西藏林芝某雞場雞新城疫抗體水平檢測

徐業芬，商 鵬，王宏輝，田飛鵬，李 鵬，強巴央宗

（西藏農牧學院動物科學學院，西藏 林芝860000）

雞新城疫（newcastle disease，ND）是由新城疫病毒（newcastle disease virus，NDV）引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，雞群一旦傳入該病常呈毀滅性流行，在短期內可使未免疫雞全部感染發病而死亡，該病一年四季均可發生，危害極大，其主要特征是呼吸困難，嚴重腹瀉，全身呈敗血癥變化，黏膜和漿膜出血，病程稍長的伴有神經癥狀［1－2］。接種疫苗是有效預防本病的有力措施，由于受多種因素影響，疫苗免疫有時不能取得理想的保護水平。為監測西藏林芝縣百巴鎮章巴養雞場新城疫抗體水平，2011年4月～8月對該養雞場的新城疫抗體進行血清學監測，以有效評估雞群的免疫狀態，報告如下。

1 材料與方法

1.1 血樣采集 在西藏林芝縣百巴鎮章巴養雞場經免疫接種的雞群中隨機抽樣，翅下靜脈采血，每只2mL，先后共采集血樣121份，置于冰盒中2h內帶回實驗室。

1.2 血樣處理 采集血樣待血清析出后，2 000r／min離心10min，取上層血清編號，保存于干凈的離心管中，置于4℃下保存，2d內完成檢測。

1.3 儀器與試劑 96孔微量板、微量加樣槍、微型震蕩器、離心機、恒溫培養箱；生理鹽水、3.8%枸櫞酸鈉抗凝劑、1%雞紅細胞懸液為本實驗室自制。雞新城疫標準抗原、陽性血清，購自中國獸醫藥品監察所。

1.4 試驗方法

1.4.1 配制1%紅細胞懸浮液 隨機選取1只成年雞，從頸靜脈采血20mL并與枸櫞酸鈉抗凝劑充分混勻后取10mL血液和90mL生理鹽水共同加入一個大離心管中進行3 000r／min離心5min，棄上清液，以上操作重復3至4次。操作完畢之后，以微量加樣槍吸取5μL的紅細胞加入495μL生理鹽水中，充分混勻，即制成1%紅細胞懸浮液。

1.4.2 抗體效價的測定方法 血凝抑制試驗（HI）：微量反應板的每一孔內加入生理鹽水25μL，取4倍稀釋的待檢血清25μL，從第1孔開始，依次作倍比稀釋至最后1孔，最后一孔棄除混合液25 μL。將雞新城疫標準抗原（4U）25μL加入以上每孔中；同時，設抗原、陽性血清和稀釋液3個對照，放微量振蕩器上搖勻，混勻后置37℃培養箱內30 min后，每孔加入1%雞紅細胞25μL。再放微量振蕩器上搖勻，置37℃培養箱內約30min觀察。

1.4.3 結果判斷 免疫后的HI效價≥5log2為陽性，判定為免疫合格；HI效價＜5log2為陰性，判定為不合格。免疫合格率在70%以上則可判定為免疫合格場。

2 結果與討論

2.1 雞新城疫抗體水平檢測結果 在所檢測的121份血樣中，測得其效價范圍為3～8 1og2，詳細情況見表1。由表1可以看出該雞場新城疫抗體效價≥6log2和≥7log2的分別達到24.79%和50.41%，抗體效價≥5log2為98.35%，說明該雞場免疫合格。

表1 養雞場2011年4～8月新城疫抗體水平血凝抑制試驗檢測結果

2.2 雞場新城疫防制建議

2.2.1 免疫預防 接種疫苗可以提高禽群的特異免疫力，減少NDV強毒的傳播，降低ND造成的損失。在林芝地區一般以6～10日齡首次接種為宜，可以用Ⅰ系苗滴鼻或點眼。在ND流行地區，可以提前1～3d接種，并將劑量加大0.5～1倍。當用ND弱毒疫苗免疫后15d或用油佐劑滅活疫苗注射后21d左右，應檢測免疫效果，確定下一次免疫時間。若有如下情況之一者應及時加強免疫，當10%～20% 的雞HI抗體水平低于1∶15；有呼吸啰音和排綠色糞便，采用抗生素治療無效，又有ND可疑病變雞。加強免疫的方法是：用2～3倍量的Ⅳ系疫苗或Ⅰ系疫苗飲水或肌肉注射，同時肌肉注射ND油佐劑滅活疫苗［3］。

2.2.2 加強日常管理 防制ND是一項十分艱巨和復雜的任務，要采取加強日常的科學管理，防止NDV強毒進入。如防止一切帶毒動物（特別是鳥類、鼠類和昆蟲）和污染物進入禽群；進出的人員和車輛及用具消毒處理；飼料和飲水來源安全；不從疫區引進種蛋和苗雞，新購進的雞隔離觀察2周以上證明健康者，方可合群；科學的飼養管理制度，如全進全出等；禽場的選址、生產的規模等均有利于防止病原體進入［4］。

若發現病雞要及時隔離，對病死雞進行焚燒或深埋，全場立即消毒、清理糞便。此外，雞舍在進雞前應進行徹底消毒，而且進雞后也要定期消毒，并注意如氫氧化鈉等消毒藥選用要科學，濃度恰當，藥量充足，作用時間充分，方能達到徹底消毒的目的。應引起注意的是在用弱毒疫苗免疫前后10d內禁止作飲水消毒［3］。

3 結語

本次試驗的結果表明，該雞場為免疫合格雞場，免疫合格率高于70%，說明在專業技術人員指導下該雞場嚴格按照科學的免疫程序做好了雞群的免疫，可以有效防止新城疫病毒的入侵。

［1］蔡寶祥.家畜傳染病學［M］.北京：中國農業出版社，2001.

［2］鄭明球.家畜傳染病學實驗指導［M］.3版.北京：中國農業出版社，2001.

［3］徐業芬，牛家強，曾群輝.雞非典型新城疫的防制［J］.中國獸醫雜志，2007，43（2）：67.

［4］徐宜為.最新禽病與防制［M］.北京：中國農業科學技術出版社，1993.