CD133和CD44在前列腺癌中的表達及意義

冀 陽，胡新生，郭國營

（河南省新鄉市中心醫院 泌尿外二科，河南 新鄉 453000）

前列腺癌（cancer of prostate）是西方國家發病率較高的惡性腫瘤之一[1]。近年來，隨著我國人民的生活習慣及環境的改變，前列腺癌在我國的發病率呈現逐年增加的趨勢，目前已位居泌尿系統腫瘤的第3位，僅次于膀胱癌和腎癌。因為前列腺癌早期的臨床癥狀較為隱匿，出現臨床癥狀時已有遠處轉移，導致預后不良，是臨床治療的難點。因此，尋找與前列腺癌細胞增殖，轉移等生物學行為相關的靶基因，對于提高前列腺癌的早期和治療方法具有重要的臨床意義，為此本研究對存檔的前列癌標本進行CD133和CD44的檢測，以期為臨床研究結直腸癌的的發病及轉移提理論基礎。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2000年10月～2011年10月在我院確診為膀胱癌并進行手術的患者作為觀察組，共72例。納入標準：①經過病理確認為前列腺癌；②術前患者均未進行激素、化療和放療等治療；③并且所有患者臨床資料包括腫瘤大小、數目、病理分級和臨床分期等均齊全。排除標準：①合并其他器官惡性腫瘤的患者；②伴有消化系統其他疾病的患者。并且選取33例病理證實為正常前列腺組織作為對照組。

1.2 免疫組化染色方法

CD133和CD44試劑均購于武漢博士德生物工程有限公司，SP試劑盒、DAB顯色劑均購于北京中杉金橋生物技術有限公司，嚴格按照試劑盒染色操作程序進行，具體步驟：石蠟切片脫蠟至水后，在 30 mL的 3%H2O2去離子水孵育10min以消除內源性過氧化物酶活性；抗原修復后分別滴加一抗，4℃過夜，PBS沖洗3次；滴加生物素標記的二抗工作液，37℃孵育 30min，PBS沖洗3次；滴加辣根酶標記鏈霉卵白素，37℃孵育 30 min，PBS沖洗3次；DAB顯色；自來水充分沖洗、蘇木復染、脫水透明和常規封片。用PBS代替-抗做陰性對照，操作全過程由同一病理技師完成，以避免人為誤差。

1.3 判斷標準

CD133和CD44結果判斷按照免疫組化染色陽性腫瘤細胞比例和染色強度進行評分，無陽性細胞為0分，＜10%為1分，10%～50%為2分，≥50%為3分，無著色為0分，輕度著色為1分，中度著色為2分，重度著色為 3分，＜3分為陰性（-），≥3分為陽性（+）。

1.4 統計學方法

所有數據均經過專人校隊后輸入計算機，采用SPSS11.5建立數據庫，單因素檢驗采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有顯著性。

2 結果

2.1 兩組患者CD133和CD44表達情況比較

CD133和CD44的在觀察組中的表達表達陽性率均明顯高于對照組，差異均有顯著性（P＜0.01），詳見表1。

2.2 CD133在不同臨床病理指標中的表達的比較

表1 CD133和CD44在病例組與對照組中的表達 例（%）

表2 CD133在不同臨床病理指標中的表達 例（%）

表3 CD44在不同臨床病理指標中的表達

CD133表達與病理分級分期，T分期，遠處轉移等指標密切相關（P＜0.05），而與前列腺癌患者的年齡，腫瘤數目，組織分型無明顯的相關性（P＞0.05），詳見表2。

2.3 CD44在不同臨床病理指標中的表達的比較

CD44表達與病理分級，T分期，遠處轉移，等指標密切相關（P＜0.05），而與前類型癌患者的年齡，腫瘤數目，組織分型無明顯的相關性（P＞0.05），詳見表3。

3 討論

前列腺癌是老年男性常見的惡性腫瘤之一，因其起病隱匿，并且臨床表現與前列腺增并無明顯的區別，常常被誤診為前列腺增生，直到出現尿路癥狀和骨痛才去就診，這時患腫瘤已發生了浸潤或轉移，預后較差。前列腺癌在西方國家癌發病率較高，2008年美國發病率和死亡率分別居男性惡性腫瘤的前兩位[2]。近年來由于我國人民生存環境、飲食結構、生活方式的改變以及人口老齡化的加劇，前列腺癌患者的發病率和死亡率也呈明顯增高趨勢[3]。因此，研究前列腺癌的腫瘤學發生、發展及產生機制，對指導前列腺癌的治療有具有重要意義。

近年來的研究顯示：腫瘤干細胞在許多惡性腫瘤組織中存在，并且在腫瘤的發生和發展，復發及轉移的中發揮著重要作用，其中CD133和CD44是最常見的腫瘤干細胞特征性的表面標志物之一[4-5]，研究顯示：兩種標志物在前列腺癌細胞中存在CD133和CD44的表達，其中CD133主要位于前列腺癌細胞漿和胞膜中，CD44主要表達于前列腺癌細胞膜上，其在前列腺癌組織中有較強的增殖能力、克隆形成能力、致瘤能力[6-7]，但CD133和CD44與前列腺癌病理分級，臨床分期，腫瘤轉移，組織分型等的相關性目前尚不清楚。為此本研究采用免疫組化的方法對72例前列腺癌患者組織中的CD133和CD44進行了分型，結果發現：CD133和CD44都在各級別的前列腺癌組織中均可以見CD133和CD44陽性細胞，并且隨著前列腺癌的分級越高，病理分期越晚，CD133和CD44陽性細胞比例越高，并且有遠處骨轉移及其他器官轉移的患者前列腺癌組織中兩種標記物陽性比例也明顯高于未發生轉移的前列腺癌患者，這說明CD133和CD44與前列腺癌病理分級，臨床分期，腫瘤轉移密切相關，以往對于前列腺癌的實驗室診斷主要依靠血清前列腺特異性抗原（PSA）是目前臨床診斷前列腺癌主要方法之一，但存在一定的假陽性，限制了其在前列腺癌的診斷中的應用價值，而本研究顯示CD133和CD44在前列腺癌與良性前列腺組織中的表達差異顯著，并且與與前列腺癌的臨床分期，病理分級，癌細胞轉移密切相關，使CD133和CD44可能成為診斷前列腺癌的腫瘤標記物。但是本研究也存在局限性，未對前列腺癌患者進行隨訪，無法明確CD133和CD44與前列腺癌的預后是否存在相關性。為此，本研究在以后的研究中將重點關注CD133和CD44與前列腺癌長期生存率的相關性。

綜上所述，前列腺癌患者中CD133和CD44異常表達，二者在前列腺癌的發生發展中具有重要作用，并且與前列腺癌的病理分級、臨床分期和癌轉移具有密切相關性。

[1]SINGH P,SRIVASTAVA A.Update in palliative management of hormone refractory?cancer of prostate[J].Indian J Urol,2007,23(1)：43-50.

[2]JEMAL A,SIEGEL R,WARD E,et a1.Cancer statistics[J].CA Cancer J Clin,2008,58(2)：71-96.

[3]葉定偉.前列腺癌流行病學和中國的發展趨勢[J].中華外科雜志,2006,44(6)：362-364.

[3]YE DW.Epidemiology of prostate cancer and the development trend of China[J].Chinese Journal of Surgery,2006,44(6)：362-364.Chinese

[4]M?RG?RITESCU C,PIRICI D,SIMIONESCU C,et al.The utility of CD44,CD117 and CD133 in identification of cancer stem cells (CSC)in oral squamous cell carcinomas (OSCC)[J].Rom JMorphol Embryol,2011,52：985-993.

[5]CHETTY C,VANAMALA SK,GONDI CS,et al.MMP-9 induces CD44 cleavage and CD44 mediated cell migration in glioblastoma xenograft cells[J].Cell Signal,2012,24(2)：549-559.

[6]BOCCON GIBOD L,VAN DER K WAST TH,MONTIRONI R,et a1.Handling and pathology reporting ofprostate biopsies[J].Eur Urol,2004,46：177-181.

[7]MONTIRONI R,VELA-NAVARRETE R,LOPEZ-BELTRAN A,et a1.2005 update on pathology of prostate biopsies with cancer[J].Eur Urol,2006,49：441-447.