日糧維生素E水平對夏季高溫環境下肉仔雞免疫機能的影響

徐秋良，朱寬佑，劉永祥，姜東鳳，程 偉

（鄭州牧業工程高等專科學校畜牧工程系，河南 鄭州450011）

缺乏降溫設施以及高密度飼養使中小型肉雞場在夏季高溫季節面臨熱應激的危害。熱應激不僅降低肉雞采食量、日增重和飼料轉化率［1］，甚至引起機體免疫抑制，使肉仔雞死亡率升高。研究表明，熱應激損傷腔上囊、淋巴結等免疫器官［2］，降低血液中IgG水平和外源的抗體滴度［3］，并降低外周血T、B淋巴細胞轉化率［4］。其主要原因是熱應激使細胞線粒體活性氧自由基增加，導致氧化和抗氧化系統失衡，引起機體脂質過氧化，損傷蛋白質、DNA和生物分子［5］。

實際生產中，維生素E的抗氧化作用和免疫增強作用已得到廣泛應用［6－7］，但在熱應激條件下的應用研究報道不多。本試驗在熱應激下探討維生素E免疫增強效果及適宜添加劑量，為維生素E在夏季肉仔雞日糧添加量提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 從開封正大有限公司購進AA肉仔雞400只，分成4個處理組，每組5個重復，每重復20只（公母各半）。對測定不同指標的試驗雞進行標記，避免個體差異對試驗結果的影響。

1.2 試驗日糧 按美國NRC（1994）肉雞營養需要標準配制玉米－豆粕型基礎日糧，維生素E的添加量分別為20、50、100、150mg／kg，維生素 E為 Roche之dl－α－生育酚醋酸酯。

1.3 免疫程序及途徑 7日齡，北京華都公司新城疫Ⅳ系苗3頭份／只，滴鼻；14日齡，北京華都公司腔上囊弱毒苗3頭份／只，飲水；25日齡，北京華都公司新支二聯苗3頭份／只，飲水。

1.4 飼養管理 試驗雞采用單層籠養，粉料投喂，自由飲水與采食。試驗在夏季進行，試驗期雞舍平均溫度在30℃～35℃。

1.5 測定指標

1.5.1 抗體效價 3、6日齡于大群中隨機挑選15只雞，心臟采血，離心分離血清，測定新城疫（ND）母源抗體。9日齡開始到49日齡每組重復標記10只雞，翅靜脈采血，血樣置于37℃溫箱1h，析出血清，4℃保存備用。采用血清倍比稀釋法，紅細胞凝集抑制（HI）試驗測定新城疫（ND）抗體效價，取血清稀釋倍數的log2作為統計數據［8］。

1.5.2 淋巴細胞α－醋酸萘脂酶陽性百分率 各重復標記3只雞，于10、14、2 1、28、35、4 2、49日齡心臟采血1mL／只，加入 Hank＇s液1mL，輕輕滴加于離心管中的2mL淋巴細胞分層上（比重為1.007±0.001），以2 000r／min離心30min。洗滌后，加少量Hank′s液，搖勻，制片、固定、染色、復染、鏡檢。

1.5.3 免疫器官指數 胸腺、脾臟、腔上囊指數按以下公式計算：免疫器官指數＝（免疫器官重／宰前活重）×100%

1.6 數據處理 應用SAS軟件對各處理數據進行統計比較分析，Duncan′s法多重比較。

2 結果與分析

2.1 免疫器官指數 由表1可以看出，與20mg／kg組相比，50、100mg／kg日糧維生素E顯著提高肉仔雞49日齡脾臟、腔上囊指數和胸腺指數（P＜0.05），50、100mg／kg之間脾臟和腔上囊指數差異不顯著（P＞0.05）。150mg／kg組49日齡脾臟、腔上囊及胸腺指數顯著高于其余處理組（P＜0.05）。日糧添加維生素E 150mg／kg有利于提高夏季高溫季節肉仔雞的免疫器官增重。

表1 肉仔雞免疫器官指數

2.2 抗體效價 3日齡檢測肉仔雞ND母源抗體水平為6.1，6日齡為5.2，由于各組ND抗體受母源抗體的影響，起始抗體效價不同，因此用抗體的提高程度，即各處理組不同日齡的抗體效價與9日齡的抗體效價差值表示。從表2中可以看出，與20 mg／kg組相比，日糧添加50mg／kg組維生素E在夏季高溫環境下對肉仔雞ND抗體水平沒有明顯的提升作用，僅在12日齡時高于20mg／kg組（P＜0.05）。與20mg／kg相比，日齡添加100mg／kg與150mg／kg維生素E明顯促進肉仔雞ND抗體水平，其中，9、12、16、19、25、28、38、41、44日齡達到顯著水平（P＜0.05）。100mg／kg組與50mg／kg組在整個試驗期間對ND抗體的影響差異不顯著，只有16、38日齡時100mg／kg組顯著高于50mg／kg組（P＜0.05）。與50mg／kg相比，日糧添加150 mg／kg維生素E提高肉仔雞16、25、38日齡和44日齡ND抗體水平（P＜0.05）。

表2 肉仔雞新城疫抗體效價（log2）

分析各處理組ND抗體變化規律可知，試驗中維生素E添加量不影響高溫季節肉仔雞抗體總體變化規律，在12、25日齡時，20mg／kg組ND抗體效價明顯低于保護臨界值3log2，而50、100mg／kg組和150mg／kg組ND效價在試驗全期均高于保護臨界值。

本試驗表明，在高溫環境下日糧添加維生素E提高肉仔雞 ND抗體效價，50、100、150mg／kg添加量可降低肉仔雞感染新城疫的風險，添加量以150 mg／kg為宜。

2.3 淋巴細胞α－醋酸萘脂酶陽性百分率 見表3，與20mg／kg組相比，50mg／kg添加量提高肉仔雞21、28日齡淋巴細胞陽性百分率（P＜0.05）。在整個試驗期，100、150mg／kg除14日齡外，淋巴細胞陽性百分率均高于20mg／kg組；而100、150mg／kg組間在試驗全期均差異不顯著（P＞0.05）。

表3 肉仔雞淋巴細胞α－醋酸萘脂陽性百分率

因此，就淋巴細胞陽性率而言，在夏季高溫環境下，肉仔雞日糧添加100mg／kg維生素E較適宜。

3 討論

為提高研究結果的實用性，本試驗沒有設置0 mg／kg日糧組，主要考慮到NRC（1994）標準、部分前人研究結果及實際生產中維生素E的用量。此外，對于夏季環境高溫，試驗沒有采用人工溫控措施，也是為了模擬中小型養雞戶的生產實際。

夏季高溫時，可在雞舍內安裝降溫系統緩解高溫對肉仔雞生長的影響，降低死亡率，因投資成本較高，降溫系統在中小型養雞戶中并不普遍。因此，使用添加劑緩解熱應激，提高肉仔雞抗病力是目前我國中小型肉雞養殖場夏季提高生產效益的有效途徑。

維生素E具有清除氧自由基，緩解細胞、組織的氧化損傷的功能，作為抗氧化劑和免疫增強劑，維生素E已經在肉雞生產中得到廣泛應用。但有關維生素E適宜的添加量方面的報道結果不盡相同。典型的肉仔雞日糧維生素E的添加量大致為20～30mg／kg［9］，陳艷君等［10］（2008）報道，肉仔雞日糧添加15IU／kg維生素E可獲得最佳生產性能和免疫力，但1 500IU／kg降低肉仔雞免疫力。Friedman等（1998）［11］在肉仔雞日糧中添加0、10、30、150 mg／kg的維生素E研究其對免疫機能的影響，結果表明，30、150mg／kg組抑制肉仔雞的免疫機能。劉鈾等（1999）［12］在肉仔 雞 日 糧 中 添 加 0、100、200 mg／kg及300mg／kg維生素E表明，隨著添加劑量的升高，30日齡肉仔雞淋巴細胞轉化率和ND抗體效價顯著上升，高劑量增強肉仔雞的免疫機能。

本研究結果表明，日糧中添加50、100、150mg／kg維生素E，不同程度的提高肉仔雞的ND抗體效價和淋巴細胞陽性百分率，綜合比較，150mg／kg效果較好，沒有出現免疫抑制作用，這可能緣于與適宜溫度相比，高溫產生的氧化應激提高了維生素E的需要量。

腔上囊、脾臟和胸腺是肉仔雞的主要免疫器官，是免疫細胞分化產生的場所。維生素E能促進脾臟細胞分裂、當維生素E缺乏時家禽胸腺、腔上囊和脾臟發育受損［13］。研究表明，在熱應激條件下，免疫器官的受損程度與氧自由基活性和丙二醛濃度高度相關，為高溫環境下造成的機體氧化應激所致［14］。因此，為維持免疫器官的正常功能，夏季高溫時肉仔雞對維生素E的需要量增加。

本研究表明，與20mg／kg相比，50、100、150 mg／kg的維生素E添加量顯著提高免疫器官指數，150mg／kg組效果最好。因此，綜合肉仔雞的ND抗體效價、淋巴細胞陽性百分率和免疫器官指數，在本試驗條件下，夏季高溫時肉仔雞日糧維生素E適宜添加量為150mg／kg。

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