新型隱球菌血液感染1例

袁 霞，邱少紅，余 蓉

(石首市人民醫院檢驗科， 湖北 石首 434400)

新型隱球菌血液感染1例

袁 霞，邱少紅，余 蓉

(石首市人民醫院檢驗科， 湖北 石首 434400)

目的：探討新型隱球菌感染的檢驗學診斷。方法：革蘭氏染色鏡檢，觀察形態、染色特點并行墨汁負染色，生化反應進一步證實。結果：35℃ 24h形成典型濕潤的、黏液樣、不透明的白色至奶油色菌落,1周后轉淡黃或棕黃，濕潤黏稠，狀似膠汁。取菌落涂片革蘭染色，為圓形和卵圓形，菌體直徑一般在2～15um，大者直徑可達20um，革蘭染色陽性。墨汁負染色：取菌落涂片與1滴墨汁混合，加蓋玻片后鏡檢，可見圓周形或者卵圓形芽生孢子，但無真、假菌絲。菌體外有寬厚莢膜，莢膜比菌體大1～3倍，可見圓形菌體，外繞有一寬闊的空白帶(莢膜)。生化反應商品API20C AUX板條 (梅里埃) 鑒定，推薦性鑒定結果：新生隱球酵母菌鑒定百分率99.9%，典型指數0.84。結論：新型隱球菌侵犯人體以中樞神經系統最易受累，并常在腦室及大腦導水管周圍的灰質處呈占位性病變。確診要靠病原學證據，腦脊液墨汁染色或培養找到隱球菌，多次檢查后可提高陽性率。

新型隱球菌； 墨汁負染色

新型隱球菌(Crytococcus Neofonmans )又名溶組織酵母菌(Torula Histolytica )，廣泛分布于自然界，是土壤、鴿類、牛乳、水果等的腐生菌，尤以鴿糞中含量較多，也存在于正常人體體表、口腔、腸道，可侵犯人和動物，近年來由于誘使免疫功能低下的因素增多,其發病率有所上升。該病是真菌性疾病中較嚴重的一種,其死亡率占18%～30%。因此,新型隱球菌的研究越來越受到人們的重視。我院于2011年收治1例患者，經過血培養、形態分析、生化分析診斷為新型隱球菌感染。現報道如下。

1 病 例

1.1一般資料

患者男，45歲。2011年11月19日因咳嗽伴發熱半月來我院就診，臨床表現咳嗽，有時咳少許白粘痰，偶痰中帶血，2個月前確診患AIDS ，服用抗病毒藥物1個月。體溫38.6℃，脈搏106次/min，呼吸20次/min，血壓120/65mmHg。神清，青色面，皮膚可見散在小紅丘疹，皰疹，部分膿苔。雙肺呼吸音稍粗，均未聞及啰音，心律齊，無雜音，腹部平軟，無壓痛。胸部CT：右肺感染性病變，并空洞形成，縱膈及腋窩淋巴結腫大。

1.2實驗室檢查

①血常規：WBC 1.33×109/L ，RBC 2.73×1012/L，HGB 87g/L。②TBAb陽性，痰涂片抗酸染色鏡檢，未找到抗酸桿菌。肺炎支原體抗體陰性，肺炎衣原體抗體陰性，血沉53mm/h，甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒抗體陰性，肥大反應試驗陰性。

1.3微生物學檢驗

血培養48h有細菌生長，直接涂片革蘭染色陽性。接種哥倫比亞血瓊脂、巧克力瓊脂、沙保羅培養基，放置35℃含5%的二氧化碳培養箱培養，SDA培養基放35℃培養箱培養。35℃ 24h形成典型濕潤的、黏液樣、不透明的白色至奶油色菌落,1周后轉淡黃或棕黃，濕潤黏稠，狀似膠汁。

圖1 革蘭染色 (×100) 圖2 墨汁負染色(×40)

取菌落涂片革蘭染色，為圓形和卵圓形，菌體直徑一般在2～15μm，大者直徑可達20μm，革蘭染色陽性,見圖1。墨汁負染色：取菌落涂片與1滴墨汁混合，加蓋玻片后鏡檢，可見圓周形或者卵圓形芽生孢子，但無真、假菌絲。菌體外有寬厚莢膜，莢膜是菌體的1～3倍，可見圓形菌體，外繞有一寬闊的空白帶(莢膜)，見圖2。

1.4生化反應

脲酶試驗陽性、氧化酶試驗陽性、硝酸鹽還原試驗陰性，可使石蕊牛乳堿化，可同化葡萄糖、麥芽糖、果糖、甘露醇、蔗糖、肌醇，不同化乳糖，不發酵葡萄糖、麥芽糖、乳糖，不能利用硝酸鉀。商品API20C AUX板條 (梅里埃) 鑒定(見表1)。

表1 API20C AUX生化試驗

推薦性鑒定結果 ：新生隱球酵母菌鑒定百分率99.9%，典型指數0.84。

2 討 論

新型隱球菌侵犯人體以中樞神經系統最易受累，并常在腦室及大腦導水管周圍的灰質處呈占位性病變[1]。確診要靠病原學證據，腦脊液墨汁染色或培養找到隱球菌，多次檢查后可提高陽性率。新型隱球菌一般為外源性感染，但也可致內源性感染，對人類而言，它通常是條件致病菌。該病的發生與宿主的免疫狀況、隱球菌菌株的毒力等有關。機體感染途徑以吸入空氣中的孢子為主，隱球菌孢子到達肺部，可引起肺部感染，但常為無癥狀感染，此時隱球菌可被機體清除，也可能隱藏在肉芽腫中。根據機體的免疫狀況，由肺經血液播散時可侵犯所有臟器組織，主要侵犯肺、腦及腦膜，引起慢性腦膜炎，也可侵犯皮膚、骨、關節和心臟等部位。該病好發于細胞免疫功能低下者，如艾滋病(AIDS)、糖尿病、惡性腫瘤患者、器官移植及大劑量使用糖皮質激素者。臨床最常見的為亞急性或慢性腦膜炎，肺部感染其癥狀類似肺結核,應用墨汁染色可以幫助鑒別診斷。一般臨床上比較重視從CSF標本中查找新型隱球菌，從血液中發現者較少。本例從血培養中發現新型隱球菌也是因藥敏實驗對所有青霉素類甚至萬古霉素均耐藥，才考慮到是否為真菌感染，于是重新進行革蘭氏染色鏡檢，并行墨汁負染色，無論從形態、染色特點、生化特性還是臨床表現，結合此病人是確診AIDS患者，都符合新型隱球菌感染的診斷。本病一經確診，需立即抗真菌治療，用藥途徑和療程需要個體化，聯合用藥具有明顯的治療效果。目前在臨床上二性霉素B使用較多，也是藥效最好的抗真菌類藥物。它能選擇性地與真菌細胞膜上的麥角甾醇發生作用，增加細胞膜的通透性，使菌體內物質向外滲出，最終造成真菌死亡。停藥指征為臨床癥狀及體征基本消失、腦脊液常規檢查正常、每周1次墨汁染色找隱球菌連續3～4周陰性。對于部分顱內壓增高患者可采用甘露醇及呋塞米降顱壓，嚴重腦積水患者可行腦脊液分流術，并加強營養支持[2]。

[1]張利成，林亞明.新型隱球菌性腦膜炎的診治進展[J].云南醫藥，2009,30(6)：683-687.

[2]張齊龍.持續腰池腦脊液引流治療隱球菌性腦膜炎的臨床探討[J].第四軍醫大學學報,2005,26(13):1247-1248.

[編輯] 何 勇

10.3969/j.issn.1673-1409(R).2012.11.030

2012-06-26

袁霞(1977-)，女，湖北石首人，主管技師，主要從事臨床檢驗工作。

R379.5;R446.5

A

1673-1409(2012)11-R062-02