趨化因子CCL20及其受體CCR6在胰腺癌組織中的表達(dá)及意義

初禎 陳少夫

趨化因子CCL20及其受體CCR6在胰腺癌組織中的表達(dá)及意義

初禎 陳少夫

越來(lái)越多的數(shù)據(jù)表明，趨化因子及其受體在胰腺癌[1-3]的腫瘤生物學(xué)中起著重要作用。本研究檢測(cè)趨化因子CCL20及其受體CCR6在胰腺癌中的表達(dá)，分析兩者的相關(guān)性，探討其在胰腺癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。

一、材料與方法

1．材料：收集42例中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院病理科2005年至2008年間診斷為胰腺導(dǎo)管腺癌(PADC)的組織蠟塊。同時(shí)選取十二指腸腫物切除術(shù)所獲得的10例正常胰腺組織為對(duì)照。

2．方法：采用快捷免疫組化MaxVision兩步法檢測(cè)CCL20及CCR6的表達(dá)。兔抗人CCL20和CCR6多抗購(gòu)自北京博奧森生物技術(shù)有限公司，工作濃度1∶100。即用型快捷免疫組化MaxVision試劑盒(鼠/兔)及Max007TM原位微信號(hào)(DAB)放大試劑盒購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司，按說(shuō)明書(shū)操作。胞質(zhì)或胞膜中出現(xiàn)黃色或褐色顆粒者為陽(yáng)性。每張切片隨機(jī)選取4個(gè)高倍視野，分別根據(jù)染色強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞比例進(jìn)行評(píng)分。染色強(qiáng)度：無(wú)著色0分，淡黃色1分，黃色2分，棕黃色或褐色3分；陽(yáng)性細(xì)胞比例：≤5% 0分， 5%～25% 1分，25%～50% 2分，50%～75% 3分，>75% 4分。兩者乘積0為陰性，≥1分為陽(yáng)性。

3．統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS13.0軟件分析。陽(yáng)性率的比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性的分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

二、結(jié)果

1．CCL20和CCR6陽(yáng)性表達(dá)率：CCL20主要表達(dá)于腫瘤細(xì)胞的胞質(zhì)或胞膜中(圖1)，正常細(xì)胞的胰島或胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞亦有少量表達(dá)。42例胰腺癌組織中，30例(71.4%)表達(dá)陽(yáng)性，10例正常胰腺組織中，2例(20%)表達(dá)陽(yáng)性，兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CCR6主要表達(dá)于腫瘤細(xì)胞的胞質(zhì)或胞膜中，42例胰腺癌組織中，32例(76.2%)表達(dá)陽(yáng)性，10例正常胰腺組織中，3例(30%)表達(dá)陽(yáng)性，兩者差異亦具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。胰腺癌組織中CCL20與CCR6表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.352，P=0.022)。

2．CCL20和CCR6表達(dá)與胰腺癌臨床病理特征的關(guān)系：CCL20蛋白表達(dá)與腫瘤分化程度相關(guān)(P<0.05)，與年齡、性別、腫瘤臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等無(wú)相關(guān)性；CCR6的表達(dá)與腫瘤病理特征均無(wú)相關(guān)性(表1)。

圖1胰腺癌組織CCL20(a)、CCR6(b)的表達(dá)(免疫組化 ×400)

表1CCL20和CCR6表達(dá)與胰腺癌臨床病理特征的關(guān)系

討論趨化因子是一族具有趨化作用的細(xì)胞因子，分子量較小，對(duì)白細(xì)胞遷移起關(guān)鍵作用，通過(guò)與靶細(xì)胞膜上相應(yīng)的趨化因子受體結(jié)合發(fā)揮作用[4-5]。趨化因子受體屬G蛋白耦聯(lián)的7次跨膜受體超家族，其N末端與配體結(jié)合，胞內(nèi)區(qū)與G蛋白耦聯(lián)，C末端含絲氨酸/蘇氨酸，可磷酸化，參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。趨化因子與其受體結(jié)合后在調(diào)節(jié)白細(xì)胞定向移動(dòng)、細(xì)胞生長(zhǎng)、發(fā)育、分化、凋亡、組織損傷、淋巴細(xì)胞歸巢、免疫應(yīng)答、HIV感染和血管生成等眾多生理、病理過(guò)程中起著非常重要的作用 。近來(lái)，越來(lái)越多的證據(jù)表明，趨化因子與腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。腫瘤細(xì)胞分泌的趨化因子與相應(yīng)受體結(jié)合后能促進(jìn)癌間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、腫瘤血管生成、基質(zhì)蛋白降解等，但其確切機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。

目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)幾十種趨化因子，根據(jù)半胱氨酸殘基位置的不同，趨化因子分為4個(gè)亞族，即C、CC、CXC與CX3C，相應(yīng)的受體稱為XCR、CCR、CXCR與CX3C[6-7]。CCL20是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一種CC亞族的趨化因子，它在白血病、淋巴瘤、黑色素瘤、肝癌、前列腺癌、大腸癌、肺癌及口腔鱗狀細(xì)胞癌[8-11]等癌組織中高表達(dá)。Kleeff等[12]報(bào)道，胰腺癌組織存在CC類趨化因子CCL20/Mip-3α及其受體CCR6 mRNA高表達(dá)。本研究結(jié)果顯示，CCL20及CCR6在胰腺癌中均高表達(dá)，同時(shí)CCL20表達(dá)與胰腺癌分化程度有關(guān)，與Kleeff等結(jié)果一致，但其作用機(jī)制有待深入研究。

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10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2012.02.022

110004 沈陽(yáng)，中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院消化內(nèi)科

陳少夫，Email:csf196211@yahoo.com.cn

2011-05-03)

(本文編輯：呂芳萍)