乙型肝炎感染者血清e抗原模式與HBV DNA及肝功能指標關系研究

施志農 陳繼梅

一直以來，用酶聯法檢測乙型肝炎病毒(HBV)血清標志物(HBV-M)是診斷HBV感染的常用方法，其中e抗原陽性是判斷病毒復制和高傳染性的常用免疫學標志物，對于HBeAg陽性的乙肝患者，HBeAg陰轉并出現抗-HBe，提示HBV的復制停止，傳染性降低，意味著病情好轉。近年來實時熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR)檢測患者體內病毒量的方法全面推廣，對乙肝患者診療從分子學角度提供了有力的支持，通過FQ-PCR我們認識到少部分患者在出現HBeAg血清學轉換后，仍存在病毒復制，肝功能出現反復，病情遷延不愈。現對我院門診及住院乙肝患者血清分別進行乙型肝炎標志物、HBVDNA、肝功能檢測并進行統計分析，以探討乙型肝炎e抗原模式與HBVDNA及肝功能之間的關系。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2009年5月至2010年6月在蕪湖市第三人民醫院門診及住院乙型肝炎感染者1407例，所有病例皆同時具有肝功、血清乙型肝炎病毒學(HBVDNA)及乙型肝炎血清標志物(HBV-M)等檢查結果，診斷符合《慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)》制定的診斷標準［1］，排除合并HCV、HAV等其他肝炎病毒感染者。其中男1066例，女341例，患者年齡7～76歲，平均(35.1±13.5)歲。

1.2 檢測方法

1.2.1 血清HBVDNA載量檢測 采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR法)，儀器為美國ABI公司生產的SLAN Real-Time PCR Detection System 7300熒光定量檢測儀，試劑購自上海科華生物工程股份有限公司，以HBVDNA＞103copirs/ml為陽性結果。

1.2.2 血清HBV-M檢測 采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA法)，試劑購自北京萬泰生物藥業有限公司的。檢測乙型肝炎患者血清 HBV標志物(HBV-M)，即 HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc。嚴格按說明書操作，結果在MK3型酶標儀上測定，根據HBV-M結果按HBeAg模式分為二組，即HBeAg陽性組和HBeAg陰性組，前者包括HBsAg、HBeAg、抗-HBc陽性和 HBsAg、HBeAg陽性病例，后者包括 HBsAg、抗-HBe、抗-HBc陽性和 HBsAg、抗-HBc陽性及抗-HBe、抗-HBc陽性病例。

1.2.3 肝功能生化指標檢測 儀器為日立7180全自動生化分析儀，以評估肝功能常用炎癥指標血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)，及評估肝損傷指標膽堿脂酶(CHE)作為觀察指標。ALT、AST、CHE均采用雙試劑速率法。試劑購自溫州東甌津瑪生物科技有限公司。

2 結果

2.1 1407例慢性乙型肝炎感染者中不同e抗原模式中HBVDNA陽性率、病毒載量及ALT、AST、CHE結果比較(見表1)。

由此表可以得出，e抗原陽性組HBVDNA檢出率達到94.62%，與e抗原陽性組相比存在顯著性差異(P＜0.01)，而e抗原陰性組中仍有42.80% 患者存在病毒復制，雖然病毒復制水平顯著低于e抗原陽性組(P＜0.01)，兩組血清ALT、AST、CHE水平結果不存在顯著性差異(P＞0.05)，即慢性乙型肝炎感染者血清酶水平可能與HBeAg模式無關。

2.2 不同e抗原模式乙肝感染者中有病毒復制與無病毒復制其血清ALT、AST、CHE水平比較(見表2)。根據e抗原陽性或陰性組中是否存在病毒復制再次分組，探討其與ALT、AST、CHE等血清酶水平關系。

表1 不同e抗原模式乙肝患者HBVDNA陽性率、病毒載量及ALT、AST、CHE結果比較(±s)

表1 不同e抗原模式乙肝患者HBVDNA陽性率、病毒載量及ALT、AST、CHE結果比較(±s)

注:*表示括號內為陽性率，率比較采用方差分析

表2 不同e抗原模式乙肝感染者有或無病毒復制血清ALT、AST、CHE水平比較(±s)

表2 不同e抗原模式乙肝感染者有或無病毒復制血清ALT、AST、CHE水平比較(±s)

注:HBeAg陽性HBVDNA(-)組與HBVDNA(+)組經t檢驗*表示P＜0.05、＊＊表示P＜0.05，HBeAg陰性組中HBVDNA(-)組與HBVDNA(+)組經t檢驗★表示P＜0.01

我們的調查顯示不論e抗原陰性或陽性，都存在有病毒復制組ALT、AST水平顯著高于無病毒復制分組，CHE水平低于無病毒復制組(P＜0.01)。病毒復制活躍時的肝臟炎癥均重于病毒復制水平較低時，提示病毒載量與肝臟炎癥及預后有一定的相關性。

3 討論

本研究系統的收集了在我院門診和住院就診的乙型肝炎感染者1407例，通過分析，發現在乙型肝炎感染者中，e抗原陽性模式感染者502例，占35.68%，e抗原陰性模式感染者905例，占64.32%，e抗原陰性模式感染者明顯多于e抗原陽性模式感染者。e抗原陽性模式組血清HBVDNA檢出率及病毒載量水平都顯著高于e抗原陰性模式組，間接證實了血清HBeAg是病毒體內復制的指標，與HBVDNA載量指標有良好的一致性［2、3］。另一方面，我們資料顯示，有27例e抗原陽性患者血清中檢測不到HBVDNA載量，e抗原陰性組中仍有42.80%的患者存在病毒復制，雖然其病毒復制水平較陽性者顯著降低 (P＜0.01)，因此，單純通過 e抗原來推測HBV復制狀況的不確定性非常大，尤其在e抗原轉陰的情況下。同時我們也發現，單純以e抗原模式分組討論其肝功能的關系，我們可以得出，二組之間ALT、AST、CHE等血清酶水平之間并不存在顯著性差異(P＞0.05)見表1。而這兩組病毒載量存在顯著性差異，即可認為血清ALT、AST、CHE水平與體內病毒復制無關，這與一些文獻報道相符［4、5］，但仍有一些報道持相反意見［6、7］，我們按e抗原不同模式中是否存在病毒復制再一次分類，結果顯示，e抗原陽性模式組中有病毒復制的患者其血清ALT、AST水來顯著高于無病毒復制組，CHE水平顯著低于無病毒復制組(P＜0.01)見表2，e抗原陰性模式組也存在相同情況，有病毒復制組其ALT、AST水平高于無病毒復制組、CHE水平低于無病毒復制組。由此，我們得出與上面相反的結論，即血清ALT、AST、CHE水平與病毒載量相關［6、7］。我們認為雖然機體對HBV的免疫應答是造成肝組織損害的主要機制，但可能有HBV的直接參與，發生機制與免疫耐受被打破，病毒復制激發病變活動有關［8］。

因此，對于乙型肝炎感染者，我們認為e抗原雖能在一定程度上反應HBV復制狀況，但由于HBV致病機理相當復雜，由HBV病毒引起，機體的免疫反應的共同作用的結果，單一e抗原指標并不能很好的反應HBV的復制狀況。e抗原主要反應機體的免疫狀態，而HBVDNA直接檢測血中的病毒含量，能直接反映HBV的感染程度和病毒的復制情況，尤其是對于e抗原陰轉的感染者要加強HBVDNA的檢測，全面綜合分析e抗原、HBVDNA水平及肝功能指標，才能協助評估病情的變化、嚴重程度，指導臨床對患者的診療。

［1］中華醫學會肝病學分會，中華醫學會感染病學分會.慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)．中華肝臟病雜志，2011，19(1):13-24．

［2］陳繼梅，施志農，田蕓.熒光定量PCR檢測HBV-DNA與血清標志物關系探討．蚌埠醫學院學報，2009，34(2):158-159．

［3］吳麗萍，張建軍，杜瑞清.血清HBVDNA定量在不同類型慢性乙型肝炎中的檢測價仁值．汕頭大學醫學院學報，2009，22(1):34-36．

［4］歐曉娟，王曉明，賈繼東，等.慢性乙型肝炎肝穿病理與血清HBVDNA及肝功能的關系．首都醫科大學學報，2006，27(4):435-437．

［5］吳莉莉，董玲，沈錫中.慢性乙型肝炎血清HBeAg表達和HBV DNA水平與肝臟病理變化的相關性研究．中國臨床醫學，2005，12(6):1029-1030．

［6］李紅梅，劉映霞，劉書香，等.e抗原陰性慢性乙型肝炎患者體內病毒復制與病情的臨床關系．南華大學學報·醫學版，2006，34(4):592-593．

［7］Yuen MF，Nq IO，Fan ST，et al.Significance of HBV DNA levels in liver histology of HBeAg and anti-HBe positive patients with chronic hepatitis B.Am J Gastroenterol，2004，99:2032-2037．

［8］吳麗萍，綿建軍，杜瑞清，等.HBeAg陰性慢性乙型肝炎的臨床病理特征．山東醫藥，2008，48(41):102-103．