澤瀉湯加味方對高鹽高血壓大鼠的降壓療效及對腎功能的保護作用

陳景彥 陳炳宏 張樹峰 范洪亮 于海榮 任立群 梅愛敏 景文莉

(承德醫學院，河北 承德 067000)

眾所周知，長期高血壓可導致心、腦、腎靶器官的損害。腎臟既是血壓調節的重要器官，同時又是高血壓損害的主要靶器官之一。高血壓是腎損害的促進因素之一〔1〕。由于在腎損害的早期，患者沒有明顯的癥狀，即使發展到相當嚴重的階段，癥狀也不明顯，單純用血清肌酐和尿素氮來評估高血壓患者的腎功能易延遲診斷〔2〕。因此，適當的控制血壓和利用敏感的檢測手段檢測腎功能指標是防治腎損害的主要措施之一。本研究旨在觀察澤瀉湯加味方對高鹽高血壓大鼠的降壓療效及腎功能的保護作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 3周齡雄性Wistar大鼠180只體重為50～60 g，SPF級，由天津市山川紅實驗動物科技有限公司提供，動物合格證號：SCXK(津)2009-001。

1.2 主要儀器及試劑 BP-6動物套尾無創血壓儀(成都泰盟科技有限公司);日立7180全自動生化分析儀;FT-630G放免儀(北京核儀器廠);尿β2-MG放射免疫分析藥盒(北京原子高科股份有限公司)。

1.3 實驗藥物 澤瀉湯加味方：澤瀉21 g、白術9 g、澤蘭15 g、石菖蒲15 g(購自承德醫藥集團責任有限公司，批號0712002，一等);纈沙坦膠囊(商品名：代文，北京諾華制藥有限公司生產，批號X0796)。

1.4 實驗方法

1.4.1 高鹽高血壓動物模型的制備 在文獻報道〔3〕的基礎上，我們對其造模方法加以改進，并根據預實驗造模結果，高鹽造成高血壓的周期長，并且成模率低，故用3周齡雄性Wistar大鼠180只，選取尿蛋白和尿紅細胞均為陰性者作為觀察對象，預留10只作為正常對照組，其余170只通過連續22 w，8%高鹽飼料自然飼養，并從喂養第8周開始每周一次進行血壓測量。在喂養第18～22周時進行血壓達標(SBP＞130 mmHg)篩選(用鼠尾動脈測壓儀測清醒狀態下大鼠的血壓)。模型篩選方法：①從血壓已達標的大鼠中隨機抽出10只取腎組織行病理切片觀察，尚未發現病理改變者;②在大鼠分組前，3 d測1次血壓，連測3次，每次每只大鼠測3遍，血壓均＞130 mmHg者為造模成功。最后選用40只成模大鼠行8 w干預措施。

1.4.2 分組方法 從造模成功的大鼠中篩選40只，根據血壓值隨機分為模型組、纈沙坦組、澤瀉湯加味方高劑量組、澤瀉湯加味方中劑量組，每組各10只，加上預留的10只正常組，共5組。

1.4.3 給藥方法 正常組：普通飼料，灌蒸餾水;模型組：灌蒸餾水;纈沙坦組：14.4 mg·kg-1·d－1(研磨，蒸餾水溶解;成人劑量的10倍);澤瀉湯加味方高劑量組：16.2 g·kg－1·d－1(成人劑量的15倍);澤瀉湯加味方中劑量組：10.8 g·kg－1·d－1(成人劑量的10倍)。所有實驗大鼠均灌胃8 w;除正常對照組外，其余各組大鼠繼續8%高鹽飼料喂養8 w。

1.4.4 血壓測量 采用無創性套尾法測定清醒大鼠收縮壓(SBP)，每次測量時記錄3次，取其平均值。給藥前、2、4、8 w末各測一次血壓，每次服藥后2 h開始測量。

1.4.5 血中指標檢測 治療8 w后，用10%水合氯醛腹腔內給藥麻醉，目內眥取血約 3 ml，放入肝素鈉管中，離心(4 000 r/min，5 min)取血漿，放置 －80℃冰箱備用。用日立7180全自動生化分析儀檢測BUN、Scr。

1.4.6 尿中指標檢測 在治療8 w后，將每只大鼠分別置于代謝籠中，收集24 h尿量(自由飲水、禁食)。24 h尿ALB定量用全自動生化分析儀;尿β2-MG用放射免疫法。

1.5 統計學分析 采用SPSS16.0統計軟件進行數據分析。實驗數據計量資料用s表示，多組間比較采用單因素方差分析。

2 結果

2.1 各組實驗大鼠不同時間段收縮壓的變化 表1示，給藥前，與正常組比較，模型組、澤瀉湯加味方高、中劑量組和纈沙坦組大鼠的收縮壓明顯增高(P＜0.01)。2、4和8 w末，與模型組比較，正常組、纈沙坦組、澤瀉湯加味方高、中劑量組大鼠的收縮壓明顯降低(P＜0.01)。

2.2 各組實驗大鼠干預8 w后BUN、Scr的變化 表2示，與正常組比較，纈沙坦組、澤瀉湯加味方高、中劑量組、模型組血BUN升高(P＜0.01)。與正常組比較，纈沙坦組、澤瀉湯加味方高、中劑量組、模型組Scr無顯著性差異(P＞0.05)。

表1 實驗各時間段大鼠收縮壓的變化(s，mmHg，n=10)

表1 實驗各時間段大鼠收縮壓的變化(s，mmHg，n=10)

與正常組比較：1)P＜0.01;與模型組比較：2)P＜0.01

2 w 4 w 8 w正常組 118.87±10.00 118.87±10.002) 114.87±9.702) 111.60±8.512)組別 給藥前模型組 145.94±11.531) 151.43±8.67 145.57±12.11 142.33±9.49纈沙坦組 145.78±9.871) 123.57±5.992) 131.13±10.712) 122.40±4.602)澤瀉湯加味方高劑量組 144.64±7.421) 126.80±7.912) 122.70±11.192) 126.40±14.802)澤瀉湯加味方中劑量組 144.93±6.611) 135.86±6.882) 126.87±6.742) 124.20±7.682)

表2 各組實驗大鼠相應干預8 w后，BUN、Scr的變化( s ，n=10)

表2 各組實驗大鼠相應干預8 w后，BUN、Scr的變化( s ，n=10)

與正常組比較：1)P＜0.01

組別 BUN(mmol/L)Scr(μmol/L)7.614 0±1.129 28 36.800 0±10.379 47模型組 12.407 0±1.718 761) 35.300 0±5.271 52纈沙坦組 11.972 0±3.108 551) 32.600 0±7.574 81澤瀉湯加味方高劑量組11.989 0±2.465 441) 32.000 0±4.737 56澤瀉湯加味方中劑量組11.754 0±1.692 441)正常組35.000 0±6.599 66

表3 實驗各組大鼠相應干預8 w后尿ALB、尿 β2-MG的變化( s ，n=10)

表3 實驗各組大鼠相應干預8 w后尿ALB、尿 β2-MG的變化( s ，n=10)

與模型組比較：1)P ＜0.01，2)P ＜0.05

組別 24 h ALB(g/24 h)β2-MG(mg/L)正常組 0.101±0.071) 0.116 ±0.1032)模型組 0.272±0.08 0.226±0.164纈沙坦組 0.192±0.08 0.153±0.113澤瀉湯加味方高劑量組 0.145±0.111) 0.154±0.095澤瀉湯加味方中劑量組 0.178±0.112) 0.119±0.1042)

2.3 各組實驗大鼠干預8 w后尿ALB、尿β2-MG的變化 表3示，與模型組比，澤瀉湯加味方高劑量組的24 h尿ALB明顯降低(P＜0.01);澤瀉湯加味方中劑量組的尿ALB降低(P＜0.05)。與模型組比，正常組和澤瀉湯加味方中劑量組的尿β2-MG降低(P＜0.05)。

3 討論

中醫學雖無高血壓腎損害這一病名，但按其不同的病理階段和主要臨床表現大致屬于“眩暈”、“頭痛”、“腰痛”、“水腫”、“尿濁”等范疇。我們依據中醫“久病不愈，非痰則瘀”及“水能病血，血能病水”的理論，提出了具有“利水為主，利水活血化痰”之功的澤瀉湯加味方。澤瀉湯加味方由《金匱要略》澤瀉湯加澤蘭、石菖蒲組成。澤瀉：甘淡，寒。歸腎、膀胱經;能利水滲濕，清濕熱。現代藥理研究認為，澤瀉有利尿作用，能促使尿素和氯化物的排泄，還可降血壓。白術：苦、甘，溫。歸脾、胃經;能健脾益氣，燥濕利水，止汗，安胎。《湯液本草》認為：白術入少陰經，利腰臍間血，通水道，上而皮毛，中而心胃，下而腰臍，在氣主氣，在血主血。澤蘭：苦、辛，微溫。歸肝、脾經;能活血祛瘀，利水消腫。曹賽霞等〔4〕研究認為，適宜劑量的澤蘭對大鼠慢性腎衰竭有改善作用;其機制與澤蘭糾正腎衰竭時的貧血、低鈣高磷現象、氮質血癥，減少腫瘤壞死因子對腎臟的纖維化損害有關。石菖蒲：辛、溫。歸心、胃經;能祛痰開竅，化濕開胃，寧神益智。研究證明，石菖蒲對小鼠具有抗氧化作用和提高機體的免疫功能〔5〕。

研究認為，以血壓＜120/80 mmHg為參照，血壓為130～139/85～89 mmHg、140～159/90～99 mmHg時的終末期腎臟病變相對危險度分別為1.9和11.2，而血壓為210/120 mmHg時其危險度高達22.1〔6〕。高血壓是腎損害的促進因素之一，適當控制血壓是延緩腎臟病進展的重要措施之一〔1〕。本實驗結果顯示：澤瀉湯加味方高劑量組和纈沙坦組降壓療效相當;在某種程度上澤瀉湯加味方在降壓方面存在一定的量效關系。

高血壓腎損害的早期也就是良性小動脈硬化出現臨床癥狀前，常規的血液及尿液檢查都正常，但用敏感的檢查手段仍能發現異常，如尿ALB、尿β2-MG的排出增加均可視為原發性高血壓早期腎損害的存在〔7〕。尿ALB是反映腎小球功能的主要指標，正常情況下腎小球濾過膜存在電荷選擇性屏障，絕大部分尿ALB不能通過濾過膜。當尿ALB含量升高時，就標志著腎小球濾過膜電荷選擇性屏障損傷〔8〕。β2-MG是低分子蛋白，由腎小球自由濾過，99.9%以上再由近端腎小管重吸收，尿中排出甚少。尿β2-MG是目前公認的測定腎小球濾過率和近端腎小管重吸收功能的敏感指標〔8〕。本實驗結果顯示，高鹽飲食可導致大鼠血BUN升高;澤瀉湯加味方在高鹽高血壓大鼠早期腎功能的損害方面具有保護作用。

綜述所述，澤瀉湯加味方可以降低高鹽高血壓大鼠的血壓，并且其對腎功能具有一定的保護作用。另外，關于澤瀉湯加味方對高鹽高血壓大鼠的降壓起效時間和最佳降壓時間及血壓值與腎功能指標的相關性分析有待研究。

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5 李艷菊，劉 輝，郭月秋.石菖蒲對小鼠免疫功能調節作用的研究〔J〕. 中國中醫藥科技，2007;14(2)：95-6.

6 黃頌敏，歐三桃.高血壓腎損害的診斷及治療〔J〕.中華腎臟病雜志，2005;21(10)：566.

7 王海燕.腎臟病學〔M〕.第2版.北京：人民衛生出版社，1995：1150-1.

8 李樹青，于江月，王維忠.丹參對自發高血壓大鼠早期腎損害干預研究〔J〕.中西醫結合心腦血管病雜志，2008;6(1)：47.