8例輸血發(fā)熱反應(yīng)的內(nèi)毒素調(diào)查

鮑自謙，劉 怡，章 昊

(深圳市血液中心，廣東 深圳518035)

輸血反應(yīng)是醫(yī)療急救中存在的風(fēng)險問題之一，血液在采集制備過程中不能完全避免細(xì)菌或內(nèi)毒素污染，因此血液安全是采供血機構(gòu)追求的最高目標(biāo)，實踐證明，血液受到細(xì)菌污染或其內(nèi)毒素污染所引起輸血不良反應(yīng)為非免疫性輸血反應(yīng)，法國1994-1997年5月發(fā)生8028例輸血事故中，144例與細(xì)菌污染有關(guān)，涉及到紅細(xì)胞的有97例，涉及到血小板的有53[1]，雖國內(nèi)沒有具體統(tǒng)計分析報告，但輸血反應(yīng)時有發(fā)生[2，3]。由于血液易受到細(xì)菌及其內(nèi)毒素污染，能對人體產(chǎn)生發(fā)熱、寒顫、低血壓、休克不良影響，甚至引起組織損傷和死亡的嚴(yán)重后果。2007年7月至2009年6月，共接到8例輸血發(fā)熱反應(yīng)報告，我們開展了內(nèi)毒素檢測分析，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 2007年7月至2009年6月期間；我中心共接到8例發(fā)熱輸血反應(yīng)報告，分別來自血液科、婦產(chǎn)科、骨科、外科、VIP病房的患者，病人年齡3-71歲，男5例(有輸血史2例)，女3例(有妊娠史及輸血史1例)。

1.2 樣本收集與處理 醫(yī)院對出現(xiàn)發(fā)熱輸血反應(yīng)血袋及時封存，臨床醫(yī)生填寫輸血不良反應(yīng)報告單報告輸血科，轉(zhuǎn)報血站，血袋經(jīng)混勻5次后截取血袋導(dǎo)管約7cm后熱合離心，取血漿作為檢測樣本或-25℃冰凍保存待檢。

1.3 試劑與儀器 鱟試劑(TAL)批號0807252，靈敏度0.005EU/ml；細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水 (BET)批號0902040；稀釋液Ⅰ批號0806030，實驗用的去除外源性內(nèi)毒素玻璃試管、微量吸管均來自湛江安度斯生物有限公司。標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素 (CSE)批號2008061，150EU/支，中國藥品生物制品檢定所制備。英國產(chǎn)型號Ati-320細(xì)菌內(nèi)毒素測定儀和檢測分析軟件。

1.4 實驗方法 采用動態(tài)濁度法內(nèi)毒素定量分析技術(shù)，取血漿檢測樣本0.1ml+稀釋劑0.1ml+檢查用水0.8ml，作為檢測孔；再取血漿檢測樣本0.1ml+稀釋劑0.1ml+內(nèi)毒素工作品0.1ml(0.025EU/ml)+檢查用水0.7ml，作為樣本陽性對照；充分混勻后，各管均經(jīng)70℃10min水浴后，取樣本上清液0.1ml加入等量鱟試劑進(jìn)行雙管測試，1.5h自動判讀，以標(biāo)準(zhǔn)曲線直線方程得出內(nèi)毒素數(shù)值。

1.5 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線 鱟試劑的靈敏度復(fù)核試驗結(jié)果符合，采用多人份血漿分別建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，消除血漿樣本檢測和標(biāo)準(zhǔn)曲線系統(tǒng)誤差，選擇3個最佳標(biāo)準(zhǔn)曲線合并成檢測分析的最終回歸曲線LgTg=2.8846-0.2232LgC(r=-0.9977)[4]。

2 結(jié)果

本文通過2年臨床輸血發(fā)熱反應(yīng)監(jiān)控，共收集8例病例，進(jìn)行了血液內(nèi)毒素含量的檢測，含量為0.023～0.145Eu/ml(見表1)，與正常人群內(nèi)毒素含量[4]無顯著性差異。

表1 8例輸血發(fā)熱反應(yīng)樣本內(nèi)毒素含量的檢測結(jié)果

3 討論

在8例臨床輸血反應(yīng)中，有6例輸注紅細(xì)胞懸液出現(xiàn)發(fā)熱反應(yīng)和2例輸注血小板懸液出現(xiàn)發(fā)熱、寒戰(zhàn)、血壓下降等反應(yīng)，我們首次開展了對其輸注的血液產(chǎn)品內(nèi)毒素進(jìn)行檢測，其含量與筆者對300份全血及成分血內(nèi)毒素動態(tài)監(jiān)測[5]結(jié)果相吻合，說明發(fā)生輸血發(fā)熱反應(yīng)并非內(nèi)毒素引起。

值得一提是5號病例輸注血小板懸液10min后，出現(xiàn)發(fā)熱、胸悶、寒戰(zhàn)等癥狀，對該血小板與病人血液進(jìn)行了細(xì)菌培養(yǎng)呈陽性，鑒定均為G+金葡菌，說明細(xì)菌污染是導(dǎo)致發(fā)熱反應(yīng)的主要原因。大量實踐和臨床研究證實，輸血發(fā)熱反應(yīng)主要因多次輸血后受血者產(chǎn)生同種白細(xì)胞或血小板抗體，當(dāng)再次輸血時，與供者的白細(xì)胞或血小板發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，激活補體，引起白細(xì)胞或血小板溶解而釋放致熱原所致，本組病例中就有3例患者有輸血史或妊娠史，其中從2號病例血漿中檢出HLA抗體。

另有報道血液在貯存期間白細(xì)胞活化后及其釋放的細(xì)胞因子，包括白細(xì)胞介素和腫瘤壞死因子等，具有多重的生物學(xué)活性，均可導(dǎo)致非溶血性發(fā)熱反應(yīng)[6，7]，近年來，我們利用白細(xì)胞過濾器去除成分血液中的白細(xì)胞，臨床輸血發(fā)熱反應(yīng)顯著減少，與國內(nèi)學(xué)者趙秀萍等[8]報道一致，有效預(yù)防輸血發(fā)熱反應(yīng)的發(fā)生。

目前，隨著國家對醫(yī)療用品生產(chǎn)的規(guī)范和準(zhǔn)入制的嚴(yán)格管理，產(chǎn)品質(zhì)量顯著提高，采供血機構(gòu)實行了全面過程質(zhì)量管理，對醫(yī)用器具使用前對內(nèi)毒素和細(xì)菌安全有效監(jiān)控；每月定期對各品種血液制品質(zhì)量監(jiān)測，細(xì)菌和內(nèi)毒素污染已極其少見，本次輸血發(fā)熱反應(yīng)內(nèi)毒素調(diào)查結(jié)果均正常，說明在獻(xiàn)血者體驗篩查、環(huán)境消毒、無菌操作，發(fā)血檢查各環(huán)節(jié)質(zhì)量控制機制是安全有效的，可最大限度保障血液的安全。同時，加強臨床醫(yī)務(wù)人員輸血知識培訓(xùn)教育，嚴(yán)格輸血指征，科學(xué)合理地輸血，開展對獻(xiàn)血者和輸血患者不規(guī)則抗體檢測和配血，輸血發(fā)熱反應(yīng)將會得到更有效的預(yù)防。

[1]張玉春,劉寶慶.防止血液被細(xì)菌污染的措施[J].臨床輸血與檢驗,2002,4(2):55.

[2]蘇天璐,邴艷萍.112例輸血反應(yīng)調(diào)查分析 [J].青島醫(yī)藥衛(wèi)生,2012,4(3):211.

[3]劉 蕾,邢培清,袁 舉,等.鄭州市臨床免疫輸血反應(yīng)的調(diào)查分析[J].河南醫(yī)學(xué)研究,2012,21(2):222-224.

[4]鮑自謙,劉 怡,伍秀英,等.361名獻(xiàn)血者血液內(nèi)毒素含量調(diào)查[J].中國輸血雜志,2010,23(12):1045-1046.

[5]鮑自謙,劉 怡,王 飛,等.全血及成分血內(nèi)毒素動態(tài)監(jiān)測[J].國際輸血及血液學(xué)雜志,2012,35(5):406-408.

[6]譚 斌,秦 莉，代 波,等.非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)與HLA抗體的相關(guān)研究[J]．中國實驗診斷學(xué),2006,10(9):1030-1031．

[7]呂 毅,郝寶嵐,王 艷,等.手工分離血小板與單采血小板質(zhì)量及輸注療效的對比研究[J].中國輸血雜志,2008,13(18):41-42．

[8]趙秀萍,楊晨曦.白細(xì)胞過濾器濾除效果的檢測[J].社區(qū)醫(yī)學(xué)雜志,2005,3(4):82-83．