原發(fā)性腎小球疾病患者花生四烯酸和腫瘤壞死因子α的變化*

陶 磊， 傅淑霞

(河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院腎內(nèi)科，河北 石家莊 050000)

1000-4718(2012)07-1338-03

2011-08-10

2012-04-09

河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院院級(jí)課題資助項(xiàng)目(No.2h0200918)

△通訊作者 Tel:0311-66002943;E-mail:fushuxia99@163.com

原發(fā)性腎小球疾病患者花生四烯酸和腫瘤壞死因子α的變化*

陶 磊， 傅淑霞△

(河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院腎內(nèi)科，河北 石家莊 050000)

原發(fā)性腎小球疾?。?花生四烯酸類； 腫瘤壞死因子； 氧化性應(yīng)激

花生四烯酸(arachidonic acid, AA)和腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α，TNF-α)是2種與氧化應(yīng)激關(guān)系密切的炎癥因子，AA和TNF-α都能促進(jìn)氧化應(yīng)激[1-4]，AA還能抑制氧化應(yīng)激[5-6]，然而其對(duì)原發(fā)性腎小球疾病患者氧化應(yīng)激的影響卻尚不清楚。丙二醛(malondialdehyde，MDA)是氧化應(yīng)激的重要標(biāo)志物之一，本文通過(guò)對(duì)AA、TNF-α和MDA的研究來(lái)探討原發(fā)性腎小球疾病患者體內(nèi)氧化應(yīng)激的可能影響因素及變化情況。同時(shí)AA和TNF-α作為2種炎癥因子，需排除炎癥對(duì)其變化的影響，于是我們通過(guò)測(cè)定高敏C反應(yīng)蛋白(high-sensitive C-reactive protein, hs-CRP)的濃度，排除炎癥的影響。

材 料 和 方 法

1對(duì)象

對(duì)象選自2009年9月～2010年7月在本科住院經(jīng)臨床和腎活檢確診的原發(fā)性腎小球疾病患者55例，根據(jù)CKD-EPI公式[7]評(píng)估腎小球?yàn)V過(guò)率(glomerular filtration rate，GFR),順序入組慢性腎臟病(chronic kidney disease, CKD)1、2期19例，CKD3、4期14例，CKD5期22例，其中男36例，女19例。入組標(biāo)準(zhǔn)：所有研究對(duì)象均沒(méi)有感染；入組前1個(gè)月未使用過(guò)糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑、非甾體類抗炎藥、靜脈鐵劑及螺內(nèi)酯等藥物；排除惡性腫瘤、全身性疾病、肝硬化、肝炎、嚴(yán)重的心血管疾病及免疫系統(tǒng)疾病。

2方法

研究對(duì)象早晨空腹抽血3 mL，收集于一次性試管中，置于室溫靜置2 h，分離血清，裝入EP管中，保存于-70℃冰箱內(nèi)待測(cè)。用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(ELISA)分別測(cè)定血清游離AA、TNF-α、MDA及hs-CRP的濃度。測(cè)定4種因子的ELISA試劑盒均購(gòu)于上海西塘生物科技有限公司。

3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

結(jié) 果

1一般臨床資料比較

CKD1、2期中男性患者所占比例為79%，CKD3、4期為64%，CKD5期為59%。各組之間的年齡和身體質(zhì)量指數(shù)(body mass index,BMI)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。CKD1、2期中包括：腎小球微小病變8例，IgA腎病6例，膜性腎病2例，局灶性節(jié)段性腎小球硬化2例，增生硬化性腎小球腎炎1例。CKD3、4期包括：IgA腎病12例，硬化性腎小球腎炎2例。CKD5期中包括：7例曾行腎穿，其中IgA腎病5例，硬化性腎小球腎炎2例；15例初診即為CKD5期，未腎穿，并排除繼發(fā)性原因。

2不同組AA、TNF-α、MDA和hs-CRP的比較

CKD1、2期和3、4期患者之間AA和MDA差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，CKD5期患者的AA水平明顯高于其它各組(P<0.05)，而MDA水平明顯低于其它各組(P<0.05)。CKD3、4期和CKD5期之間的TNF-α水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但都明顯低于CKD1、2期(P<0.05)。各組之間的hs-CRP水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見(jiàn)表1。

表1 患者血清AA、TNF-α、MDA和hs-CRP含量的比較

*P<0.05vsCKD1,2;#P<0.05vsCKD3,4;△P<0.05vsCKD5.

3相關(guān)性和回歸分析

表2 AA和TNF-α與MDA相關(guān)性分析

討 論

原發(fā)性腎小球疾病患者體內(nèi)存在氧化應(yīng)激狀態(tài)已被證實(shí)，然而對(duì)于氧化應(yīng)激的影響因素以及在不同CKD分期之間的變化情況卻尚不清楚。在本研究中我們發(fā)現(xiàn)，AA與MDA呈直線負(fù)相關(guān)，TNF-α與MDA呈直線正相關(guān)，MDA作為氧化應(yīng)激的公認(rèn)標(biāo)志物之一，說(shuō)明AA和TNF-α與氧化應(yīng)激具有相關(guān)性，為進(jìn)一步證實(shí)AA和TNF-α對(duì)氧化應(yīng)激的影響，我們進(jìn)行了多元線性回歸分析，結(jié)果表明MDA的變化與AA和TNF-α有線性回歸關(guān)系，其中與AA呈負(fù)相關(guān)，與TNF-α呈正相關(guān)，從而證明AA和TNF-α是影響原發(fā)性腎小球疾病患者氧化應(yīng)激的重要因素。并且AA具有抑制氧化應(yīng)激的作用，這與一些實(shí)驗(yàn)中證明的AA能夠通過(guò)增強(qiáng)抗氧化酶活性[5]，抑制氧化應(yīng)激；以及通過(guò)阻止反向電子轉(zhuǎn)運(yùn)[8]，抑制NADPH氧化酶的活性[9]，抑制一氧化氮合酶[6]，減少ROS的生成，從而抑制氧化應(yīng)激的結(jié)論相一致。多元線性回歸方程示TNF-α具有促氧化應(yīng)激的作用，這與在其它疾病或模型中已經(jīng)證明的TNF-α通過(guò)增加活性氧的產(chǎn)生和降低抗氧化酶的活性[4,10-12]，誘導(dǎo)氧化應(yīng)激產(chǎn)生的結(jié)論相一致。

在研究中我們還發(fā)現(xiàn)，CKD5期MDA顯著低于其余各期，這可能與AA和TNF-α的含量有密切關(guān)系，因?yàn)镃KD5期AA的含量最高，而TNF-α含量最低，這也進(jìn)一步證明AA的抗氧化和TNF-α的促氧化作用。雖然目前很多實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證明了慢性腎臟病患者體內(nèi)存在氧化應(yīng)激狀態(tài)，然而絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)集中在對(duì)患者與正常人進(jìn)行比較得到的結(jié)論，而對(duì)患者不同分期間的氧化應(yīng)激變化缺乏研究[13-16]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)分組比較證明了原發(fā)性腎小球疾病患者不同分期間氧化應(yīng)激的變化情況。

AA和TNF-α作為炎癥因子其含量的變化必然受到體內(nèi)炎癥的影響，因此為了更好地分析它們與氧化應(yīng)激的關(guān)系，我們除了嚴(yán)格排除感染病人入組外，還選取hs-CRP作為衡量體內(nèi)炎癥水平的重要標(biāo)志物，以排除炎癥對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。結(jié)果顯示不同CKD分期患者間的炎癥水平基本相同，從而也排除了炎癥對(duì)實(shí)驗(yàn)可能的干擾。

綜上所述，AA和TNF-α是影響原發(fā)性腎小球疾病患者氧化應(yīng)激的重要因素，AA具有抑制氧化應(yīng)激的作用，TNF-α具有促進(jìn)氧化應(yīng)激作用。

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ChangesofarachidonicacidandTNF-αinprimaryglomerulardisease

TAO Lei, FU Shu-xia

(RenalDivision,TheSecondHospitalofHebeiMedicalUniversity,Shijiazhuang050000,China.E-mail:fushuxia99@163.com)

Primary glomerular disease; Arachidonic Acids; Tumor necrosis factor; Oxidative stress

R363

A

10.3969/j.issn.1000-4718.2012.07.036