NF-κB和P53與外周動脈疾病的關(guān)系

陳 穎 胡有東 李 俠 徐培敬 (徐州醫(yī)學(xué)院附屬淮安醫(yī)院老年科，江蘇 淮安 223002)

外周動脈疾病(PAD)是除心腦動脈以外的動脈血管疾病。PAD是冠心病的等危癥，患者不僅易出現(xiàn)行走能力受損等，而且增加冠心病、腦卒中等疾病死亡風(fēng)險〔1，2〕。由于PAD基本機(jī)制為動脈粥樣硬化，近期研究表明mimecan在動脈粥樣硬化病變中發(fā)揮著重要作用〔3〕，但作用機(jī)制不明，而在mimecan基因的第1個內(nèi)含子上有NF-κB和P53的結(jié)合位點(diǎn)，因此研究NF-κB和P53在動脈粥樣硬化病變中的作用有著重要的意義。

1 材料與方法

1.1 研究對象和分組 選擇2009年4月至2011年2月淮安市第二人民醫(yī)院老年科PAD患者共84例，年齡50～75歲，男43例，女41例。所有患者均符合PAD的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)〔4〕，按照Fontaine臨床分級將所有入選病例分成四組，分別為Ⅰ級組23例，男12例，女11例，年齡50～67歲，平均(56.81±8.23)歲;Ⅱ級組22例，男 10例，女 12例，年齡 53～70歲，平均(57.8±7.57)歲;Ⅲ級組 24例，男 13，女 11例，年齡 55～75歲，平均(58.36±5.93)歲;Ⅳ級組15例，男8，女7例，年齡56～75歲，平均(58.21±6.39)歲。健康對照組20例，男10例，女10例，年齡50～75歲，平均(57.61±5.37)歲。各組間年齡、性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

1.2 方法 (1)踝臂指數(shù)(ABI)測定：ABI測量采用美國心臟病學(xué)會(AHA)推薦的方法，室溫下，患者取仰臥位，使用魚躍牌水銀血壓計(jì)常規(guī)測量雙側(cè)肱動脈收縮期血壓并取其平均值，若兩側(cè)血壓差值＞10 mmHg，則以高值作為肱動脈收縮壓。將袖帶縛于小腿遠(yuǎn)端靠近踝關(guān)節(jié)處，以同樣的方法測得同側(cè)脛后動脈和足背動脈血壓，取其中的高值作為踝部收縮壓。最后用選定的踝部收縮壓除以選定的肱動脈收縮壓，所得的值即這一側(cè)的ABI，雙側(cè)的 ABI均需測量，取其中的低值作為患者的ABI〔5〕。(2)NF-κB 和 P53 的檢測：NF-κB 和 P53 的測定采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測(美國BIO-RAD伯樂酶標(biāo)儀)，試劑盒購自Diagnostic Systems Laboratories INC公司，操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以s表示，采用單因素方差分析各組間差異。采用直線相關(guān)分析判斷NF-κB和P53與外周動脈疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)性。

2 結(jié)果

2.1 NF-κB和P53在不同程度PAD中的表達(dá) PAD組NF-κB和P53明顯高于對照組，(P＜0.05)，且各組間兩兩比較發(fā)現(xiàn)各組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

2.2 NF-κB和 P53與 PAD嚴(yán)重程度的相關(guān)性 NF-κB和P53與PAD嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.76、0.68(P＜0.05)，即NF-κB和P53與PAD通過氧化應(yīng)激等機(jī)制存在明顯的正相關(guān)性，且隨著外周動脈疾病嚴(yán)重程度的加重，所以通過檢測NF-κB和P53的表達(dá)程度，對判斷PAD的嚴(yán)重程度可能有一定益處。

2.3 NF-κB和P53在PAD間的相關(guān)性 在PAD中NF-κB和P53呈正相關(guān)(r=0.83，P＜0.05)，提示兩者在外周動脈疾病中可能通過共同作用于mimecan基因的第1個內(nèi)含子而起到相互促進(jìn)的作用。

表1 NF-κB和P53在各組中的表達(dá)(s)

表1 NF-κB和P53在各組中的表達(dá)(s)

與對照組比較：1)P＜0.05

P53對照組組別 n NF-κB 20 18.73±4.31 1.53±1.13Ⅰ期組 23 22.21±3.431) 2.12±1.811)Ⅱ期組 22 23.62±4.351) 2.24±2.041)Ⅲ期組 24 27.26±6.601) 2.81±1.121)Ⅳ期組 15 31.32±5.471) 3.50±2.801)

3 討論

曾有多種學(xué)說從不同的角度來闡述動脈粥樣硬化斑塊的發(fā)病機(jī)制，從最早的脂肪浸潤學(xué)說，到后來的損傷-反應(yīng)學(xué)說，及細(xì)胞增殖學(xué)說等，均未闡述NF-κB、P53在動脈粥樣硬化斑塊中的相關(guān)作用，而在我們的研究中發(fā)現(xiàn)NF-κB、P53兩者呈正相關(guān)，它們在動脈粥樣硬化斑塊形成中的作用機(jī)制可能是通過Minecan基因所實(shí)現(xiàn)。已有研究證實(shí)NF-κB是動脈粥樣硬化斑塊的啟動因子〔6〕，靜息狀態(tài)下，NF-κB 與其抑制亞單位(IκB)結(jié)合與胞漿中，NF-κB的激活主要是通過降解IκB來實(shí)現(xiàn)的。各種危險因子(高脂血癥、高血糖、糖尿病、感染源等)通過細(xì)胞膜激活I(lǐng)κB激酶，使IκB磷酸化，然后與多個泛素結(jié)合，進(jìn)而由蛋白激酶降解NF-κB游離于胞質(zhì)中，胞質(zhì)中的NF-κB易位至細(xì)胞核，與脫氧核糖核酸(DNA)分子炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白Minecan基因中的NF-κB結(jié)合點(diǎn)相結(jié)合，調(diào)控各種炎癥因子如腫瘤壞死因子(TNF)、干擾素(IFN)、IL-1、IL-6、血管細(xì)胞黏附分子-1(VCAM-1)、細(xì)胞間黏附分子(ICAM-1)、E-選擇素趨化因子MCP-1等。這些細(xì)胞炎癥因子通過各種相同或不同的信號通路來促進(jìn)動脈粥樣硬化斑塊的發(fā)生發(fā)展。

P53抑癌基因是目前唯一研究較明確的、定位于細(xì)胞核內(nèi)的抑制細(xì)胞增殖的抑癌基因，在生理情況下P53發(fā)揮其抑癌作用，抑制動脈血管平滑肌細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等過度分裂〔7〕，進(jìn)而抑制動脈粥樣硬化斑塊的形成，即它們處在一種動態(tài)平衡，但是當(dāng)動脈內(nèi)皮損傷或其他動脈粥樣硬化斑塊形成的危險因素出現(xiàn)時，這種平衡將被打破，動脈粥樣硬化形成的危險因素超過P53作用時，P53將代償性升高，與本文結(jié)果一致，即動脈粥樣硬化嚴(yán)重組(Ⅳ期組)P53值高于對照組及其他實(shí)驗(yàn)組，當(dāng)其失去代償性能力時，動脈粥樣硬化斑塊形成速度將加快;另外，動脈粥樣硬化斑塊形成的各種危險因素也可能作用于P53，因此動脈粥樣硬化斑塊形成的機(jī)制可能是NF-κB和P53之間的動態(tài)平衡被打破的過程。

目前雖然對動脈粥樣硬化斑塊形成的機(jī)制研究較多，但對其形成確切機(jī)制仍不是很清楚，因此我們的研究從一個側(cè)面表明NF-κB和P53可能在動脈粥樣硬化斑塊的形成中起著重要作用，為研究動脈硬化粥樣斑塊形成機(jī)制提供一個新的思路。

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