鈣囊素及基質金屬蛋白酶-9與肝癌患者預后的相關性

邱 麗 丁祥武 (襄陽市中心醫院消化科，湖北 襄陽 441021)

全球每年新發原發性肝癌約26萬例，是目前全球腫瘤相關死亡的第三位原因，其女性標準化死亡率為5.61/10萬，男性標準化死亡率達14.52/10萬〔1〕。目前認為外科手術仍是治療肝癌的首選方法和最有效措施。但是手術后的遠期療效差，肝癌復發率高，轉移和侵襲是影響預后的兩大因素〔2〕。本文主要研究鈣囊素(S100 A11)及基質金屬蛋白酶(MMP)-9與肝癌患者預后相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010年3月至2011年12月我院肝癌患者50例。均經過臨床病理檢查、CT、B超及腫瘤標志物實驗室檢查證實。其中男性28例，女性22例;年齡36～73〔平均(52.3±2.5)〕歲;臨床分期：Ⅰ期14例，Ⅱ期30例，Ⅲ期6例。

1.2 方法 應用免疫組化染色試劑盒PV-9000檢測S100 A11的表達，特異性一抗為兔抗人S100 A11多克隆抗體，陰性對照采用PBS替代第一抗體。以光鏡下半定量結果綜合考慮染色強度和陽性細胞數。得分0～2分為陰性表達(－);3分為(+);4分為(?);5分以上為(?)。陽性表達為+～?。采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)和免疫組織化學方法檢測MMP-9，根據細胞質染色程度和染色百分率進行評分，得分0分為(－)，1～4分為(+)，5～8分為(?)，9～12分為(?)。陰性表達為－～+，陽性表達為?～?。

1.3 隨訪 所有患者于手術后定期回門診隨訪，檢查恢復情況，隨訪時間為42個月。

1.4 統計學處理 應用SPSS13.0統計軟件，對預后因素進行Cox回歸分析。

2 結果

2.1 S100 A11及MMP-9的表達 行根治性切除手術后的肝癌患者S100 A11表達總陽性數明顯小于手術前(P＜0.05)行根治性切除手術后的肝癌患者MMP-9表達總陽性數明顯小于手術前(P＜0.05)。見表1。

2.2 復發因素分析 將臨床病理因素、S100 A11水平和MMP-9水平納入Cox模型進行多因素分析，結果S100 A11水平、MMP-9水平、術前播散結節、微轉移灶是影響肝癌患者術后復發的危險因素。見表2。

表1 S100 A11及MMP-9的表達與患者特征的關系〔n(%)〕

表2 影響肝癌術后復發因素的多因素分析

3 討論

腫瘤分為良性腫瘤和惡性腫瘤，兩者的主要區別就是惡性腫瘤有轉移和復發的傾向〔3〕。有各種屬于不同家族的蛋白酶參與腫瘤的轉移，包括MMP、半胱氨酸蛋白酶、絲氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和蘇氨酸蛋白酶。腫瘤細胞把這些酶作為降解細胞外基質(ECM)、清除轉移障礙的工具〔4〕。MMP-9與腫瘤關系最為密切，在腫瘤組織中有高活性及高表達，甚至與腫瘤的復發及預后密切相關。MMP-9具有降解ECM和基底膜、抑制腫瘤細胞凋亡、激活生長因子、促進血管生成因子的釋放等多種生物學功能〔5〕。MMP-9在多種惡性腫瘤中都呈高表達，參與腫瘤的新生血管形成，與惡性腫瘤的侵襲與轉移能力密切相關。

S100鈣連接蛋白家族包括20多個不同的成員蛋白，含有1個EF手型鈣離子結合區，能夠與鈣離子結合發生構象改變，之后與相應的靶蛋白結合發揮生物學效應〔6〕。S100 A11蛋白表達主要位于細胞質和細胞核中，著色后根據表達強度不同被染色為淡黃、棕黃至棕褐色不等。S100基因簇在腫瘤細胞中經常存在缺失、重排、重疊、易位等改變，預測可能與腫瘤的發生發展有關，在腫瘤中會出現表達增高的現象〔7〕。

本研究可見S100 A11和MMP-9的總陽性表達情況與肝癌病情有明顯的相關性。S100 A11和MMP-9可作為預示肝癌治療手術后復發及長期生存的風險分子指標。癌細胞表達MMP-9水平伴隨腫瘤包膜侵犯而增高，與肝癌的癌栓形成密切相關。腫瘤細胞可能通過增加MMP-9的表達，增強侵襲性而易于突破腫瘤包膜，形成播散結節，肝內的播散與轉移得到加速〔8〕。手術后S100 A11和MMP-9在肝細胞癌組織中表達明顯減少，說明可以依據其表達水平評判治療效果，預估復發的可能性。肝癌屬于富血管腫瘤，具有易侵犯門脈系統、早期發生播散和轉移的特點。S100 A11和MMP-9在肝細胞癌組織中的高表達說明在肝癌侵襲轉移中具有協同作用。

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2 唐光華，倪潤洲，肖明兵，等.鈣囊素及半乳凝素-3在胰腺癌中的表達及臨床意義〔J〕. 江蘇醫藥，2010;36(2)：136-9.

3 鐘 崇，蘇小康，韋 瑋，等.肝癌患者血清及腫瘤組織MMP-2/9的表達及意義〔J〕. 臨床醫學工程，2010;17(10)：4-5.

4 彭穎瓊，胡 斌，肖 偉，等.肝細胞癌中NF-kBp65，VEGF和MMP-9蛋白的表達及其相關性研究〔J〕.現代生物醫學進展，2010;10(3)：443-6.

5 陳 浩，李建生，王 偉，等.肝細胞癌患者血清ECMI、MMP-9和VEGF水平的變化及其意義〔J〕.實用肝臟病雜志，2010;13(6)：424-7.

6 于志堅.我國肝癌早診早治研究現狀〔J〕.南通大學學報(醫學版)，2008;28(2)：79-83.

7 孫 珂，劉 純.苯丁酸鈉對甲狀腺濾泡癌細胞侵襲能力及MMP-9和TIMP-1表達的影響〔J〕.中國腫瘤生物治療雜志，2009;16(1)：67-70.

8 李明意，姚金科，楊永光.MMP-9、TIMP1基因在原發性肝癌中的表達〔J〕. 中華普通外科學文獻，2007;1(1)：33-5.