捕撈脅迫對半滑舌鰨血液生化指標的影響

孫學亮 (天津農學院水產科學系，天津市水產生態及養殖重點實驗室，天津 300384)

楊樹元 (天津市西青區楊柳青鎮農業服務中心，天津 300380)

陳成勛,王慶奎 (天津農學院水產科學系，天津市水產生態及養殖重點實驗室，天津 300384)

于學全,胡金城 (天津海發珍品實業發展有限公司，天津 300450)

邢克智 (天津農學院水產科學系，天津市水產生態及養殖重點實驗室，天津 300384)

捕撈脅迫對半滑舌鰨血液生化指標的影響

孫學亮 (天津農學院水產科學系，天津市水產生態及養殖重點實驗室，天津 300384)

楊樹元 (天津市西青區楊柳青鎮農業服務中心，天津 300380)

陳成勛,王慶奎 (天津農學院水產科學系，天津市水產生態及養殖重點實驗室，天津 300384)

于學全,胡金城 (天津海發珍品實業發展有限公司，天津 300450)

邢克智 (天津農學院水產科學系，天津市水產生態及養殖重點實驗室，天津 300384)

分別在捕撈脅迫前(即0h)和捕撈脅迫后的4、12、24、48、96h抽血，測定血漿中的生化指標，研究捕撈脅迫對半滑舌鰨(CynoglossussemilaevisGüntuer，(41.08±0.52)g)部分血液指標的影響。結果表明，脅迫后超氧化物歧化酶(SOD)活力下降，24h恢復為脅迫前水平；過氧化氫酶(CAT)活力脅迫后升高，24h恢復為脅迫前水平；還原型谷胱甘肽(GSH)含量在脅迫后先升高后下降，96h恢復為脅迫前水平；丙二醛(MDA)含量在脅迫后升高，48h恢復脅迫前水平；溶菌酶(LZM)活力在脅迫后4h開始下降，并維持較低水平；補體C3、C4含量脅迫后4h降低，隨后恢復至脅迫前水平；膽固醇(CHO)、葡萄糖(Glu)、總蛋白(TP)、白蛋白(Alb)含量均在脅迫后12h升高并且一直維持在較高水平；丙氨酸氨基轉移酶(ALT)和天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)含量在脅迫后4h升高，隨后恢復至脅迫前水平；甘油三酯(TG)沒有顯著變化。

捕撈脅迫；半滑舌鰨(CynoglossussemilaevisGüntuer)；血液生化指標

半滑舌鰨(Cynoglossussemilaevis)屬鰈形目鰨亞目舌鰨科舌鰨屬，俗稱龍利、鰨米，為我國名貴海水魚類。其生長速度快，適應性強，具有廣溫、廣鹽的特點，更具開發潛力。近幾年對半滑舌鰨的生理、生態、繁育發育生物學、種質資源、苗種生產及養殖技術等進行了系統研究，但在工廠化養殖過程中產生的環境脅迫卻未見報道。

環境脅迫是指環境對魚類所處的生存狀態產生的壓力，可以分為急性環境脅迫和慢性環境脅迫[1]。在魚類的養殖過程中，各種相關的脅迫因子會引發機體產生相應的應激反應，急性脅迫結果是打亂代謝平衡，使用于生長的能量轉移到適應外界環境的生理轉變中[2]，其中捕撈脅迫作為常見的一種急性脅迫在國外也有較多的報道。如匙吻鱘受到捕撈脅迫后，血漿皮質醇和乳酸鹽顯著升高，而血糖無顯著變化[3]；Bayunova等[4]報道捕撈和運輸脅迫造成俄羅斯鱘血漿皮質醇和睪酮水平均升高。本研究探討了捕撈脅迫對半滑舌鰨血液生化指標的影響，以期為集約化健康養殖技術的建立提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗所用半滑舌鰨取自天津市海發珍品實業發展有限公司養殖車間，平均體重為(41.08±0.52)g，體長為(14.15±0.05)cm，健康無病。

1.2 試驗方法

1.3 數據處理

數據均以平均值±標準差(Mean±SD)表示：采用SPSS13.0統計軟件進行單因素方差分析，并以最小顯著極差法(LSD)和Duncan法比較數據間差異顯著性。

2 結果與分析

2.1 捕撈脅迫對半滑舌鰨抗氧化指標的影響

圖1顯示捕撈脅迫下半滑舌鰨抗氧化指標的變化情況。脅迫后SOD活力呈先下降后上升的趨勢，脅迫后4、12h SOD活力顯著低于脅迫前水平(Plt;0.05)，24h恢復為脅迫前水平。CAT活力在脅迫后4h有所降低但無顯著性差異(Pgt;0.05)，脅迫后12h出現顯著性升高(Plt;0.05)，24h恢復為脅迫前水平。GSH含量在脅迫后4h呈顯著性升高(Plt;0.05)，隨后在12、24、48h顯著低于脅迫前水平(Plt;0.05)，96h恢復為脅迫前水平。MDA含量呈先升高后降低的趨勢，在脅迫后12、24h顯著高于對照水平，48h恢復為脅迫前水平。

圖1 捕撈脅迫下半滑舌鰨抗氧化指標的變化

2.2 捕撈脅迫對半滑舌鰨非特異性免疫指標的影響

圖2顯示捕撈脅迫下半滑舌鰨溶菌酶活力、補體C3、C4含量和白球比的變化情況。溶菌酶活力在脅迫后4～48h持續降低并顯著低于脅迫前水平(Plt;0.05)，雖然在脅迫后96h溶菌酶活力有所上高，但仍沒有恢復到脅迫前水平。補體C3含量脅迫后4h降低至最低并與對照呈顯著性差異(Plt;0.05)，12h恢復為脅迫前水平。補體C4含量在脅迫后4～24h出現顯著性降低(Plt;0.05)，48h恢復為脅迫前水平。白球比例在脅迫后96h顯著升高(Plt;0.05)。

圖2 捕撈脅迫下半滑舌鰨非特異性免疫指標的變化

2.3 捕撈脅迫對半滑舌鰨血液其他生化指標的影響

表1為捕撈脅迫下半滑舌鰨部分血液生化指標的變化情況。由表1可知，膽固醇、葡萄糖、總蛋白、白蛋白含量均在脅迫后12h出現顯著性升高并且一直維持在較高水平(Plt;0.05)。球蛋白含量在脅迫后48h顯著升高(Plt;0.05)，96h恢復為脅迫前水平。丙氨酸氨基轉移酶和天門冬氨酸氨基轉移酶含量在脅迫后4h后出現顯著升高(Plt;0.05)，丙氨酸氨基轉移酶含量在脅迫后12h恢復為脅迫前水平，天門冬氨酸氨基轉移酶含量在脅迫后48h恢復為脅迫前水平。甘油三酯含量雖有波動但沒有出現顯著變化(Pgt;0.05)。

表1 捕撈脅迫下半滑舌鰨血液生化指標的變化

3 討論與小結

3.1 捕撈脅迫對半滑舌鰨抗氧化指標的影響

GSH是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組成的含有巰基的天然三肽，作為真核細胞內普遍存在的小分子抗氧化劑，在消除機體內的氧自由基時起關鍵作用，是衡量機體抗氧化能力大小的重要因素。本研究結果顯示，GSH含量在脅迫后4h呈顯著性升高，隨后在12、24、48h顯著的低于對照水平，96h恢復為脅迫前水平。這可能是因為捕撈操作誘導了GSH的增加，隨著脂質過氧化作用的加強，機體受到損傷加劇，GSH通過其還原作用來對受損傷的組織和細胞進行修復的，導致GSH含量的下降。在試驗期間GSH含量出現較大波動，這說明了機體抗氧化系統的不穩定性。

3.2 捕撈脅迫對半滑舌鰨非特異性免疫指標的影響

魚類血清中包含多種免疫因子，其中溶菌酶和補體在抵御外來病原菌方面發揮著重要作用。在一定條件下，魚體血液中的溶菌酶可能是比皮質醇更可靠的應激信號，但其水平升高所持續的時間依脅迫的方法和強度而定[9]。王文博等[10]的研究表明，鯽魚受到振蕩脅迫后溶菌酶活性呈先上升然后出現平臺期最后緩慢下降的趨勢。Demers等[11]也發現振蕩可提高虹鱒(Oncorhynchusmykiss)血漿溶菌酶水平。而本研究卻發現半滑舌鰨血漿中溶菌酶活力在捕撈脅迫后4～48h持續降低，雖然在脅迫后96h溶菌酶活力升高，但仍未恢復至脅迫前水平，這可能與脅迫的方式和強度、受試魚體的種屬差異有關系，具體原因有待于進一步研究。

補體系統廣泛參與機體抗微生物防御反應和免疫調節,也可介導免疫病理的損傷性反應,是機體內具有重要生物學意義的效應系統和效應放大系統，而C3、C4為補體系統中重要的組成成分[12]。本研究結果顯示，捕撈脅迫下補體C3、C4含量在脅迫后4h顯著性降低，隨著時間的推移又恢復為脅迫前水平。這與王文博等[13]、Montero等[14]、Rotllant[15]等研究的擁擠脅迫對補體的影響結論相符。

從捕撈脅迫對半滑舌鰨血漿補體含量和溶菌酶活性活性影響的變化趨勢可以看出，脅迫降低了半滑舌鰨的非特異性免疫力，在脅迫后的恢復過程中，非特異性免疫力逐漸恢復；另一方面，機體在經歷了一段應激之后而產生了一種保護機制，使補體含量和溶菌酶活力恢復到脅迫前水平，借此維持機體的自身平衡來克服脅迫。雖然本研究中溶菌酶沒有在試驗期間內恢復到脅迫前水平，但在試驗末期已呈現上升趨勢。

血漿TP、ALB和GLB是血液重要組成部分，它們具有維持血液滲透壓及組成體液免疫防御系統等功能。在蛋白組成方面,白蛋白含量遠遠小于球蛋白含量,其比值也遠遠小于1。球蛋白作為魚類的免疫成分,其含量增高意味著免疫力增強[16]。本研究還發現，白蛋白/球蛋白在脅迫192h出現顯著升高，說明了半滑舌鰨的非特異性免疫力基本恢復。

3.3 捕撈脅迫對半滑舌鰨其他血液生化指標的影響

血糖是機體內重要的供能物質，常態下動物體內的血糖濃度比較恒定，而隨著機體的活動和環境的變化，血糖濃度也會發生相應的變化。本研究結果表明，葡萄糖在脅迫后12h出現顯著性升高并且一直維持在較高水平。已有研究表明急性應激能夠引起魚類的高血糖癥[17]。至于血糖升高的原因，部分學者認為是應激后血液皮質醇水平升高導致[18]，也有學者認為應激誘導的高血糖癥不完全依賴于皮質醇[19]，不過Wendelaar[20]認為是兒茶酚胺和皮質醇共同作用的結果，而Vander等[21]則認為主要是血中兒茶酚胺水平升高的結果。

總蛋白可作為肝損傷的指示物，總蛋白升高可由肝臟結構上的變化引起。本研究結果表明，總蛋白在脅迫后12h出現顯著性升高并且一直維持在較高水平，這說明捕撈脅迫可能對機體肝臟造成了損傷，證明了McDonald[22]關于魚類總蛋白升高可通過突然運動引起的說法。

指示肝功能的血液學指標為轉氨酶，包括天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)和丙氨酸氨基轉移酶(ALT)[23]。正常狀態下，轉氨酶主要存在于肝細胞的可溶性部分，血液含量很低。所有的肝臟急性損傷和組織壞死首先會引起丙氨酸氨基轉移酶和天門冬氨酸氨基轉移酶的含量升高。本研究結果表明，ALT和AST酶含量在脅迫后4h后出現顯著升高，在試驗后期恢復為脅迫前水平。

膽固醇是攝食和營養狀況的指示劑。Wedemeyer等[24]指出，壓力可導致硬骨魚的高膽固醇。本研究結果顯示，膽固醇在脅迫后12h出現顯著性升高并且一直維持在較高水平，說明在捕撈脅迫下魚體出現了生理紊亂的現象。甘油三酯作為重要的能源物質，在捕撈脅迫下沒有發生顯著性變化。

捕撈脅迫后的48h內半滑舌鰨血液抗氧化指標、非特異性免疫指標和一些生化指標都產生了較大的波動，48h后魚體大部分指標恢復到脅迫前水平。因此，建議受到捕撈脅迫的魚體在恢復48h后再進行正常養殖管理。

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10.3969/j.issn.1673-1409(S).2012.04.008

SQ17;Q959.486

A

1673-1409(2012)04-S028-05

2012-03-01

國家“十二五”科技支撐計劃項目(2011BAD13B07)；天津市科技支撐重點項目(11ZCKFNC00400)。

孫學亮(1984-)，男，天津人，碩士，助理實驗師，主要從事養殖水域生態學研究。

邢克智，E-mailkzxing@yahoo.com.cn。