四君子湯加味對小鼠抗缺氧作用的研究

尹春玲

湖南省南華大學附屬第三醫院藥劑科，湖南衡陽 421900

四君子湯加味對小鼠抗缺氧作用的研究

尹春玲

湖南省南華大學附屬第三醫院藥劑科，湖南衡陽 421900

目的 觀察四君子湯加味在不同缺氧狀況下的抗缺氧作用。 方法 采用小鼠動物實驗，觀察四君子湯加味在常壓缺氧情況下和高壓缺氧情況下對小鼠存活時間的影響。實驗分組采用實驗動物隨機分組法，統計分析采用SPSS 16.0軟件。 結果（1）四君子湯加味在常壓缺氧情況下對小鼠存活時間的影響，根據統計結果可知四君子湯加味低劑量組和高劑量組均可顯著延長常壓缺氧情況下小鼠存活時間，和0.9%NaCl溶液對照組相比較，差異有統計學意義 （P<0.05）；（2）四君子湯加味在高壓缺氧情況下對小鼠存活率的影響，根據統計結果可知四君子湯加味低劑量組和高劑量組小鼠存活率分別為70.0%、85.0%，與0.9%NaCl溶液組比較，均差異有統計學意義（P<0.05）。這說明四君子湯加味不僅在常壓缺氧情況下可明顯延長小鼠存活時間，而且在高壓缺氧情況下提高了小鼠的存活率。 結論四君子湯加味明顯提高缺氧條件下小鼠存活時間和存活率，具有明顯的抗缺氧作用。

四君子湯加味；缺氧；抗缺氧；研究

運動員在運動和訓練中經常會產生缺氧，致使機體耐力下降，因此，提高機體的耐缺氧能力對運動員訓練具有很重要的意義[1]。四君子湯加味出自《曾廣盛方》，由黨參、白術、茯苓、甘草、莪術、三棱和牛膝組成，是健脾益氣的良方，具有“調補正氣，扶正固本，適應原樣”的作用[2]。方中黨參為君，甘溫益氣，健脾養胃；臣以苦溫之白術，健脾燥濕，加強益氣助運之力；佐以甘淡之茯苓，健脾滲濕，苓術相配，則健脾祛濕之功益著，莪術、三棱和牛膝相配伍具有活血行氣止痛之效；使以炙甘草，益氣和中，調和諸藥[3]。七藥配伍，共奏益氣健脾、氣血雙補之功，作為扶正固本的補益方劑，根據理論推測，四君子湯加味對機體耐缺氧能力可能有增強作用，基于這一設想，本研究通過對小鼠在不同缺氧狀況下進行抗缺氧實驗，以觀察小鼠耐受缺氧的能力，并探討四君子湯加味的抗缺氧效果，并對其效果進行評價。

1 材料與方法

1.1 材料

雄性昆明小鼠160只，體重18～22 g。四君子湯加味以黨參、白術、茯苓、甘草、莪術、三棱和牛膝按質量 10∶8∶5∶3∶20∶10∶5配方。黨參先用水浸泡30 min，再與其他藥混合浸泡30 min，然后煎煮30 min，用紗布濾出藥液，再加水煎煮30 min，合并2次藥液，沸水濃縮成生藥量為0.5 g/mL，1.0 g/mL，1.5 g/mL的不同濃度藥液，存放于4℃冰箱待用。

1.2 方法

實驗一：取昆明種小鼠80只，隨機分成4組，每組20只，采用腹腔注射給藥。0.9%NaCl溶液組注射0.9%NaCl溶液12.5 g/kg，四君子湯低劑量組和高劑量組分別注射12.5 g/kg和37.5 g/kg，紅景天組注射12.5 g/kg。30 min后將小鼠放入300 mL廣口磨口瓶中密封 （瓶內放堿石灰15g吸收CO2和H2O，墊濾紙用于吸收尿液），記錄小鼠存活時間，以呼吸停止為指標。

實驗二：取昆明種小鼠80只，隨機分成4組，每組20只。0.9%NaCl溶液組，采用灌胃法每天灌注0.9%NaCl溶液10 g/kg，連續7 d；四君子湯加味低劑量組、四君子湯加味高劑量組和紅景天組，分別采用灌胃法每天灌胃注四君子湯加味10 g/kg、35 g/kg和10 g/kg，連續7 d。第7天給藥60 min后，將各組分別放入加壓倉內，以一定速度抽至預定的加壓條件（58.19～69.999 kPa），保持加壓狀態，待 0.9%NaCl溶液組加壓倉中存活小鼠減至5只時，立即恢復至常壓，記錄各組小鼠存活數、死亡只數，統計存活率。

1.3 統計學方法

采用SPSS 16.0統計軟件進行分析，數據以均數±標準差（±s）表示，計量資料組間比較采用 t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 四君子湯加味在常壓缺氧情況下對小鼠存活時間的影響

見表1。由表1可知四君子湯加味低劑量組和高劑量組均可顯著延長常壓缺氧情況下小鼠存活時間，低劑量組、高劑量組和紅景天組耐常壓缺氧存活時間與0.9%NaCl溶液組比較，差異均有統計學意義（P<0.05）。

表1 四君子湯加味在常壓缺氧情況下對小鼠存活時間的影響

2.2 四君子湯加味在高壓缺氧情況下對小鼠存活率的影響

見表2。由表2可知四君子湯加味低劑量組、高劑量組和紅景天組小鼠存活率分別為70.0%、85.0%和75.0%，與0.9%NaCl溶液組比較，差異均有統計學意義（P<0.05），說明四君子湯加味可提高小鼠在高壓缺氧情況下的存活率。

表2 四君子湯加味在高壓缺氧情況下對小鼠存活率的影響

3 討論

本研究是對小鼠在不同缺氧條件下進行抗缺氧實驗，采用方法簡便易行，實驗結果準確性高，分析軟件選用也較恰當，為四君子湯加味的抗缺氧研究提供了較好范例。本文設計了兩種缺氧情況下的實驗，有針對性地研究了四君子湯加味的抗缺氧作用，四君子湯加味在常壓缺氧情況下可明顯延長小鼠存活時間，在高壓缺氧情況下作用也較為顯著，說明其具有抗缺氧作用，這無疑為四君子湯加味的進一步開發利用提供了客觀依據。有關文獻顯示在特異性心肌缺氧情況下，紅景天苷明顯延長了小鼠的存活時間，并與濃度成量效關系，進一步證明了紅景天苷能減少細胞耗氧，改善心肌氧的供求。此外，紅景天苷對亞硝酸鈉中毒小鼠也有明顯的保護作用，可延長小鼠中毒后的存活時間，為紅景天養生保健方面提供了依據[4-5]。小鼠心肌缺氧和中毒后，組織對氧的利用率明顯下降，極易引起組織損傷，但是紅景天苷能明顯提高存活時間，說明其具備抗缺氧能力。本實驗中，紅景天苷和四君子湯加味均能提高小鼠在缺氧情況下存活時間，紅景天組作為陽性對照，更進一步說明四君子湯加味的抗缺氧作用。也有文獻報道，四君子湯加味能提高小鼠血清SOD、CAT和GSH-Px的活力，降低LPO及血脂含量，起到抗氧化、解毒和抗衰老作用[6-7]。四君子湯加味能不同程度地促進大鼠力竭運動后骨骼肌疲勞的恢復，對力竭大鼠的心肌損傷也有明顯的保護作用[8-9]。四君子湯對缺氧環境所致的心功能損傷和心肌損傷具有明顯的緩解作用[10-12]。本實驗結果和以上研究結果相一致，進一步闡明四君子湯加味具有增強機體抗缺氧能力。

在中醫臨床應用方面，四君子湯加味是作為健脾益氣的代表方劑。本次實驗結果顯示，對照組的存活時間明顯低于四君子湯加味組，紅景天組作為陽性對照組，四君子湯加味組和紅景天組都能延長小鼠存活時間和存活率。這一結果進一步證實了四君子湯加味的抗缺氧作用，為臨床四君子湯加味的研究和開發提供了有力的實驗依據，為四君子湯加味應用于臨床治療和預防保健提供了良好的研發前景。

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The effect of mouse anti-anoxia research of Si Jun Zi Tang Jia Wei

YIN Chunling
Department of Pharmacy,Third Affiliated Hospital of Nanhua University in Hu'nan Province,Hengyang 421900,China

Objective To observe the anti-anoxia of Si Jun Zi Tang Jia Wei under different hypoxic conditions.Methods Used animal experiment to observe mouse's survival time when the mouse was injected with Si Jun Zi Tang Jia Wei under the hypoxic and high hypoxic conditions.The experimental groups used a randomization method of experimental animals,the data analysis used statistical analysis SPSS 16.0 software.Results(1)Si Jun Zi Tang Jia Wei had effect to the survival time of mouse in the hypoxic,the statistical results showed that low dose group and high dose group of Si Jun Zi Tang Jia Wei prolonged the survival time of mouse in the hypoxic,there were significant differences compared to the saline group(P<0.05).(2)Si Jun Zi Tang Jia Wei had effect to the survival rate of mouse in the high hypoxic,the statistical results showed that the mouse survival rate of low dose group and high dose group were 70.0%and 85.0%,there were significant differences compared to the saline group (P<0.05).It illustrated that Si Jun Zi Tang Jia Wei not only significantly prolonged the survival time of mouse in the hypoxic,but also improved the survival rate of mouse in the high hypoxia.Conclusion Si Jun Zi Tang Jia Wei significantly improves the survival time and the survival rate of mouse under the hypoxic conditions,it has obvious effect of anti-anoxia.

Si Jun Zi Tang Jia Wei;Pypoxia;Anti-anoxia;Study

R28

A

1674-4721（2012）11（a）-0005-02

2012-07-06 本文編輯：魏玉坡）