自制凝血質控品的研究與評價

蔣國英 周麗杰 余苗苗

常規的凝血四項檢查包括凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、纖維蛋白原(FIB)、凝血酶時間(TT)。其是術前出血傾向篩查和抗凝治療監測的常用指標。凝血檢查受多方面因素影響，如試劑的來源及批號、儀器的性能、檢測的環境等均可影響檢驗結果。室內質量控制是保證結果準確的重要手段。做好室內質量控制的關鍵就是要擁有良好的質控品。針對目前凝血質控品多為進口，價格昂貴，且供應周期長等不足，我們研究用自制的凝血質控品代替進口的正常范圍的質控品，用于實驗室的日常室內質控工作中，取得了良好的效果。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 STAGO全自動血凝分析儀及其配套的試劑盒，質控物。

1.2 質控血漿的制備 選當日凝血檢驗結果正常的血漿標本(除去溶血、黃疸、脂血、渾濁者)，充分混勻，留3 ml用于定值，其余按0.5 ml/支，分裝到無菌帶蓋的小塑料子彈頭試管里，標明批號，-20℃冰箱保存。必須在抽血后4 h內完成。

1.3 方法

1.3.1 自制凝血質控品批內精密度的測試 取自制質控品3 ml于STAGO全自動血凝儀上對PT、APTT，FIB、TT各項目連續測定20次，計算均值()，標準差(s)、變異系數CV%

1.3.2 自制質控品日間精密度及穩定性測試 每天從冰箱內取同批次的自制凝血質控品37℃水浴速溶，穩定30 min后同凝血標本、進口質控品一同測試，連續測定30 d，計算自制凝血質控品和進口質控品的均值()、標準差(s)、變異系數CV%。

1.4 統計學方法 采用Excel軟件作質控圖和SPSS 11.5統計軟件作相關統計，數據以均數()，標準差(s)，變異系數(CV%)表示。

2 結果

2.1 批內精密度測試結果 CV%分別是:PT為2.18%，FIB為2.32%，APTT為3.04%，TT為2.65%。說明自配質控品性質穩定可靠，表明儀器測定結果的精密度良好。見表1。

2.2 日間精密度測定及穩定性測試結果 進口質控品各項凝血指標的CV%范圍為2.76%%～3.84%，自制質控品各凝血指標的CV%范圍為3.91%～4.14%，對比可見，自制凝血質控品日間精密度及穩定性良好，符合室內質控要求。見表2。

表1 批內精密度測試結果

表2 日間精密度測定及穩定性測試結果

3 討論

室內質量控制是保證凝血實驗檢測準確的重要手段。凝血功能檢測時須做室內質控，只有質控結果在允許范圍內，方可測定標本和發出檢驗報告［1］。目前國內質控血漿多為進口凍干血漿，且價格較昂貴，因此研究自制凝血質控物非常有必要。

在研究中，我們用每天都用進口質控品監測每天實驗的準確性，確保自制凝血質控品的準確性。本文研究表明我科的自制正常范圍凝血質控品有良好的準確性及穩定性。各項凝血指標的批內精密度CV%，PT為2.18%，FIB為2.32%，APTT為3.04%，TT為2.65%，批內日間精密度CV%，PT為3.91%，APTT為4.12%，FIB為3.04%，TT4.14%，均符合凝血質控要求［2］。有文獻報道［3］，用浮動均值法對凝血3項作質量控制探討，表明正常患者的混合血漿凝血3項指標均值變化較小，與參比血漿質控圖變化趨勢完全一致。

血漿中的大部分凝血因子在保存過程中，會逐漸失活，使PT、APTT、FIB及TT檢測結果隨標本保存時間而延長。有報道認為由于凝血因子Ⅷ極不穩定，即使是-20℃保存，其凝血活性也將減少50%［4］。自制凝血質控品在-20℃保存條件下，PT、APTT、FIB及TT檢測結果隨標本保存時間而延長，但在一個月內可相對穩定。所以我們建議將自制凝血質控品放于-20℃冰箱中時，保存期限定為一個月。

我們在自制凝血質控品時要注意采集人數盡可能多(至少20人)，采集的血漿應擯棄溶血、黃疸、脂血、渾濁者，不能用孕婦和口服避孕藥的正常女性血漿，因為這些情況下可使檢測受影響或使凝血因子的活性升高。自制凝血質控品在使用時要注意不要反復凍融，每支只能使用一次。在融化時不能在室溫中自然融化，這樣會使纖維蛋白原析出和凝血因子消耗。應迅速置37℃水浴中5 min，輕輕搖動，使其迅速融化，于室溫穩定30 min再進行檢測［5］。

用混合血漿作為凝血質控品代替進口正常值質控品，有效克服了凍干質控物每次復溶所帶來的瓶間差，減少了室內質控的不精密度，提高了檢測的準確性，真正做到室內質控工作監測實驗條件改變的目的［6］。自制的凝血質控品具有不同于進口質控品的性質、成本低、制作簡單，應用方便，并具有與患者標本相似的介質效應，減少了誤差，適宜推廣應用，尤其適合中小醫院實驗室。我們將自制質控品應用于凝血常規的室內質量控制監測中，能夠及時發現引起結果誤差的原因(如試劑、儀器、標本等)，并及時改正，確保凝血的結果準確可靠，為臨床診斷和治療提供可靠的依據。自制凝血質控品是良好的室內質控品，值得推廣應用。

［1］彭明婷，谷小林.Sysmex CA-50型血凝儀的性能評價.中華檢驗醫學雜志，2000，23(5):315-317.

［2］蒼金榮，王華，任建康.凝血/止血檢測的質量保證.現代檢驗醫學雜志，2003，35(6):208.

［3］叢玉隆，王俊艷，殷宗建.患者血漿浮動均值法用于PT、APTT、FIB質量控制探討.臨床檢驗雜志，2002，20(6):354-355.

［4］叢玉隆.血栓與止血試驗診斷的現狀及發展.中華檢驗醫學雜志，2000，24(1):5-7.

［5］孔立新.凝血檢驗室內質控血漿的制作與評價.臨床檢驗雜志，2006，24(2):146.

［6］Westgard JO，Burnett RW.Precision requirements for cost effective operation of analytical processes.Clin chem，1990，36(9):1629-1632.