明倩倩,游 勇,王 闖,張志元
(1長沙健硒保生物科技有限公司,長沙410022;2長沙市植保植檢站,長沙410013;3長沙學院生物工程與環境科學系,長沙410022)
桃,隸屬薔薇目,梅亞科,桃屬。桃軟腐病是由黑根霉菌(Rhizopus nigricans)引起初生淺褐色水漬狀圓形至不規則形病斑,擴展很快,病部長出疏松的白色至灰白色棉絮狀霉層,致果實呈軟腐狀,后產生暗褐色至黑色菌絲、孢子囊及孢囊梗[1,2]。桃采收期集中在高溫的7、8月份,再加上貯運過程中易受損傷,很容易發生軟腐病,造成大量爛果[3]。因此嚴格把關保證桃安全貯藏,研究防治桃軟腐病的有效藥劑,減少初侵染對桃貯藏尤為重要。本試驗采用4種藥劑對桃軟腐病菌的抑菌能力進行研究,旨在為果園病害防治和桃貯藏前的藥劑處理提供理論依據。
取長有白色霉層的桃果實,采用組織分離法,在無菌條件下,切病健交界處組織成邊長為0.5 cm的小塊,放在培養皿中,用滅菌的鑷子夾小塊桃在75%酒精中消毒10 s,再用0.1%升汞液適量表面消毒1 min,再經無菌水漂洗3次,過火焰去除部分水分后,放入培養基平板上,每個培養皿3~4塊組織均勻排放,將培養皿用封口膜封好,置于28℃培養箱中倒置培養。36 h后選擇培養皿中長出黑根霉的菌落,在顯微鏡下檢測,確定為黑根霉后用接種鉤挑取一小塊菌絲,轉入試管斜面培養基中,置于28℃培養箱中培養,待長出白色菌絲后移入冰箱中冷藏保藏[4]。
(1)供試藥劑及使用濃度。40%地無菌(阜城津金農藥有限公司);20%五氯硝基苯(山西省臨汾有機化工廠);硫酸銅(分析純);生物農藥水生康(長沙高新區千力農業生物科技有限公司)。
(2)不同殺菌劑對桃軟腐病菌菌絲生長的影響試驗
試驗設5個處理,重復3次。處理1:40%地無菌2 g/L;處理2:20%五氯硝基苯2 g/L;處理3:硫酸銅(分析純)2 g/L;處理4:生物農藥水生康2 g/L;處理5:對照組(無菌水)。
采用生長速率法[5]測定殺菌劑對桃軟腐病病菌的殺菌效果。首先將桃軟腐病菌活化,將試管中的菌種接種到培養基中,置于28℃培養箱中培養36 h后菌種即已活化。然后,將供試藥劑分別用無菌水稀釋成所需的濃度待用。在滅菌培養皿中倒入PDA培養基12 mL,培養基凝固后,取100 uL殺菌劑稀釋液倒入培養基中(直徑為75 mm),用三角玻棒將藥液均勻涂布到培養基上。用打孔器(直徑為12 mm)制取已活化的病菌菌餅,菌絲面朝下接種于表面有藥的PDA培養基中央,置于28℃恒溫培養箱內黑暗培養。
(3)試驗結果調查。培養3 d后測量供試病菌在含不同藥劑培養基上的菌落直徑,與對照組比較計算各藥劑處理對菌落擴展的生長抑制率[6],分析比較不同殺菌劑對菌絲生長的影響。

試驗結果表明,各處理對桃軟腐病菌的抑菌效果具有極顯著性差異,20%五氯硝基苯2 g/L對桃軟腐病菌的抑制效果最好,處理4對桃軟腐病菌也有一定的抑菌作用(表1)。

表1 不同殺菌劑對桃軟腐病病菌的抑制效果
根據上述不同殺菌劑培養皿中菌絲生長的情況,20%五氯硝基苯2 g/L的殺菌效果最好。為了進一步探索20%五氯硝基苯抑菌效果的最佳濃度,研究了不同濃度的20%五氯硝基苯殺菌作用影響的試驗。結果表明:抑菌效果隨使用濃度的提高而增強,但當濃度至2 g/L時,再提高濃度至4 g/L,抑菌效果增加值就很小了(表2)。因此,生產上使用20%五氯硝基苯最佳濃度為2 g/L。

表2 五氯硝基苯不同使用濃度的抑制效果
20%五氯硝基苯溶液對桃軟腐病的抑制效果最好,該化合物可有效地抑制菌絲的生長,最適宜的使用濃度為2 g/L。實際生產中,在冬季,桃樹要進行枯枝清理并燒毀,減少初侵染來源,在春季噴施濃度2 g/L的20%五氯硝基苯溶液可以抑制病原真菌的生長,降低桃果實帶菌率,從而減少桃貯運期病害的發生,減少果實的腐爛損失。
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