腔內壓的影響

李偉冬 賈林 馬軍 方建志 邱嘉華 黃耀星 潘錦瑤

清胰活血湯對急性壞死性胰腺炎并多器官功能不全大鼠腹腔內壓的影響

李偉冬 賈林 馬軍 方建志 邱嘉華 黃耀星 潘錦瑤

中醫學認為重癥急性胰腺炎(SAP)為腑氣不通、熱毒內蘊、血流淤阻所致。治法以理氣通腑和通里攻下、清熱解毒為主。大黃單劑及復方制劑清胰湯、大承氣湯等對SAP療效已獲公認[1-2]。本研究應用自擬的清胰活血湯治療急性壞死性胰腺炎(ANP)并多器官功能不全(MODS)大鼠，觀察其對腹腔內壓增高的療效，為臨床治療奠定實驗基礎。

一、材料與方法

1．實驗動物分組及中藥組方：健康SD大鼠30只，體重180～200 g，SPF級，購自廣州中醫藥大學實驗動物中心[許可證：SCXK(粵)2008-0020]。按數字表法隨機分為ANP組、大承氣湯組和清胰活血湯組，每組10只。采用胰管內逆行注射4.5%牛磺膽酸鈉(Sigma公司)1 ml/kg體重的方法誘導大鼠ANP并MODS模型[3]。大承氣湯組和清胰活血湯組分別在建模前4 h，建模后3、9 h給予大承氣湯、清胰活血湯20 ml/kg體重灌胃；ANP組給予等量生理鹽水灌胃。清胰活血湯由生大黃(后下)、黃連、黃岑、丹參、厚樸、柴胡各15 g熬制而成。大承氣湯由生大黃(12 g后下)、厚樸(15 g)、枳實(12 g)、芒硝(9 g后下)熬制而成。

2．腹腔內壓：測壓設備為BL-420E+生物機能實驗系統(廣州醫學院機能實驗室提供)。制模后24 h，大鼠麻醉后采用平臥位，左下腹穿刺，冠脈擴張球囊導管內充注生理鹽水，將連接球囊導管的硬膜外導管接頭的另一端連接壓力換能器，利用壓力換能器與生物機能實驗儀，以腋中線為“0”點，大鼠呼氣末時換能器所感受的壓力就是球囊內壓和腹內壓[4]。

3．腹水量：測壓后處死大鼠，觀察腹水的顏色，用干棉球吸盡腹水，并稱重。腹水量=濕棉球的重量-干棉球的重量。

4．血清淀粉酶、TNF-α檢測：血清淀粉酶采用酶聯耦合法測定。TNF-α采用ELISA法，試劑盒購自廣州幫能公司。

5．胰腺組織學檢查：取胰腺組織，行病理學檢查，由專一病理醫師閱片，并按照Schmidt等[5]標準進行評分。

二、結果

1．大鼠腹水量及腹內壓的變化：ANP組大鼠腹水量為(10.10±2.14)g,呈血紅色或暗紅色；大承氣湯組腹水量為(6.75±1.10)g，呈淡黃偏紅色；清胰活血湯組腹水量為(4.73±0.80)g，呈淡黃偏紅色。各組間差異均有統計學意義(P值均<0.05)。ANP組、大承氣湯組、清胰活血湯組大鼠的腹內壓分別為(11.8±1.5)、(6.2±0.9)、(4.11±0.8)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)，各組間差異也有統計學意義(P值均<0.05)。

2．大鼠血清TNF-α、淀粉酶水平的變化：ANP組、大承氣湯組、清胰活血湯組大鼠血清TNF-α水平分別為(116.19±15.03)、(102.70±6.32)、(84.90±4.81)μg/L；血清淀粉酶水平為(4483±906)、(2491±904)、(1402±325)U/L，各組間差異均有統計學意義(P值均<0.05)。

3．大鼠胰腺的病理改變：ANP組胰腺病理間質廣泛水腫，胰腺腺泡壞死，大量出血及血管周圍大量炎癥細胞浸潤；大承氣湯組、清胰活血湯組大鼠胰腺的病變均有不同程度的減輕，尤以清胰活血湯組明顯(圖1)。ANP組、大承氣湯組、清胰活血湯組的胰腺病理評分分別為(13.8±0.78)、(8.8±0.6)、(6.1±0.4)分，各組間差異均有統計學意義(P值均<0.05)。

圖1ANP組(a)、大承氣湯組(b)、清胰活血湯組(c)胰腺病理改變(×200)

討論SAP可出現腹內壓增高，且隨著SAP病情的發展而加重，是SAP嚴重程度的重要指標之一[6]。我們前期研究顯示，ANP大鼠的腹水量于制模后1 h開始增加，并出現明顯胃腸脹氣；3 h后腹內壓進行性升高，24 h時達到峰值。因6 h時點為炎癥介質反應高峰，表明ANP大鼠進行性腹內高壓是炎癥反應的后續效應[6]。因此，及時有效干預炎癥反應可抑制腹內壓進行性增高。TNF-α在所有炎癥介質中處于始動地位，成為抗炎癥介質的重要靶點。

中西醫結合治療在SAP的抗炎、胃腸功能調理和改善微循環等領域取得重大進展，大黃單劑及清胰湯、大承氣湯等復方制劑亦在臨床較廣泛。本研究配置的清胰活血湯，除生大黃外，保留了清胰湯的柴胡(具有降低炎癥因子釋放、減少白細胞游走和改善微血管通透性的作用)、黃岑(雙重調節平滑肌)、黃連(抗菌抗炎)以及大承氣湯的厚樸等有效成分，還添加了丹參(擴張外周血管，改善胰腺微循環，并能抗凝血和抑制血小板凝聚，防治缺血后的再灌注損傷和強力消除自由基，對腸黏膜屏障功能也具有較好的保護作用[7])，旨在從抑制胰酶和炎癥因子釋放、改善胃腸功能和胰腺微循環等多靶點全方位治療SAP。本結果顯示，清胰活血湯確在降低炎癥介質TNF-α和血清淀粉酶水平、減少腹腔滲出和降低腹腔內壓、顯著改善胰腺病理損害等方面均明顯優于大承氣湯。究其效果一方面與柴胡、黃岑和黃連具有廣譜抗菌消炎，鎮痛退熱，抑制TNF-α釋放和減輕炎癥有關；另一方面與丹參和生大黃配伍促進排出腸內毒素和積氣積液，減輕胰腺及其他臟器水腫，緩解IAP增高以及改善胰腺微循環，減輕再灌注造成的“二次損傷”等機制密切相關。

[1] Zhang MJ, Zhang GL, Yuan WB, et al. Treatment of abdominal compartment syndrome in severe acute pancreatitis patients with traditional Chinese medicine. World J Gastroenterol, 2008,14:3574-3578.

[2] Deng LH, Xiang DK, Xue P, et al. Effects of Chai-Qin-Cheng-Qi Decoction on cefotaxime in rats with acute necrotizing pancreatitis. World J Gastroenterol, 2009,15:4439-4443.

[3] 邱嘉華,陳奕金,賈林,等. 牛磺膽酸鈉誘導急性壞死性胰腺炎大鼠模型的理想濃度. 中華胰腺病雜志, 2010,10:120-122.

[4] 賈林,陳奕金,黃耀星,等. 重癥急性胰腺炎大鼠模型腹腔內壓和血TNF-α的時相改變及規律. 中華胰腺病雜志，2010,10:106-108.

[5] Schmidt J,Rattner DW,Lewandrowski K,et al.A better model of acute pancreatitis for evaluating therapy.Ann Surg,1992,215:44-56．

[6] Rosas JM,Soto SN,Aracil JS,et al.Intra-abdominal pressure as a marker of severity in acute pancreatitis.Surgery,2007,141:173-178.

[7] Xiping Z, Yan P, Xinmei H, et al. Effects of dexamethasone and Salvia miltiorrhizae on the small intestine and immune organs of rats with severe acute pancreatitis. Inflammation, 2010,33:259-266.

10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2012.02.019

廣東省中醫藥局科研課題(008006)、廣州市中西醫結合科研課題(2008A02)

510180 廣州，廣州醫學院附屬廣州市第一人民醫院消化內科(李偉冬、賈林、邱嘉華、黃耀星)，中醫科(馬軍、方建志、潘錦瑤)

賈林，Email:jialin@medmail.com.cn

2011-02-23)

(本文編輯：屠振興)