飼料中添加烏賊膏和酵母膏對生魚生長性能和腸道健康的影響

周 萌 朱旺明 汪福保 羅祖征 譚永剛 崔祥東 韋 宏 楊獻秀

(廣州市信豚水產(chǎn)技術(shù)有限公司，廣東廣州 510640)

生魚，學(xué)名雜交鱧，屬于烏鱧和斑鱧的遠緣雜交后代，具有明顯的遠緣雜種優(yōu)勢，如肉質(zhì)好、生長速度快、抗病力強、個體大、病害少、耐運輸?shù)取Ｗ詮纳~苗種成功培育以后，已得到大面積推廣養(yǎng)殖，僅廣東省生魚的養(yǎng)殖面積就超過4 000 hm2，并向江蘇、浙江、湖南、湖北等內(nèi)陸省份不斷延伸，已成為我國一種重要淡水養(yǎng)殖品種。

烏賊膏作為一種飼料原料，對魚蝦有明顯的誘食作用，可提高飼料的適口性和利用率，在水產(chǎn)飼料中有著廣泛的應(yīng)用，市場需求量連年上升。但是由于烏賊膏來源不穩(wěn)定，水分及脂肪含量高，在儲存、運輸?shù)冗^程中極易酸敗變質(zhì)，質(zhì)量控制不好則易影響其使用效果。酵母膏是利用優(yōu)質(zhì)的新鮮啤酒酵母為原料，通過酶解、脫色脫臭、分離和濃縮技術(shù)精制而成的一種新型飼料原料，由于其富含游離氨基酸、小肽、核苷酸、β-葡聚糖、甘露寡糖等小分子營養(yǎng)物質(zhì)，可顯著提高飼料對水產(chǎn)動物的誘食性，改善水產(chǎn)動物消化道菌群，提高營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收率，促進生長[1]。本文將以生魚為研究對象，研究飼料中添加烏賊膏和酵母膏對其生長性能、腸道健康的影響，為生魚實用飼料配方的優(yōu)化提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料

在生魚商品飼料（魚粉33%、豆粕24%、高筋面粉28%、玉米蛋白粉4%、噴霧干燥血粉3%、魚油3%、磷脂油1.5%、磷酸二氫鈣1.5%、預(yù)混料2%）中分別添加1%、2%的酵母膏，1%、2%的烏賊膏及其混合物（1%酵母膏+1%烏賊膏），用面粉和豆粕調(diào)節(jié)飼料粗蛋白含量，使所有飼料等氮（粗蛋白43.23%、粗脂肪8.74%），與對照組共組成6種試驗飼料，制成膨化飼料，于陰涼干燥處保存待用。

1.2 試驗動物和飼養(yǎng)管理

試驗用魚種購自佛山市南海區(qū)某生魚養(yǎng)殖場,于廣州信豚南海淡水研究基地的池塘網(wǎng)箱中暫養(yǎng)兩周,然后挑選規(guī)格整齊、體質(zhì)健康的1 080條生魚隨機放入該池塘的18個同規(guī)格的網(wǎng)箱中(2.0 m×1.5 m×1.5 m),每個網(wǎng)箱60尾魚[初重(73.91±1.44)g/尾]，每個處理3個網(wǎng)箱。試驗期間，每天投喂兩次（10：00和16：00），日投飼率為體重的2%～4%，根據(jù)天氣、水溫、生魚每天的攝食情況進行調(diào)整。試驗期間水溫27～34℃，溶解氧濃度＞5.0 mg/l，氨氮濃度＜0.1 mg/l，亞硝酸鹽氮濃度＜0.005 mg/l。試驗共進行8周。

1.3 取樣與分析測試

試驗結(jié)束前空腹24 h，然后每箱魚分別稱重、計數(shù)，并從每箱中隨機取10尾魚，測量體長、體重、內(nèi)臟重、肝重、腸長、腸重，并取背肌混合樣于-4℃冰箱中保存，用于測定肌肉營養(yǎng)組成。

臟體比（%）=內(nèi)臟重×100/體重；

肝體比（%）=肝臟重×100/體重；

腸體比（%）=腸道重×100/體重；

腸長比（cm/cm）=腸長/體長。

分別采用105℃恒溫干燥法、凱氏定氮法、索氏提取法及550℃灼燒法測定肌肉的干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分含量。

自前腸（離胃下端1 cm處）剪下2 cm左右的腸道組織，迅速放入組織固定液固定，制作組織切片在顯微鏡下觀察，從每個處理切片中選取效果最佳的3張切片拍照記錄，用于腸壁組織結(jié)構(gòu)觀察。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

用統(tǒng)計軟件為SPSS 11.0 for windows進行數(shù)據(jù)的分析統(tǒng)計。試驗數(shù)據(jù)均用“平均值±標準差”表示，經(jīng)過單因素方差分析，使用Duncan's多重比較法分析數(shù)據(jù)之間的差異顯著性，顯著水平為P＜0.05。

2 結(jié)果

2.1 生長性能（見表1）

表1 飼料中添加烏賊膏和酵母膏對生魚生長性能的影響

由表1可見，飼喂不同飼料生魚的增重率依次為：2%酵母膏組＞（1%酵母膏+1%烏賊膏）組＞1%酵母膏組＞1%烏賊膏組＞2%烏賊膏組＞對照組，其中1%和2%酵母膏組、混合組與對照組相比有顯著性差異（P＜0.05）。飼料系數(shù)以2%酵母膏組顯著低于對照組、1%烏賊膏組、2%烏賊膏組和混合組（P＜0.05），其它各組之間差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 形體指標及體組成（見表2、表3）

表2 飼料中添加烏賊膏和酵母膏對生魚形體指標的影響

表3 飼料中添加烏賊膏和酵母膏對生魚背肌營養(yǎng)組成的影響（%）

由表2可見，飼料中添加酵母膏使生魚的肝體比、臟體比、腸體比及腸長比均有不同程度的下降，但臟體比和腸長比在各組之間差異不顯著。2%的酵母膏組的肝體比顯著低于對照組和1%烏賊膏組（P＜0.05），其它各組之間差異不顯著（P＞0.05）；1%酵母膏組腸體比顯著低于對照組、1%烏賊膏組和2%烏賊膏組（P＜0.05），其它各組之間差異不顯著（P＞0.05）。飼料中添加烏賊膏和酵母膏對生魚背肌營養(yǎng)組成的影響見表3。飼料中添加烏賊膏或酵母膏對生魚背肌的干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪及粗灰分含量均沒有顯著影響（P＞0.05），但與其它各組相比，飼料中添加1%和2%烏賊膏背肌的粗脂肪含量略低，粗灰分含量略高。

2.3 腸道組織切片觀察（見圖1）

圖1 飼料中添加酵母膏和烏賊膏對生魚腸道組織結(jié)構(gòu)的影響

由圖1可見，與對照組相比，飼料中添加1%和2%的酵母膏，生魚腸道皺襞的密度和高度明顯增加，幾乎填滿整個腸腔。飼料中添加1%和2%烏賊膏，生魚的腸壁厚度增加，但腸道皺襞的密度減小，以2%烏賊膏組尤為明顯。混合添加組的腸道組織結(jié)構(gòu)特點與2%酵母膏組相似。

3 討論

3.1 飼料中添加酵母膏和烏賊膏對生魚生長性能的影響

飼料中添加酵母膏，生魚的增重率顯著上升。且隨著酵母膏添加量的增加，生魚的增重率有升高的趨勢，這可能是由于酵母膏中所含的多種功能性小分子物質(zhì)的營養(yǎng)作用所致。酵母膏中所含的豐富的氨基酸、小肽及B族維生素是動物生長發(fā)育必需的營養(yǎng)素，所含的核苷酸不僅是遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)，還是蛋白質(zhì)合成必需的中間體，在細胞結(jié)構(gòu)、代謝、能量和功能調(diào)節(jié)等方面具有重要作用。快速生長的動物本身合成的核苷酸無法滿足機體的需要，必須由外源供給[2]。酵母膏中含有的葡聚糖和甘露寡糖對于增強機體的非特異性免疫能力具有重要作用，減少機體為支持免疫應(yīng)答而消耗的營養(yǎng)物質(zhì)，降低免疫應(yīng)答中產(chǎn)物對攝食和生長的抑制作用，從而促進動物的生長。核苷酸、葡聚糖和甘露寡糖對水產(chǎn)動物生長及免疫的促進作用已有大量報道[3-8]。

本試驗中，飼料中添加烏賊膏對生魚的增重率也有一定程度的提高，但與對照組之間差異不顯著，且隨著添加量的升高，生魚的增重率有下降的趨勢。這可能是由于烏賊膏富含水分及不飽和脂肪酸，在儲存、運輸、飼料加工等過程中極易酸敗變質(zhì)[9]，且容易富集重金屬元素鎘[10]，長期添加可能對水產(chǎn)動物的生長造成潛在的危害。根據(jù)國家對漁用配合飼料鎘安全限量（NY5070—2002）的規(guī)定，海水魚及蝦類配合飼料中的鎘含量不得高于3.0 mg/kg，其它漁用配合飼料中不得高于0.5 mg/kg。因此，在使用烏賊膏作為水產(chǎn)飼料原料時，應(yīng)做好品質(zhì)的控制，并在有條件時，就其安全添加量做相應(yīng)的科學(xué)研究。

3.2 飼料中添加酵母膏和烏賊膏對生魚腸道組織結(jié)構(gòu)的影響

動物腸道是營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的主要場所，黏膜皺襞的高低和疏密、腸絨毛的密度與高度等與消化吸收能力密切相關(guān)，腸皺襞和腸絨毛的密度越高、長度越長，則表明單位面積的細胞數(shù)增加，消化吸收功能也增強[11]。而腸壁厚度的增加，則營養(yǎng)物質(zhì)吸收通過的屏障增加，會影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和轉(zhuǎn)運，從而影響動物的生長速度[12]。另外，研究證實，小腸重量減輕、長度變短，避免代償性增生，可減少機體內(nèi)臟器官的維持需要，更有利于生長[12-14]。

本研究結(jié)果表明，隨著飼料中酵母膏添加量的增加，生魚腸壁變薄，腸皺襞和腸絨毛的密度和高度有明顯增加，腸長比和腸體比下降，使腸道的形態(tài)和健康得到改善，這可能也是飼料中添加酵母膏能提高生魚的生長性能的原因之一。至于酵母膏促進腸道健康的原因，可能是于其內(nèi)富含益生元——甘露寡糖有關(guān)。研究表明，甘露寡糖能促進有益菌增殖，改善腸道微生態(tài)，提高機體免疫力，在提高幼齡動物生長、降低死亡率方面有明顯作用。有關(guān)甘露寡糖對促進腸道的發(fā)育、改善腸道微生物菌群、促進生長的作用已在羅非魚[15-16]、鯉魚[17]、虹鱒[18]、異育銀鯽[19]、黃顙魚[8]中得到證實。另外，研究表明，酵母膏中的β-葡聚糖能在腸道微生物的作用下生成短鏈脂肪酸，而短鏈脂肪酸能促進腸黏膜的生長，因此，β-葡聚糖也可通過加強皮膚和黏膜屏障而發(fā)揮作用，并通過增加腸道分泌型IgA的分泌量而減少致病微生物對腸道的黏附[20]。本研究中添加酵母膏的生魚腸壁變薄可能也是由于這個原因。除此之外，酵母膏中還含有豐富的游離氨基酸、核苷酸及B族維生素，也能為腸道的健康發(fā)育提供充足的營養(yǎng)物質(zhì)。

隨著飼料中烏賊膏添加量的升高，生魚的腸道健康似乎有惡化的趨勢。這可能與影響生長的原因是一樣的。腸道不僅是食物消化、吸收和代謝的主要器官，物質(zhì)代謝和能量代謝非常旺盛，而且是重要的分泌和免疫器官，因此極易受到各種有害物質(zhì)的攻擊，誘發(fā)腸道疾病。腸道損傷在慢性應(yīng)激狀態(tài)下，表征不易察覺，但長期下來對腸道健康危害極大，最終影響動物的生長性能。烏賊膏中潛在的有毒、有害物質(zhì)可能對腸道的生長和發(fā)育產(chǎn)生不良影響，相關(guān)的數(shù)據(jù)還有待于進一步研究獲取。

4 結(jié)論

飼料中添加1%、2%的酵母膏及1%酵母膏+1%烏賊膏能顯著提高生魚的生長性能，改善腸道的組織結(jié)構(gòu)和健康，添加2%酵母膏的優(yōu)勢更明顯。飼料中添加1%和2%的烏賊膏對生魚生長性能的提高不如酵母膏明顯，且隨著添加量的增加，其生長性能和腸道健康狀況有下降的趨勢。在生魚飼料中酵母膏可以完全替代烏賊膏，建議在生魚配合飼料中添加1%～2%的酵母膏，過量使用烏賊膏可能對生魚的生長有不利影響。