丙種球蛋白對川崎病患兒血清TNF－α表達的影響

郭錦均， 陳建江

(廣東省東莞市太平人民醫院兒科， 廣東 東莞 523900)

川崎病(Kawasaki disease，KD)是一種病因不明的小兒急性發熱性疾病，又名皮膚粘膜淋巴結綜合征，以發熱和免疫系統過度活化為特征，常伴有冠狀動脈損害，冠狀動脈瘤是其最嚴重的并發癥［1］。腫瘤壞死因子－α(TNF－α)主要是由單核巨噬細胞分泌的具有廣泛生物活性的細胞因子，在細胞功能調節、免疫及炎癥反應中起重要作用。目前研究發現，是冠狀動脈損傷的始動因素［2］。本文采用丙種球蛋白對KD進行治療，探討血清TNF－α在小兒KD中的表達變化，并了解其與冠狀動脈損傷、KD病情及預后的關系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料:選擇2008年6月至2010年6月我院診治的KD患兒46例，均符合美國心臟協會(AHA)制定的KD診斷標準［3］。其中男28例，女18例;年齡5個月－6歲，平均3.2歲。所有KD患兒入院前均未接受過靜脈注射丙種球蛋白(IVIG)的治療，于治療前行超聲心動圖觀察冠狀動脈的情況，并依據有無冠狀動脈損傷分為損傷組20例和無損傷組26例;另外隨機選擇30例年齡相仿的健康兒童作為對照組。其中男20例，女10例;年齡6個月－6歲，平均3.1歲。兩組患兒性別、年齡等一般情況之間均無顯著差異，具有可比性(P＜0.05)。

1.2 治療方法:所有KD患兒均給予IVIG治療，總量為2g/Kg。分別采集KD患兒于治療前、治療后第10天及對照組小兒清晨空腹靜脈血2mL作為標本，于常溫3000r/min離心10min，取上清液1mL置于－80℃冰箱待用。采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)測定患兒血清TNF－α水平，試劑盒購自晶美生物工程有限公司，酶標儀為Alisei全自動酶標儀。

1.3 統計學方法:采用SPSS17.0統計分析軟件進行統計分析，計量資料以均數±標準差(±s)表示，組間比較采用成組設計的t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 KD急性期血清TNF－α與對照組比較 :KD急性期血清TNF－α與對照組比較，見表1。KD患兒急性期血清TNF－α表達水平顯著高于對照組(P＜0.05);與無冠狀動脈損傷組比較，冠狀動脈損傷組血清TNF－α表達水平升高更顯著(P＜0.05)，結果均有統計學意義。

表1 KD急性期血清TNF－α與對照組比較(ug/L，±s)

表1 KD急性期血清TNF－α與對照組比較(ug/L，±s)

注:與無損傷組比較，*P＜0.05;與對照組比較，#P＜0.05

組別 KD無冠狀動脈損傷組KD冠狀動脈損傷組 對照組TNF－α 2.87±0.54* 1.64±0.44*# 0.78±0.34

2.2 IVIG治療前后KD患兒血清TNF－α表達水平的比較:IVIG治療前后KD患兒血清TNF－α表達水平的比較，見表2。經IVIG治療后兩組KD患兒血清TNF－α表達水平均顯著減低，接近正常對照組，結果具有統計學意義(P＜0.05)。

表2 IVIG治療前后KD患兒血清TNF－α表達水平的比較(ug/L，±s)

表2 IVIG治療前后KD患兒血清TNF－α表達水平的比較(ug/L，±s)

注:與治療前比較，*P＜0.05

組別 KD無冠狀動脈損傷組KD冠狀動脈損傷組治療前 2.87±0.54 1.64±0.44治療后 0.90±0.52* 0.84±0.42*

3 討論

KD的主要病理改變為全身性非特異性血管炎。病程早期為全身微血管炎，約2周后表現為主動脈分支的動脈內膜炎和動脈周圍炎，尤其是冠狀動脈多易受累，其最主要的并發癥是冠狀動脈擴張、瘤樣形成、狹窄或血栓形成。經IVlG治療后仍有3%－8%冠狀動脈損傷發生率，約4%發展為成人期缺血梗死性心臟病［4］。KD的發生機制尚未明確，并且KD冠狀動脈損傷的發生機制亦未完全清楚。TNF－α是由單核巨噬細胞產生的具有廣泛生物活性的多肽調節因子，與機體炎癥有著極為密切的關系，也是KD急性期最主要的炎性因子之一，在KD急性期炎癥反應嚴重性的判斷方面，TNF－α的表達水平可作為一個有意義的參考指標。有研究發現TNF－α與冠狀動脈病變關系密切［5］。

本研究結果顯示KD患兒急性期血清TNF－α表達水平顯著高于對照組(P＜0.05);與無冠狀動脈損傷組比較，冠狀動脈損傷組血清TNF－α表達水平升高更顯著(P＜0.05)，結果均有統計學意義。經IVIG治療后兩組KD患兒血清TNF－α表達水平均顯著減低，接近正常對照組，結果具有統計學意義(P＜0.05)。以上表明TNF－α參與KD的病理生理過程，且與冠脈損傷密切相關，考慮與TNF－α主要作用于血管內皮細胞，增加粘附分子如ICAM－1等表達，誘發血小板活化分子及白介素－1的釋放從而促進炎癥細胞粘附、游走、浸潤和中性粒細胞脫顆粒、抗纖溶反應等，并在動脈粥樣硬化、血栓形成等疾病發生發展中起重要作用有關，其次TNF－α對血管內皮細胞可以產生直接的細胞毒作用，導致其損傷，而血管內皮細胞的損傷又可以促進TNF－α的釋放和表達，產生惡性循環，加重血栓的形成等［6］。

有文獻報道IVIG治療KD已作為首選治療［1］，其機制可能與IVIG參與防治冠狀動脈損傷有關。本研究結果表明經IVIG治療后兩組KD患兒血清TNF－α表達水平均顯著減低，說明IVIG可以抑制KD患兒血清TNF－α對血管內皮細胞損傷作用，從而減輕內皮細胞的損傷，進一步使TNF－α釋放減少，從而增強了內皮細胞抗凝的作用，血栓則不易形成。

［1］Satou GM，Giamelli J，Gewitz MH.Kawasski disease:diagnosis，management and long－ term implications［J］.Cardiol Rev，2007，15(4):163.

［2］Hui－Yuen JS，Duong TT，Yeung RS.TNF－alpha is necessary for induction of coronary artery inflammation and aneurysm formation in an animal model of Kawaaki disease［J］.Immunol，2006，176(10):6294.

［3］Freeman AF，Shulman ST.Kawasaki Disease:Summary of the American Heart Association Guidelines［J］.Am Fam Physician，2006，74(7):1141.

［4］Baer AZ，Rubin LG，Shapiro CA，et al.Prevalence of coronary lesions on the initial echocardiogram in Kawasaki ayndrome［J］.Arch Pediatr Adolesc Med，2006，160(7):686.

［5］孫興珍，田向陽.川崎病患兒治療前后血清腫瘤壞死因子－α的變化及其意義［J］.中國婦幼保健，2008，23(36):5217－5218.

［6］Okada Y，Ikeda K，Yamanaka O，et al.TNFalpha suppression of corneal epithelium migration［J］.Mol Vis，2007，14(13):1428.