大羽鱗毛蕨揮發性成分的GC-MS分析

姬志強，石 磊，李永麗，康文藝

（1.解放軍第155中心醫院，河南開封475003；2.河南大學中藥研究所，河南開封 475004）

大羽鱗毛蕨揮發性成分的GC-MS分析

姬志強1，2＊，石 磊1，李永麗1，康文藝2#

（1.解放軍第155中心醫院，河南開封475003；2.河南大學中藥研究所，河南開封 475004）

目的：分析大羽鱗毛蕨的揮發性成分。方法：采用氣相色譜-質譜聯用技術首次對大羽鱗毛蕨的揮發性成分進行分析和鑒定。色譜柱為HP-5 MS石英彈性毛細管柱（30.0 m×250μm×0.25μm），載氣為高純氦氣（99.999%），流速為1.0 mL·min－1，進樣口溫度為250℃，程序升溫；電離方式為EI源，電離能量為70 eV，離子源溫度為250℃，四極桿溫度為150℃，質量掃描范圍為30～440 amu。結果：從大羽鱗毛蕨根中鑒定出了24個化合物，占根中揮發性成分的97.06%；從其葉中鑒定出了43個化合物，占葉中揮發性成分的88.46%。根和葉有20個共有成分。結論：壬醛有可能是大羽鱗毛蕨的主要香氣成分，2，6-二叔丁基對甲苯酚有可能是大羽鱗毛蕨中主要活性成分。

大羽鱗毛蕨；揮發性成分；氣相色譜-質譜聯用技術

大羽鱗毛蕨（Dryopteris bodinieri）屬于鱗毛蕨科鱗毛蕨屬植物[1]。化學研究表明，該屬植物最重要的化學成分是間苯三酚類化合物，另外還含有萜類和黃酮類化合物[2，3]。目前關于大羽鱗毛蕨的化學成分和揮發性成分均未見有文獻報道，因此本試驗采用氣相色譜-質譜（GC-MS）聯用技術首次分析鑒定了大羽鱗毛蕨的揮發性成分。

1 儀器與試藥

GC 6890 N GC/5975 MSGC-MC聯用儀（美國安捷倫公司）；手動SPME裝置，萃取纖維頭為65μm聚二甲基硅氧烷（PDMS-DVB）（美國Supelco公司）。

C6～C26正構烷烴（美國Alfa Aesar公司）。大羽鱗毛蕨于2006年5月采集于云南西雙版納地區，由西雙版納植物園崔景云高級工程師鑒定為真品，標本存放于河南大學天然藥物研究所（標本號：200605023）。

2 方法與結果

2.1 試驗方法

試驗前先將SPME裝置的萃取纖維頭在GC儀的進樣口老化10 min，老化溫度為250℃，載氣體積流量為1.0 mL·min－1。取陰干大羽鱗毛蕨根和葉各0.7 g，置于5 mL樣品瓶中，蓋上蓋子，插入65μm PDMS-DVB萃取纖維頭，于80℃下頂空取樣30 min后立即取出，在GC儀進樣口（250℃）脫附1 min。

2.2 試驗條件

2.2.1 GC條件 色譜柱：HP-5 MS石英彈性毛細管柱（30.0 m×250μm×0.25μm）；載氣：高純氦氣（99.999%）；流速：1.0 mL·min－1；進樣口溫度：250℃；程序升溫，色譜柱初始溫度為50℃（保持1.0 min），以3℃·min－1升溫至120℃（保持2 min），再以4℃·min－1升溫至210℃（保持10 min）；不分流進樣。

2.2.2 MS條件 電離方式：電轟擊電離（EI）；電離能量：70 eV；離子源溫度：250℃；四極桿溫度：150℃；傳輸線溫度：280℃；電子倍增器電壓：1 765 V；質量掃描范圍：30～440 amu。采用RTLPEST3.L和NIST05.L數據庫進行譜圖檢索。

2.3 保留指數（KI）測定

KI是化學物質在相應類型分離柱中對應正構烷烴的一種比較穩定的性質。只要用于分離的色譜柱性質相同、GC條件相近，同種組分在不同儀器上計算出來的KI值通常為常數。因此，同時考慮分離峰的MS匹配度和KI匹配度可大大提高鑒定結果的準確性。在芳香精油復雜組分鑒定中，該方法在國際上得到普遍認可并被大量使用[4]。

測定方法[5，6]：將色譜正構烷烴樣品（C6～C26）各取等量混合后，按上述GC條件進行色譜分析，測定各正構烷烴的保留時間，然后在完全相同的條件下，對揮發性成分進行分析，測定各組分的保留時間，再根據下述線性升溫KI計算公式計算出各組分的KI值。

式中，KI為Kovats保留指數；tR為被測組分的保留時間；下標x為被測組分符號；下標n和n+1為分別具有n和n+1個碳原子的正構烷烴符號。

2.4 結果

按上述試驗條件操作，得到大羽鱗毛蕨根和葉的揮發油總離子流圖（分別見圖1、圖2），通過計算機檢索和人工解析各峰相應的MS圖，共鑒定出了47個化合物，詳見表1。

表1 大羽鱗毛蕨根和葉揮發油的化學成分Tab 1 Chemical constituents of volatile oil from the roots and leaves of D.bodinieri

續表1Continued tab 1

由表1可知，本研究首次從大羽鱗毛蕨根中分離鑒定了24個化合物，占根揮發性成分總量的97.06%，主要成分有壬醛（11.12%）、2，6-二叔丁基對甲苯酚（9.77%）、十六烷（8.48%）和十五烷（8.34%）；從大羽鱗毛蕨葉中分離鑒定了43個化合物，占葉中揮發性成分總量的88.46%，主要成分有十六烷（6.87%）、十五烷（5.82%）、（E）-2-甲基-2-丁烯醛（4.95%）、6，7，8，9-四氫-1，2，3-三甲氧基-9-甲基-5H-苯并環庚烯（4.60%）和十七烷（4.53%）。其中，有20個化合物同時存在于大羽鱗毛蕨根和葉的揮發性成分中。

3 討論

由表1可知，壬醛在大羽鱗毛蕨根的揮發性成分中含量達11.12%，在葉中含量也為3.25%，而壬醛具有強烈的油脂氣味和甜橙氣息，是調制玫瑰、橙花、香紫羅蘭等香精的主要成分之一，因此也是大羽鱗毛蕨主要的香氣成分[7]。2，6-二叔丁基對甲苯酚俗稱抗氧化劑264，簡稱BHT，是一種用途廣泛、用量較大的通用型酚類抗氧化劑，廣泛用于食品、藥品和化妝品保鮮上[8]。BHT在大羽鱗毛蕨根中的含量為9.77%，在葉中含量為4.04%，提示大羽鱗毛蕨可能具有潛在的抗氧化活性。

在大羽鱗毛蕨葉的揮發性成分中檢測到了角鯊烯（1.58%），而角鯊烯具有較強的生物活性，在血液中有很強的輸送活性氧的能力，可增強機體生理功能、提高免疫力、抵抗紫外線傷害，是性能優良的血液輸氧劑和生物氧化劑[9]。角鯊烯的發現為大羽鱗毛蕨的抗缺氧和抗疲勞作用提供了一定的理論依據。

在大羽鱗毛蕨根和葉的揮發性成分中，烷烴占的比例均較大。飽和的脂肪烴是植物體蠟質的主要成分，對植物起著保護的作用，一旦形成就不再參與物質代謝，是新陳代謝末端的產物[10]。6，10，14-三甲基-2-十五烷酮在大羽鱗毛蕨根和葉中均有存在，該化合物存在于多種植物的揮發性成分中[11～14]，其在植物體內部的作用和藥理作用尚未有文獻報道，值得進一步研究。

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Analysisof Volatile Constituentsin Dryopterisbodinieri by GC-MS

JI Zhi-qiang，SHI Lei，LI Yong-li
（No.155 Central Hospital of PLA，Henan Kaifeng 475003，China）
JI Zhi-qiang，KANG Wen-yi
（Institute of Traditional Chinese Medicine，Henan University，Henan Kaifeng 475004，China）

OBJECTIVE：To analyze the volatile constituents in Dryopteris bodinieri.METHODS：GC-MSwas used to analyze and identify the volatile constituents in D.bodinieri for the first time.HP-5 MSfused-silica capillary column（30.0 m×250μm×0.25 μm）was used with high pure helium（99.999%）as carrier gas，programmed temperature，at the flow rate of 1.0 mL·min－1and injection temperature of 250℃.EI source was applied with electron energy of 70 eV，ion source temperature of 250℃，quadropole temperature of 150℃，mass scan range of 30～440 amu.RESULTS：24 compounds were identified from the volatile constituents in the roots of D.bodinieri，accounting for 97.06%of volatile constituents；43 compounds from the leaves，accounting for 88.46%.There were 20 same compounds.CONCLUSION：Nonanal may be the main fragrance constituents and butylated hydroxytoluene may be the active compound of D.bodinieri.

Dryopteris bodinieri；Volatile constituents；GC-MS

R284.1；R917

A

1001-0408（2012）43-4098-03

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2012.43.26

2011-11-08

2012-04-23）