芳香療法對大鼠偏頭痛療效的實驗研究

第四軍醫大學基礎部教學實驗中心 （西安710032）

孫湘桐 蔡國洪 陳健康 于軍 張海鋒 趙玉峰 鐵 茹▲

偏頭痛是臨床常見多發病，以反復發作的偏側或雙側頭痛為特征，主要是遺傳特征和內外因素作用的結果［1］。目前關于偏頭痛的發病機制研究尚無定論，針對偏頭痛的防治手段也各有利弊，而該病的發病率仍居高不下，國內外患者所付出的物質或精神方面的代價也相當巨大，因此防治偏頭痛藥物研究成為當今醫學研究的一項熱點。在研究偏頭痛的過程中人們發現，某些嗅覺刺激會誘發偏頭痛，一些患者在偏頭痛發作的先兆期也會出現嗅幻覺。美國芝加哥市味覺與嗅覺基金會一項研究證明：聞蘋果香可以有效緩解偏頭痛。專家分析這主要是因為偏頭痛與嗅覺會相互影響。基于以上的觀點，我們認為通過嗅覺刺激來治療偏頭痛具有廣闊的天地。

硝酸甘油型偏頭痛模型在國內外均有報道，此模型方法簡單經濟，機制單一，可在短期內大量復制［2，3］。本實驗用SD大鼠進行硝酸甘油偏頭痛動物模型制作，用適宜氣味刺激，探討嗅刺激治療偏頭痛臨床治療的可行性，希望對臨床偏頭痛提供多樣的個體化和低副作用的治療方法。

材料和方法

1 動物及分組 24只SD大鼠，雄性，體重200±20g（由第四軍醫大學動物實驗中心提供），隨機分為四組，每組6只，分別為模型對照組、天舒膠囊治療組、氣味治療組、空白組。

2 實驗試劑 天舒膠囊1盒（每粒0.34g，臨用前用蒸餾水配成3.74g／100 ml）［4］、硝酸甘油注射液，每支5 mg／ml（由北京益民藥業有限公司提供，批準文號：國藥準字 H11020289）、小磨芝麻香油1瓶（250 ml）、香葉醇百里香1瓶（5.75 ml）、青蘋果氣味香水1瓶（DEMETER香水）。

3 實驗方法

3.1 SD大鼠偏好氣味篩選：將24只SD大鼠隨機分為四組，每組6只，編號為A、B、C、D。A組聞香葉醇香精，B組聞青蘋果香味香水，C組聞芝麻香油，D組聞燒焦的頭發。將香葉醇香精、青蘋果味香水、芝麻香油均勻噴涂在脫脂棉球上，放在鼠籠上進行香味刺激，觀察記錄每只大鼠在10 min內聞氣味的次數，通過次數的多少來篩選大鼠偏好的氣味。

3.2 建立硝酸甘油偏頭痛模型：將上一步使用過的大鼠再隨機分為四組，分別為模型對照組、天舒膠囊治療組、氣味治療組、空白組。天舒膠囊治療組提前3d灌胃天舒膠囊溶液1次1 ml／100g體質量；空白組皮下注射生理鹽水10 mg／kg；模型對照組、天舒膠囊治療組及氣味治療組大鼠皮下注射硝酸甘油注射劑10 mg／kg，建立硝酸甘油偏頭痛模型，前三組出現雙耳發紅、前肢頻繁搔頭、爬籠次數增多證明造模成功［5］，第四組不出現任何癥狀。

3.3 施加氣味刺激：在造模30 min后，模型對照組灌胃蒸餾水10 ml／kg，天舒膠囊治療組灌胃天舒膠囊1次1 ml／100g體質量，氣味治療組給予大鼠喜好的的氣味刺激。

3.4 觀察方法：造模30 min后觀察各組大鼠撓頭、爬籠情況。撓頭是觀察大鼠造模后撓頭出現和消失的時間。撓頭出現時間以大鼠出現連續撓頭次數達5次以上為標志，消失時間以一個時間段中大鼠撓頭次數少于5次并出現倦怠、疲乏的表現為標志。從造模后每30 min作為一個時間段，采用持續時間分段計數方法觀察大鼠造模后在每一時間段撓頭、爬籠的次數。

4 統計學處理 數據采用SPSS 15.0統計軟件進行分析。

結 果

1 經過篩選實驗 發現大鼠在10 min內聞香葉醇、青蘋果香及芝麻油香的次數都明顯多于聞燒焦的頭發，并且對于前三種氣味會反復嗅聞，對于燒焦的頭發則沒有此種情形。因此確定香葉醇香、青蘋果香、芝麻油香作為SD大鼠的喜好氣味用于后續實驗。

2 爬籠次數 氣味治療組與模型組在0-30 min、60-90 min、90-120 min、120-150 min時段內有統計學意義（P＜0.05），結果見表1。

表1 大鼠不同時間段爬籠次數

3 撓頭次數 空白組只在少數幾個時間段內有偶發的一兩次撓頭。而模型組、藥物治療組、氣味治療組在造模后開始出現頻繁的撓頭。經統計后發現，氣味治療組與模型組只有在150-180時段內具有統計學意義（P＜0.05）。由于氣味的刺激，大鼠的撓頭現象和爬籠現象并不同步，結果見表2。

表2 大鼠不同時間段撓頭次數

4 撓頭的出現時間和消失時間 氣味治療組與模型組差異不具有統計學意義，表明氣味治療并不能減短病程，結果見表3。

表3 2組療效比較

討 論

由于硝酸甘油在血管壁通過酶或非酶的生物激活途徑生成一氧化氮（NO），NO強烈地擴張腦血管，造成無菌性炎癥而誘發偏頭痛。NO具神經毒性作用，可激發三叉神經-血管反射，引起腦血管擴張，產生偏頭痛［6］。通過建立SD大鼠硝酸甘油偏頭痛模型，隨機分組后給予不同的治療方法，記錄爬籠次數和撓頭次數，發現氣味治療組比模型組爬籠次數明顯減少，而與藥物治療組效果相當，表明給予大鼠適宜的氣味刺激對大鼠的偏頭痛癥狀有所緩解。說明氣味刺激對大鼠偏頭痛的緩解有一定的功效。這是因為嗅覺與其他行為相互作用，構成嗅覺參與腦功能影響的復雜過程［7］。鼻腔黏膜的嗅上皮含有嗅感覺神經元（OSN），在OSN膜上存在G蛋白耦聯嗅覺受體（OR），當氣味與特異性的OR結合后，引出嗅覺感受器電位，由嗅感覺神經元的軸突傳遞至嗅球，嗅球又將信號通過嗅束投射到初級嗅皮質。這樣嗅覺感受器、嗅球和大腦嗅覺中樞就三位一體地形成了嗅覺感受和傳導路線。這種復雜的途徑和通路可能是嗅覺調控和影響許多重要腦功能的基礎，這也正是適宜氣味刺激緩解偏頭痛的基礎。

偏頭痛與掌管人情緒、記憶等的大腦邊緣系統關系密切，適宜氣味通過神經傳遞給邊緣系統，良好的體驗使邊緣系統得以整合患者的情感，減輕患者頭痛時的焦慮情緒，并分散注意力，使頸部、頭部肌肉由緊張收縮變得松弛，從而起到鎮痛作用［8］。實驗發現氣味刺激對SD大鼠偏頭痛模型的爬籠癥狀有所緩解，但是對撓頭及病程并沒有明顯的緩解作用，說明適宜氣味對SD大鼠偏頭痛具有一定的緩解效果，但不能縮短病程。

通過不斷重復實驗鞏固強化，可能會建立起一種嗅覺反射，即施加一種適宜的氣味刺激可以明顯緩解偏頭痛，各項檢測指標與相同氣味第一次刺激時具有顯著差異。這種可能性有待進一步研究，希望為臨床治療偏頭痛提供一種簡便、有效、實惠的方式，

［1］趙永烈，王愛成，陳錦鋒等.硝酸甘油型偏頭痛模型評述.中國康復理論與實踐，2005，6（11）：455-456.

［2］Cristina T，Rosaria G，Wang DC，etal.Nitroglycerin induces hyperalgesia in rats-ati me-course study［J］.Eur J Phar macol，2003，464（2）：159-162.

［3］龍 軍，方泰惠.實驗性偏頭痛動物模型研究進展［J］.中風與神經疾病雜志，2003，20（2）：187-188.

［4］楊德功，劉紅權，黃厚才，等.鼻療法噴劑對偏頭痛大鼠模型5-HT、NO、多巴胺含量的影響.中國實用醫藥，2008，3（24）：81-83.

［5］付先軍，宋旭霞，周永紅，等.硝酸甘油型實驗性偏頭痛大鼠模型行為癥狀學評價［J］.中華神經醫學雜志，2005，4（5）：449-451.

［6］周永紅，王新陸，胡懷強，等.逍遙滴鼻液對實驗性偏頭痛模型大鼠行為癥狀的影響［J］.中國比較醫學雜志，2005，15（3）：157-160.

［7］汪 莉，韓春庚，楊愛紅，等.薰衣草精油通過嗅覺通路對大鼠血壓的影響.安徽醫科大學學報，2009，44（2）：221-223.

［8］任永欣，彭 成，姚 于.頭風飲對實驗性偏頭痛動物模型c-f0s、c-jun基因表達的影響［J］.成都中醫藥大學學報，2000，23（3）：34-36.